YOU ARE DOWNLOADING DOCUMENT

Please tick the box to continue:

Transcript
Page 1: Babi Pendahuluan

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang Penelitian

Keracunan makanan merupakan suatu keadaan sakit yang disebabkan

makan makanan yang terkontaminasi oleh mikroba patogenik, toksin

mikroorganisme, substansi kimia maupun substansi organik.1 Keracunan makanan

biasanya bersifat akut dan menyerang banyak orang pada suatu waktu. Bakteri

patogenik tersebut harus terdapat dalam jumlah besar untuk menyebabkan

keracunan makanan, namun pada suhu yang sesuai, bakteri dapat berkembang

lebih cepat. Suhu optimal untuk perkembangan bakteri penyebab keracunan

makanan adalah 5 - 60°, karena itu makanan beresiko tinggi seperti daging, telur,

susu, sayur-sayuran dan buah-buahan tidak boleh ditinggalkan pada suhu tersebut

untuk waktu yang cukup lama. Berdasarkan data dari Sentra Informasi Keracunan

(SIKer), jumlah kasus keracunan pangan (dengan jumlah korban lebih dari 1

orang) pada tahun 2008 adalah 169 kejadian (berdasarkan data sampai Desember

2008). Bakteri merupakan penyebab dari 2/3 kasus keracunan makanan, yang

25,6% di antaranya disebabkan oleh Staphylococcus aureus)

Staphylococcus aureus adalah bakteri gram positif yang dalam keadaan

normal dapat menetap dalam rongga hidung, saluran cerna, dan kulit, namun

ketika berkembang dalam jumlah yang besar, dapat pula menyebabkan infeksi

pada daerah- daerah tersebut. Staphylococcus aureus merupakan salah satu

Page 2: Babi Pendahuluan

bakteri penyebab keracunan makanan yang dapat menghasilkan toksin tahan

panas. Bakteri ini tahan terhadap kadar garam yang dapat membunuh bakteri-

bakteri lainnya dan dapat ditransmisikan oleh orang-orang yang menderita radang

tenggorokan maupun infeksi kulit ketika menyiapkan makanan. Makanan yang

beresiko tinggi adalah daging, pasta, dan produk telur, seperti mayonnaise.

Makanan yang terkontaminasi tidak mengalami perubahan warna, bentuk, bau dan

rasa, namun menimbulkan gejala mual, muntah, diare dan keram perut 1-4 jam

setelah mengkonsumsi. Walaupun tidak bersifat fatal, tapi keracunan makanan

yang disebabkan oleh Staphylococcus aureus cukup sulit ditangani.

Indonesia merupakan negara yang kaya akan sumber daya alam, termasuk

diantaranya adalah buah pepaya. Tumbuhan pepaya ini sangat bermanfaat, karena

setiap bagian darinya memiliki khasiat. Batang, daun, buah, dan bahkan akarnya

telah banyak digunakan hingga saat ini. Salah satunya adalah untuk

mengempukkan laging. Peran ini dimungkinkan oleh adanya getah yang

mengandung enzim pemecah protein atau proteolitik dan populer dengan sebutan

papain dan kimopapain. Kedua enzim ini mempunyai kemampuan menguraikan

ikatan-ikatan dalam melekul protein sehingga protein terurai menjadi polipeptida

dan dipeptida. Selain enzim papain, getah pepaya mengandung lebih dari 50 asam

amino, antara lain asam aspartat, treonin, serin, asam glutamat, prolin, glisin,

alanin, valine, isoleusin, leusin, tirosin, fenilalanin, histidin, lysin, arginin,

triptophan, dan sistem.

Getah pepaya terdapat pada hampir seluruh bagian tumbuhan pepaya, dan

yang banyak digunakan dalam masyarakat adalah daun pepaya. Kandungan getah

Page 3: Babi Pendahuluan

yang paling banyak terdapat pada buah yang masih muda, yaitu sekitar dua kali

lipat bila : sandingkan dengan daun dan batang. Getah tersebut dihasilkan oleh

saluran- saluran getah yang banyak terdapat di bawah lapisan kulit buah.

Selain mengempukkan daging, getah buah pepaya juga bermanfaat dalam

bidang kesehatan. Hal ini pertama kali diselidiki oleh Bouchut pada tahun 1879,

seperti dikutip oleh Vina Fitriani. Setelah Bouchut, banyak pula ilmuwan yang -

eneliti peran tersebut. Beberapa contoh yaitu penelitian yang dilakukan oleh

Giordani R, Siepaio M, Moulin-Traffort J, dan Regli P pada tahun 1991 untuk

telihat efek antijamur papain terhadap Candida albicans, dan juga penelitian yang

menyelidiki efek antibakteri papain terhadap Escherichia coli oleh Jong Hyun

Kim pada tahun 1998. Walaupun tidak semua penelitian menghasilkan pendapat

yang sama, namun sebagian besar mendapatkan bahwa peran antimikroba tersebut

disebabkan oleh senyawa karpain dalam papain, yaitu alkaloid bercincin laktonat

dengan 7 kelompok rantai metilen. Karpain dapat mencerna protein

mikroorganisme ian mengubahnya menjadi peptone, sehingga mikroorganisme

kekurangan makanan ian mati. Selain karpain ada beberapa komponen organik

dalam papain yang sangat -•ermanfaat, diantaranya adalah benzylglucosinolate,

benzylisothiosianat (BITC), kolin, karpain, pseudokarpain, dan dehidrokarpain.

BITC juga merupakan antibakteri ian anticendawan yang efektif sebagai

penyembuh luka dan insektisida.

Keadaan ini membuat penulis tertarik untuk menyelidiki secara in vitro

daya antibakteri getah buah pepaya (dalam bentuk sediaan infusa kulit buah

Page 4: Babi Pendahuluan

muda) terhadap Staphylococcus aureus sebagai salah satu penyebab keracunan

makanan.

1.2 Identifikasi masalah

1. Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, masalah yang ingin

diteliti adalah:

2. apakah getah buah Carica papaya L. memiliki daya antibakteri terhadap

Staphylococcus aureus?

3. berapakah konsentrasi hambat minimum (KHM) getah buah Carica

papaya L. terhadap Staphylococcus aureus?

1.3 Maksud dan tujuan Penelitian

Maksud dari penelitian ini adalah mengetahui daya antibakteri getah buah

Caricapapaya L. terhadap Staphylococcus aureus.

Tujuan penelitian yaitu:

1. membuktikan adanya daya antibakteri getah buah Carica papaya L.

2. menilai konsentrasi hambat minimum getah buah Carica papaya L.

terhadap Staphylococcus aureus

3. menilai konsentrasi bunuh minimum getah buah Carica papaya L.

terhadap Staphylococcus aureus.

Page 5: Babi Pendahuluan

1.4 Kegunaan Penelitian

Manfaat secara ilmiah:

1. pemanfaatan getah buah Carica papaya L. secara ilmiah dalam ilmu

pengobatan di masa mendatang

2. sebagai dasar bagi penelitian selanjutnya

Manfaat praktis:

1. penggunaan getah buah pepaya dalam mencegah terjadinya keracunan

makanan

2. penggunaan getah buah pepaya untuk menurunkan jumlah bakteri

selama mengempukkan daging

Page 6: Babi Pendahuluan

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Carica papaya L.

2.1.1 Klasifikasi Ilmiah dan Nama Daerah

Menurut klasifikasi taksonomi, pepaya termasuk ke dalam

divisio : Magnoliophyta

kelas : Magnoliopsida

ordo " : Violales

familia : Caricaceae

genus : Carica

spesies : Carica papaya L.

Famili Caricaceae memiliki 4 genus, yaitu Carica, Jarilla, Jacaranta, dan

Cylicomorpha. Ketiga genus pertama merupakan tanaman asli America tropis,

sedangkan genus keempat berasal dari Afrika. Genus Carica memiliki 24 spesies,

salah satu di antaranya adalah Carica papaya L.. Tanaman dari genus ini banyak

diusahakan untuk dikonsumsi, sedangkan 3 genus lainnya hanya untuk dinikmati

keindahannya.

Pepaya dapat dijumpai hampir di seluruh kepulauan Indonesia, namun

beberapa lokasi mempunyai sebutan yang berbeda untuk buah ini. Di Jawa Barat

(Sunda), buah pepaya dikenal dengan nama Gedang, di Jawa Tengah disebut

kates, di Sulawesi kapaya, dan penduduk Ambon menyebutnya papas.

Page 7: Babi Pendahuluan

Tanaman pepaya mempunyai batang dan tangkai daun yang berongga dan

tidak bercabang, tinggi pohon dapat mencapai 10m. Daunnya merupakan daun

tunggal yang berukuran besar dan bercangap. Sedangkan bentuk buah bervariasi

dari bulat hingga lonjong.8

2.1.2 Varietas Pepaya

Pembagian varietas pepaya dibuat berdasarkan bentuk, ukuran, warna,

rasa, dan tekstur buah. Berdasarkan kriteria tersebut, dikenal buah pepaya yang

berukuran besar atau kecil, dengan berat buah berkisar antara 0,5-9 kg, berbentuk

bulat atau lonjong, daging buah berwarna merah atau kuning, keras atau lunak,

rasanya manis atau kurang manis, dan kulit buah licin atau kasar tebal. Di

Indonesia, varietas yang banyak ditanam adalah pepaya semangka, pepaya jinggo,

pepaya bangkok, pepaya Cibinong, pepaya meksiko, dan pepaya solo.8 Selain itu,

dikenal pula varietas pepaya mas, pepaya item, dan pepaya ijo. Ketiga jenis

pepaya ini sudah jarang ditemukan karena warna daging buah yang tidak begitu

menarik dan rasanya yang tidak manis.

Varietas pepaya yang penulis gunakan dalam penelitian adalah pepaya

semangka. Pepaya jenis ini merupakan varietas introduksi dari Kaledonia Baru

yang masuk ke Indonesia pada tahun 1930, di tempat asalnya pepaya ini dikenal

dengan nama annabone. Pada awalnya, varietas ini hanya digunakan untuk

produksi papain, namun karena rasa dan warnanya yang menarik, pepaya ini juga

menjadi buah meja yang sangat populer. Daging buah pepaya semangka berwarna

merah seperti buah semangka, rasanya manis dan berair banyak. Bentuk buahnya

Page 8: Babi Pendahuluan

lonjong berputing dengan berat kurang lebih 1 kg/buah.8 Buah yang sudah masak

memiliki kulit yang berwarna kuning dan permukaan yang licin.

Tanaman pepaya termasuk tanaman tropis basah. Kemampuan ini terlihat

dari bentuk batang yang lunak dan basah, serta bunga dan buah yang tersusun

pada ketiak daun di tajuk pohon. Tanaman ini membutuhkan sinar matahari

penuh, sebab dengan adanya sinar matahari yang banyak, pepaya akan lebih cepat

berbunga dan berbuah, proses pemasakan menjadi lebih cepat, dan rasa buah pun

menjadi lebih manis. Sifat tersebut membuat pepaya lebih sesuai ditanam di

daerah dataran rendah. Suhu optimal untuk pertumbuhan tanaman pepaya berkisar

antara 22-26°C, dengan suhu minimum 15°C dan suhu maksimum 43°C.8

Perkecambahan biji pun berlangsung lebih cepat (12-14 hari) bila suhu pada siang

hari 35°C dan suhu pada malam hari 26°C.8 Selain itu, pertumbuhan pepaya

memerlukan tingkat kelembapan yang tinggi, yaitu dengan curah hujan kira-kira

1.500-2.000 mm/tahun.8 Jika kondisi tersebut tidak terpenuhi, bunga-bunga akan

berguguran, penyerbukan berlangsung tidak sempurna, dan buah yang dihasilkan

memiliki bentuk yang tidak baik.8

2.13 Kandungan Pepaya

Tabel 2.1 Komposisi Buah PepayaUnsur Komposisi Buah Masak Buah Mentah

Energi (kal) 46 26Air (g) 86,7 92,4Protein (g) 0,5 2,1Lemak (g) * 0,1Karbohidrat (g) 12,2 4,9Vitamin A (IU) 365 50Vitamin B (mg) 0,04 0,02Vitamin C (mg) 78 19

Page 9: Babi Pendahuluan

Kalsium (mg) 23 50Besi (mg) 1,7 0,4Fosfor (mg) 12 16

Sumber: Sentra Informasi IPTEK, 2005

Keterangan

* sedikit sekali, dapat diabaikan

Berdasarkan tabel di atas, dapat dibedakan dengan jelas antara buah

pepaya mg masak dan yang mentah. Penulis menggunakan buah pepaya yang

mentah sebagai bahan uji karena kandungan enzim papain dalam getah buah yang

lebih tinggi dijelaskan kemudian), terlihat dari kadar protein yang lebih tinggi

pada buah mentah. Getah buah pepaya merupakan produk metabolisme yang

kadarnya bervariasi menurut umur buah. Pada saat buah masih mentah,

kandungan getahnya rendah, kemudian meninggi dan akhirnya menurun ketika

buah masak.8

2.1.4 Manfaat Pepaya

Pepaya merupakan tanaman yang sangat bermanfaat, karena seluruh

bagiannya dapat digunakan untuk kepentingan manusia. Buahnya yang masak,

sebagian besar dikonsumsi sebagai buah segar. Seiring dengan meningkatnya

kebutuhan akan buah pepaya ini, dikenal pula berbagai bentuk olahan buah

pepaya, di antaranya adalah manisan pepaya, koktil pepaya, jeli pepaya, jem

pepaya, saus buah pepaya, dan sirup pepaya. Selain sebagai pencuci mulut, buah

Page 10: Babi Pendahuluan

pepaya juga berfungsi sebagai penambah gizi karena kandungan vitamin dan

sumber energi yang cukup banyak.

Tidak hanya buahnya yang masak, buah, daun, dan bunga yang mentah

pun dapat dibuat sebagai bahan berbagai macam sayuran dan obat-obatan. Akar

tanaman pepaya pun dapat dimanfaatkan sebagai diuretik10, sehingga digunakan

oleh masyarakat sebagai obat untuk penyakit ginjal dan saluran kemih11. Daun

muda banyak dimasak untuk dijadikan lalap dan untuk meningkatkan nafsu

makan.11 Selain itu, daun pepaya juga dapat menyembuhkan penyakit malaria,

keram perut, demam, dan sebagai anti cacing.10

2.15 Getah Pepaya

Bahan dalam pepaya yang paling berperan pada pemanfaatan pepaya

adalah enzim papain yang terkandung dalam getah pepaya. Papain banyak

digunakan sebagai pengempuk daging, untuk menyembuhkan gangguan

pencernaan, membersihkan jaringan nekrotik pada luka dan jerawat, serta pada

penelitian ditemukan pula dapat bersifat sebagai anti tumor.10

Kata papain berasal dari bahasa inggris, yaitu papa (ya) dan in, yang

berarti suatu substansi dalam buah (getah) pepaya yang memiliki sifat enzimatis

untuk memecah protein (proteolitik).8 Pemanfaatan papain sebagai pelunak daging

telah lama diketahui dan dilaksanakan dengan cara membungkus daging dengan

daun pepaya yang telah dicacah. Saat ini, enzim papain sudah ada yang dijual

dalam bentuk bubuk dengan cara penggunaan yang lebih praktis. Setelah ditusuk-

tusuk dengan garpu, daging ditaburi dengan tepung papain. Tepung juga dapat

dilarutkan terlebih dahulu, baru kemudian daging direndam di dalamnya.

Page 11: Babi Pendahuluan

Selain penggunaan tradisional seperti di atas, papain juga banyak

dimanfaatkan dalam industri minumam, tepatnya dalam industri pembuatan bir.

Bir yang dibuat tanpa papain menjadi tidak jernih dan berkabut bila disimpan

dalam keadaan dingin.8 Industri makanan pun memanfaatkan enzim proteolitik ini

dalam industri keju, pengembangan kue, biskuit, dan roti.8

Peran papain dalam kesehatan dipergunakan industri farmasi untuk

pengobatan gangguan saluran pencernaan, dispepsia, dan gastritis.8

Di dalam dunia perdagangan dikenal 2 macam papain, yaitu papain kasar

(crude papain) dan papain murni. Papain kasar adalah getah pepaya yang

dikeringkan dan <emudian dihaluskan menjadi tepung, terdiri dari 4 jenis enzim

yaitu papain, :himopapain A, chimopapain B, dan papain peptidase A.8 Sedangkan

papain murni -ialah hasil pemisahan keempat enzim di atas.

Gambar 2.1 Struktur papain

Hampir seluruh bagian tanaman pepaya menghasilkan getah, dan buah

merupakan penghasil terbanyak. Getah tersebut dihasilkan oleh saluran-saluran

getah yang banyak terdapat di bawah lapisan kulit buah atau lapisan

Page 12: Babi Pendahuluan

mesokarpium.8 Getah pepaya mengandung 50% bahan yang tidak larut dalam air

dan tidak bersifat enzimatis. Kandungan getah pada buah pepaya pada awalnya

rendah, kemudian meninggi dan akhirnya menurun kembali, sehingga kandungan

getah maksimal teijadi pada saat buah berumur 75-100 hari atau 2,5-3 bulan.8

Papain sangat mudah tercemar (oleh kotoran, debu, serangga, cendawan,

dan bakteri) dan teroksidasi pada suhu di atas 70°C, serta membeku di bawah

cahaya matahari dan pengaruh udara.8 Waktu menyadap getah dari buah pepaya

yang paling baik adalah 1-2 jam setelah matahari terbit, yaitu antara jam 6-8 pagi

atau sore hari saat matahari akan tenggelam.8

Selain mengempukkan daging, getah buah pepaya juga bermanfaat dalam

bidang kesehatan. Hal ini pertama kali diselidiki oleh Bouchut pada tahun 1879.4

Setelah Bouchut, banyak pula ilmuwan yang meneliti peran tersebut. Beberapa

contoh yaitu penelitian yang dilakukan oleh Giordani R, Siepaio M, Moulin-

Traffort J, dan Regli P pada tahun 1991 untuk melihat efek antijamur papain

terhadap Candida albicans6; dan juga penelitian yang menyelidiki efek antibakteri

papain terhadap Escherichia coli oleh Jong Hyun Kim pada tahun 19987.

Walaupun tidak semua penelitian menghasilkan pendapat yang sama, namun

sebagian besar mendapatkan bahwa peran antimikroba tersebut disebabkan oleh

senyawa karpain dalam papain, yaitu alkaloid bercincin laktonat dengan 7

kelompok rantai metilen.5 Karpain dapat mencerna protein mikroorganisme dan

mengubahnya menjadi peptone, sehingga mikroorganisme kekurangan makanan

dan mati.4 Selain karpain ada beberapa komponen organik dalam papain yang

sangat bermanfaat, diantaranya adalah benzylglucosinolate, benzylisothiosianat

Page 13: Babi Pendahuluan

(BITC), kolin, karpain, pseudokarpain, dan dehidrokarpain. BITC juga merupakan

antibakteri dan antijamur yang efektif sebagai penyembuh luka dan insektisida.4

2.2 Staphylococci

2.2.1 Morfologi dan Identifikasi

Stafilokokus adalah sel berbentuk bulat berdiameter sekitar l µm yang

tersusun dalam kumpulan ireguler seperti buah anggur.3 Stafilokokus bersifat

gram positif, kecuali pada sel yang sudah menua, dapat bersifat gram negatif.

Stafilokokus bersifat nonmotil dan tidak dapat membentuk spora, tetapi dapat

membentuk pigmen.

Stafilokokus merupakan bakteri anaerob fakultatif, tetapi dapat tumbuh

lebih baik pada keadaan aerob. Pertumbuhan terjadi pada suhu 6,5°C hingga

46°C, dengan suhu optimum 30°C-37°C.13 Sedangkan pH optimal

perkembangbiakan bakteri ini adalah 7-7,5, walaupun stafilokokus dapat tumbuh

pada pH 4,2-9,3.13

Koloni stafilokokus pada media padat berbentuk bundar, halus, tebal, dan

mengilap.3 S. aureus biasanya membentuk koloni abu-abu atau kuning keemasan,

sedangkan koloni S. epidermidis berwarna abu-abu sampai putih. S. aureus juga

mampu melisis darah (hemolisis), yang membedakannya dengan Staphylococcus

epidermidis.

Stafilokokus memproduksi katalase, yang membedakannya dengan

streptokokus. Stafilokokus memfermentasi karbohidrat dan menghasilkan asam

laktat. Stafilokokus relatif tahan terhadap pengeringan, pada suhu 50° selama 30

Page 14: Babi Pendahuluan

menit, dan bertahan hidup pada NaCl 9%, tetapi aktivitasnya segera terhambat

oleh bahan kimia tertentu.

2.2.2 Struktur Antigenik

Stafilokokus mengandung antigen polisakarida dan protein. Peptidoglikan

memberikan eksoskeleton kaku pada dinding sel. Peptidoglikan penting pada

patogenesis infeksi: menyebabkan produksi IL-1 dan antibodi, aktivitas mirip

endotoksin, dan mengaktifkan komplemen.3 Struktur lainnya yang memberikan

kontribusi pada antigenitas stafilokokus adalah asam teikoik, protein A, kapsul,

dan koagulase {dumping factor)?

Gambar 2.2 Struktur antigenik Staphylococcus aureus14

2.2.3 Enzim dan Toksin

Page 15: Babi Pendahuluan

Stafilokokus dapat menyebabkan penyakit lewat kemampuannya

bermultiplikasi dan menyebar luas dalam jaringan, dan lewat produksi zat-zat

ekstraselular seperti enzim dan toksin.

A. Katalase

Katalase mengubah hidrogen peroksida menjadi air dan oksigen. ' Tes

katalase dapat membedakan stafilokokus dengan streptokokus.

B. Koagulase dan dumping factor

Koagulase dapat mengikat protrombin, sehingga menjadi aktif

danmenginisiasi polimerasi fibrin. Koagulase juga mampu mendeposit

fibrin pada permukaan bakteri sehingga bakteri tidak terdeteksi oleh sel

fagositik.

C. Enzim lain

Hyaluronidase, stafilokinase, Proteinase, lipase, dan ß-laktamase.

D. Eksotoksin

A-toxin adalah protein heterogen yang bekerja pada membran sel eukariot

dan bersifat hemolisin. B-toksin mendegradasi sfingomyelin dan karena itu

bersifat toksin terhadap banyak jenis sel, termasuk sel darah merah.

E. Leukosidin

Toksin ini dapat membunuh sel darah putih pada manusia.

F. Toksin Eksfoliatif

Toksin ini dapat menyebabkan deskuamasi generalisata dengan cara

menguraikan matriks mukopolisakarida pada epidermis.

G. Toksin Toxic Shock Syndrome

Page 16: Babi Pendahuluan

TSST dapat berikatan pada MHC kelas II, menstimulasi sel T, dan

mengakibatkan toxic shock syndrome.

H. Enterotoksin

Enterotoksin terdiri dari beberapa tipe (A-E, G-I, K-M). Enterotoksin

bersifat tahan panas, dan resisten terhadap enzim pencernaan.3

Enterotoksin merupakan penyebab keracunan makanan, dan diproduksi

saat S. aureus tumbuh pada makanan yang mengandung karbohidrat atau

protein.

2.2.4 Patogenesis

Stafilokokus merupakan flora normal pada kulit manusia, saluran nafas,

dan saluran pencernaan. Infeksi S. aureus pada hidung terjadi pada 20-50%

manusia. Stafilokokus juga sering ditemukan pada pakaian, sprei, dan lain-lain.

Kemampuan patogenisitas dari suatu strain S. aureus adalah kombinasi dari

faktor-faktor ekstraselular dan toksin yang dihasilkannya.

Staphylococcus aureus menyebabkan keracunan makanan melalui

produksi enterotoksin. Toksin ini bekeija dengan menghasilkan respon emetik dan

aktivitas superantigen.1 Sebenarnya, tidak banyak yang diketahui mengenai

mekanisme enterotoksin dalam mengakibatkan respon emetik, namun diduga

bahwa enterotoksin tersebut memiliki efek langsung terhadap epitel usus dan saraf

vagus, sehingga mempengaruhi waktu transit isi usus dan menstimulasi pusat

muntah.1 Hal ini menyebabkan gejala mual, muntah dan diare pada penderita

keracunan makanan. Selain itu, enterotoksin stafilokokus juga bersifat

Page 17: Babi Pendahuluan

superantigen, yaitu dapat menstimulasi aktivasi dan proliferasi limfosit T yang

tidak spesifik.1 Reaksi itu mengakibatkan sekresi interleukin yang berlebihan,

yang kemudian berperan pula dalam timbulnya gejala keracunan makanan.1

2.2.5 Patologi

Prototipe lesi stafilokokus berupa furunkel atau abses lokal lainnya.

Koagulase diproduksi dan fibrin berkumpul di sekitar lesi dan di dalam limfatik,

sehingga membentuk dinding yang membatasi proses dan yang diperkuat dengan

adanya akumulasi sel-sel radang serta jaringan fibrosa.16 Di dalam lesi tersebut,

pengenceran dari sel nekrotik teijadi. Drainase sel-sel yang telah mencair diikuti

dengan pengisian kavitas dengan jaringan granulasi dan penyembuhan.16

Dari abses lokal, organisme dapat menyebar melalui jaringan limfatik dan

darah ke seluruh bagian tubuh.3 S. aureus dapat menyebabkan pneumonia,

meningitis, empyema, endokarditis, atau pun sepsis.3 Stafilokokus juga dapat

menyebabkan penyakit melalui produksi toksin.

Infeksi stafilokokus lokal bisa muncul sebagai jerawat, abses, atau pun

furunkel.3 Sedangkan keracunan makanan karena enterotoksin ditandai dengan

periode inkubasi yang pendek, mual, muntah, dan diare, serta penyembuhan yang

juga cepat.3

2.2.6 Laboratorium Diagnostik Staphylococcus aureus

A. Spesimen

Page 18: Babi Pendahuluan

Pus, darah, aspirasi trakea, dan cairan spinalis dapat digunakan, tergantung

dari lokasi infeksi.

B. Kultur

Spesimen yang ditanam pada agar darah akan menghasilkan koloni dalam

waktu 18 jam pada suhu 37°C, tetapi hemolisis dan produksi pigmen akan

lebih optimal pada suhu ruangan. 9

C. Teskatalase

Suspensi bakteri pada slide ditambahkan dengan setetes hidrogen

peroksida 3%, pembentukan gelembung udara mengindikasikan hasil

positif.

D. TesKoagulase

Plasma kelinci yang telah diencerkan dengan perbandingan 1:5 dicampur

dengan kultur kaldu, kemudian inkubasi pada suhu 37°C. Hasil positif

ditunjukkan dengan adanya gumpalan.

2.2.7 Pengendalian Infeksi Stafilokokus

Infeksi stafilokokus tidak pernah bisa sepenuhnya dikendalikan karena

bakteri ini merupakan flora normal pada manusia. Penyebaran penyakit dapat

dicegah dengan meningkatkan sanitasi dan menangani material yang

terkontaminasi.13 Pasien Rumah Sakit, bayi baru lahir, dan orang tua yang

beresiko tinggi sebaiknya dihindarkan dari orang yang memiliki lesi

stafilokokus.13 Begitu pula dengan prosedur operasi dan instrumentasi, semuanya

harus dilaksanakan dengan memperhatikan teknik aseptik.

Page 19: Babi Pendahuluan

2.3 Mekanisme Kerja Obat Antimikrobial

Berdasarkan mekanisme kerjanya, obat-obat antimirobial dapat

diklasifikasikan menjadi 5 macam, yaitu inhibitor sintesis dinding sel (β-lactams,

vancomycin), inhibitor fungsi membran sel (isoniazid, amphotericin B), inhibitor

sintesis protein (tetracyclin, aminoglicoside, macrolide, clindamycin,

chloramphenicol), inhibitor sintesis dan fungsi asam nukleat (fluoroquinolone,

rifampin), dan inhibitor metabolisme folat (sulfonamide, trimethoprim).18

Sedangkan mekanisme keija antibakterial getah buah C. papaya yang

diperankan oleh enzim papain, terjadi melalui pemecahan protein dinding sel dan

komponen protein dalam bakteri menjadi peptone, sehingga bakteri tidak dapat

menjalankan fungsinya, lisis, dan mati.

2.4 Metode Kirby Bauer

Sebelum pengujian dilaksanakan, sebaiknya pengaruh faktor lingkungan terhadap

aktifitas antibiotik diminimalisasi. Hal tersebut dilakukan dengan tujuan:

Page 20: Babi Pendahuluan

mengoptimalkan kondisi pertumbuhan bakteri, sehingga inhibisi

pertumbuhan yang terjadi hanya dihubungkan dengan agen antimikrobial,

bukan terbatasnya nutrisi, temperatur, dan lingkungan pertumbuhan

optimisasi kondisi yang menjaga integritas dan aktivitas antimikrobial,

sehingga tidak teijadi inaktivasi obat oleh lingkungan

mempertahankan reproduksibilitas dan konsistensi hasil penelitian

Komponen yang perlu distandardisasi meliputi: ukuran inokulum bakteri,

media pertumbuhan, kondisi, suhu, dan durasi inkubasi, serta konsentrasi

antimikrobial.

2.4.1 Prinsip Pengujian Daya Antibakteri

Terdapat 3 metode untuk mengukur daya antibakteri, yaitu:

o metode yang secara langsung mengukur aktivitas agen antimikrobial

terhadap bakteri

o metode yang secara langsung mendeteksi adanya mekanisme resistansi

spesifik dari bakteri tertentu

o metode yang mengukur interaksi antara antimikrobial dan bakteri

Metode yang penulis gunakan adalah metode jenis pertama, dengan

pengujian konvensional metode difusi dan dilusi. Sebelum percobaan dilakukan,

inokulum bakteri harus disiapkan dengan baik. Untuk mendapatkan inokulum

yang sesuai, terdapat 2 kriteria penting, yaitu adanya kultur murni dan inokulum

standar.20

Page 21: Babi Pendahuluan

Kultur murni didapatkan dengan cara memilih 4-5 koloni bakteri yang

memiliki morfologi sama, memasukkannya ke dalam media cair, dan

menginkubasinya selama 16-24 jam untuk mendapatkan pertumbuhan aktif yang

baik.20 Sedangkan inokulum standar didapatkan dengan cara membandingkan

tingkat kekeruhan suspensi bakteri dengan standar kekeruhan McFarland yang

dibuat dengan mencampurkan 1% asam sulfurik dan 1,175% barium klorida.20

Standar McFarland 0,5 memiliki densitas optikal yang sebanding dengan densitas

suspensi bakteri dari 1,5 x 108 colony forming units (CFU)/ml.

2.4.2 Metode Difusi

Metode difusi menggunakan disk kertas saring yang mengandung

antibiotik. Ketika disk yang mengandung agen antimikrobial dengan konsentrasi

tertentu diletakkan pada permukaan media dengan bakteri, agen tersebut akan

berdifusi ke segala arah dan membentuk gradien konsentrasi di sekitar disk.20

Setelah inkubasi, terlihat bahwa bakteri tidak akan tumbuh pada bagian dimana

konsentrasi antibiotik tertentu mampu menghambat pertumbuhannya. Diameter

dari area inhibisi tersebut kemudian diukur dalam milimeter.

Mueller-Hinton merupakan medium agar standar yang digunakan untuk

memeriksa daya antibakteri.20 Untuk memastikan difusi obat yang merata, disk

antibiotik harus dilekatkan dalam posisi horizontal pada permukaan agar.20

Tetapi, sebelum disk dilekatkan, suspensi bakteri yang telah memiliki kekeruhan

yang sama dengan kekeruhan McFarland harus diinokulasikan terlebih dahulu

pada permukaan medium. Permukaan media dioles dalam 3 arah untuk

Page 22: Babi Pendahuluan

memastikan distribusi bakteri yang merata. Lima belas menit kemudian, disk

antibiotik dapat diletakkan dan cawan petri tersebut sebaiknya diinkubasi dalam

keadaan terbalik untuk menghindari penumpukan uap air yang dapat

mempengaruhi interpretasi hasil percobaan.20 Inkubasi dilakukan pada suhu 35°C

selama 16-24 jam.20

Setelah inkubasi, permukaan media harus diperiksa untuk memastikan

adanya pertumbuhan bakteri yang merata dan memadai. Bila teijadi kontaminasi

dan pertumbuhan bakteri tidak merata, maka hasil percobaan tidak boleh

diinterpretasikan.20 Kemudian, pembacaan hasil dilakukan dengan latar belakang

yang gelap dan cahaya yang cukup, sehingga diameter inhibisi dapat diukur

dengan baik.20

2.4.3 Metode Dilusi

Berbeda dengan metode difusi yang menggunakan media padat, metode

dilusi dilakukan dalam media cair. Konsentrasi antibiotik yang digunakan

biasanya merupakan hasil dari 2 kali pengenceran dari konsentrasi sebelumnya.20

Konsentrasi terendah yang mampu menghambat pertumbuhan bakteri

didefinisikan sebagai Konsentrasi Hambat Minimum (KHM).20

Komponen utama dari metode ini adalah persiapan yang baik dari

pengenceran agen antimikrobial yang akan dimasukkan ke dalam media Mueller-

Hinton cair, dan suspensi bakteri yang sesuai dengan standar kekeruhan

McFarland 0,5 merupakan komponen awal yang digunakan dalam metode ini.20

Tabung reaksi tersebut kemudian diinkubasi pada suhu 35°C selama 16-24 jam.

Page 23: Babi Pendahuluan

Hal yang perlu diperhatikan adalah keperluan akan adanya kontrol

pertumbuhan yang tidak mengandung agen antimikrobial dan kontrol steril yang

tidak mendapatkan inokulasi bakteri.20 Bila terdapat pertumbuhan pada kontrol

pertumbuhan dan tidak terdapat pertumbuhan pada kontrol steril, pembacaan hasil

dari tabung-tabung reaksi yang lain baru dapat dilakukan. Pertumbuhan bakteri

ditandai dengan adanya kekeruhan pada dasar tabung.

2.5 Kerangka Pemikiran

Hampir setiap bagian dari tanaman pepaya dapat menghasilkan getah dan

bermanfaat bagi manusia, namun buah adalah penghasil getah terbanyak.4 Getah

buah pepaya sudah banyak dimanfaatkan oleh masyarakat dan industri-industri.

Masyarakat menggunakan getah pepaya untuk mengempukkan daging, mengobati

gangguan pencernaan, sebagai penyembuh luka, dan sebagainya. Industri

makanan dan minuman pun memanfaatkan getah pepaya tersebut dalam

pembuatan bir, roti, dan lain-lain.8 Selain itu, getah buah pepaya juga digunakan

dalam industri farmasi untuk obat jerawat dan antiinflamasi. Kandungan getah

pepaya yang berperan dalam pemanfaatan di atas adalah papain.

Papain merupakan suatu enzim yang bersifat proteolitik, yaitu enzim yang

dapat memecah protein.4 Mengenai pemanfaatannya dalam bidang medis,

beberapa ilmuwan telah melakukan penelitian untuk menyelidiki kandungan

papain yang dapat bersifat sebagai antibakteri dan antijamur. Vina Fitriani

melaporkan bahwa pada tahun 1879, Bouchut menemukan senyawa di dalam

papain yang dapat bersifat antibakteri, yaitu karpain, suatu alkaloid bercincin

Page 24: Babi Pendahuluan

laktonat dengan 7 kelompok rantai metilen.4 Penelitian lain oleh Giordani R,

Siepaio M, Moulin-Traffort J, dan Regli P pada tahun 1991 juga memiliki

pendapat yang sama.6 Bahkan penelitian tersebut menemukan senyawa selain

karpain yang dapat bersifat antibakteri dan antijamur, yaitu BITC

(benzylisothiosianat).

Masalah yang akan penulis bahas mengenai daya antibakteri getah buah

Carica papaya L. terhadap bakteri Staphylococcus aureus. S. aureus merupakan

bakteri kokus gram positif yang memiliki antigen polisakarida dan protein pada

dinding sel dan organel-organel sel.3 Struktur antigenik ini berperan penting

dalam proses aktivasi sistem imunitas. Selain itu, S. aureus juga berpotensi

menyebabkan penyakit melalui produksi toksin, seperti pada keracunan makanan

yang diakibatkan oleh enterotoksin.3 Berdasarkan mekanisme kerja papain sebagai

enzim proteolitik, maka papain dapat menghancurkan bakteri S. aureus melalui

pemecahan protein dinding sel dan komponen protein lain pada bakteri.4

BAB III

BAHAN DAN METODE PENELITIAN

Page 25: Babi Pendahuluan

3.1 Bahan Penelitian

3.1.1 Bahan Uji

Infusa kulit buah Carica papaya L. muda yang mengandung getah buah.

Buah yang akan digunakan dalam penelitian ini merupakan jenis pepaya

semangka, didapatkan dari pohon pepaya di Jatinangor, yang berusia 2,5-3 bulan

dan berdiameter 6-7 cm.

3.1.2 Bakteri Uji

Staphylococcus aureus yang diperoleh dari Laboratorium Mikrobiologi

Fakultas Kedokteran Universitas Padjadjaran.

3.1.3 Alat dan Bahan Penelitian

Alat-alat yang diperlukan adalah:

Pisau untuk mengiris kulit buah pepaya

Kompor

Timbangan

Panci infusa

Bekerglas ukuran 100 ml

Perforator untuk membuat sumur pada agar Mueller-Hinton

Pipet steril

Cawan petri

Tabung reaksi

Page 26: Babi Pendahuluan

Lampu Spiritus

Jangka sorong

Lemari pengeram

Jarum ose

Corong dan kasa steril

Alat-alat lain yang lazim digunakan di Laboratorium Mikrobiolog

Sedangkan bahan-bahan yang dibutuhkan ialah:

Mueller-Hinton agar

Mueller-Hinton cair

Aquadest steril

3.2 Metode Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian mikrobiologi eksperimental, bersifat

semi kuantitatif dan dilaksanakan dengan menggunakan metode difusi dan metode

dilusi :engan agar Mueller-Hinton

3.3 Prosedur Penelitian

3.3.1 Prosedur Pembuatan Infusa Getah

a) Pilih buah pepaya yang berumur 2,5-3 bulan

b) Kupas kulit buah sedalam 3-5 mm. Kemudian iris kulit buah tersebut ke

dalam potongan-potongan kecil

Page 27: Babi Pendahuluan

c) Masukkan 10 gram potongan kulit buah ke dalam tabung reaksi dan

tambahkan 10 ml aquadest

d) Panaskan tabung tersebut dalam panci infusa hingga mendidih. Setelah

mendidih, biarkan api kompor menyala selama 15 menit pada suhu sekitar

90°C.21 Isi tabung kemudian disaring dan filtrat yang dihasilkan digunakan

sebagai bahan uji. Filtrat tersebut dianggap sebagai konsentrasi infusa

100%.

e) Semua prosedur dilakukan secara aseptis

3.3.2 Prosedur Pembuatan Konsentrasi Getah

a) 100%: gunakan infusa kulit buah tanpa pelarut aquadest

b) 75%: campurkan infusa kulit buah dan pelarut aquadest dengan

perbandingan 3:1

c) 50%: campurkan infusa kulit buah dan pelarut aquadest dengan

perbandingan 1:1

d) 25%: campurkan infusa kulit buah dan pelarut aquadest dengan

perbandingan 1:3

3.3.3 Metode Difusi

1. Buat suspensi bakteri uji yang berumur 24 jam, distandarisasi dengan Mc

Farland 0,5

2. 1 Masukkan 1 ml suspensi bakteri tersebut ke dalam cawan petri steril

Page 28: Babi Pendahuluan

3. Kemudian, tuangkan Mueller-Hinton cair sebanyak 30 ml ke dalam cawan

petri yang sama hingga setinggi 4 mm dan diamkan sampai memadat dan

membentuk agar

4. Buat 5 sumur berdiameter 1 cm pada agar tersebut dengan logam yang

dipanaskan

5. Tuangkan infusa kulit buah C. papaya L. sebanyak 0,3 ml ke dalam

masing- masing sumur dengan konsentrasi yang berbeda-beda (25%, 50%,

75%, dan 100%) dan aquadest steril sebagai kontrol

6. Inkubasi selama 24 jam pada suhu 37°

7. Kemudian, ukur daerah hambat yang terbentuk\

8. Bila didapatkan daya antimikroba secara difusi, penelitian dilanjutkan

dengan cara dilusi untuk mendapatkan KHM dan KBM

9. Percobaan ini dilakukan 3 kali dengan bahan uji, bakteri uji, dan pada

waktu yang berbeda.

33.4 Metode Difusi: Konsentrasi Hambat Minumum

Keterangan:A = kontrolB = konsentrasi getah 25% C = konsentrasi getah 50% D = konsentrasi getah 75% E = konsentrasi getah 100%

Page 29: Babi Pendahuluan

1. Siapkan 6 tabung reaksi

2. Tuangkan 1 ml infusa kulit buah C. papaya dengan konsentrasi yang

berbeda- beda (100, 50, 25, dan 12,5%) ke dalam 4 dari 6 tabung reaksi

tersebut, dan 1 ml infusa kulit buah 100% ke dalam 1 tabung reaksi lagi

sebagai kontrol steril

3. Kemudian masukkan 1 ml suspensi bakteri uji (Mc Farland 0,5) yang

berada dalam Mueller-Hinton cair ke 5 tabung reaksi tersebut

4. Siapkan pula 1 ml suspensi bakteri uji dengan Mueller-Hinton cair pada

tabung terakhir, yang digunakan sebagai kontrol pertumbuhan

5. Inkubasi pada suhu 37° selama 24 jam

6. Amati pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan kekeruhan pada media.

Tabung reaksi dengan konsentrasi infusa kulit buah terendah yang jernih

merupakan KHM

3.3.5 Metode Dilusi: Konsentrasi Bunuh Minimum

Dari hasil pengujian konsentrasi hambat minimum getah buah C. papaya

di atas, tabung uji jernih ditanam kembali pada media padat. Kemudian diinkubasi

pula selama 24 jam pada suhu 37°. Amati pertumbuhan bakteri yang terjadi.

Permukaan media dengan konsentrasi infusa kulit buah terendah yang tidak

terdapat pertumbuhan bakteri adalah KBM.

BAB IV

Page 30: Babi Pendahuluan

HASIL PENELITIAN

4.1 Data dari Metode Difusi

Percobaan tahap pertama ini dilakukan dengan 4 tingkat konsentrasi dari

infusa kulit buah Carica papaya L (25, 50, 75, dan 100%) dan aquadest sebagai

kontrol, untuk melihat ada/tidaknya daya antibakteri terhadap Staphylococcus

aureus melalui besarnya diameter hambat. Setelah melakukan 3 kali pengulangan

dengan metode difusi, didapatkan hasil negatif dari keempat konsentrasi dari

infusa kulit buah Carica papaya tersebut, yaitu ditandai dengan tidak adanya

diameter hambat di sekitar sumur infusa kulit buah.

Tabel 4.1 Diameter hambat pada Metode Difusi

PengulanganKonsentrasi Infusa Kulit Buah Pepaya

100% 75% 50% 25%

1 - - - -

2 - - - -

3 - - - -

Percobaan ke tahap berikutnya tidak dilanjutkan karena percobaan tahap

pertama tersebut tidak memberikan hasil positif.

4.2 Analisis Data

Page 31: Babi Pendahuluan

Enzim papain merupakan kandungan dalam getah pepaya yang memiliki

daya antibakteri, melalui kemampuan proteolitik terhadap dinding sel maupun

komponen protein lain pada bakteri.4 Enzim ini banyak digunakan dalam industri

farmasi pada infeksi kulit seperti jerawat, dan sebagai antiinflamasi paskaoperasi.5

Di masyarakat, getah juga sering digunakan secara langsung untuk mengobati

luka.

Vina Fitriani menyebutkan, sejak tahun 1879 Bouchut telah melakukan

penelitian mengenai daya antimikroba enzim papain dan menemukan komponen

papain yang dapat bersifat antibakteri, yaitu karpain, suatu senyawa alkaloid yang

memiliki cincin laktonat dengan 7 kelompok rantai metilen.4 Penelitian pun

dilanjutkan oleh Giordani R, Siepaio M, Moulin-Traffort J, dan Regli P pada

tahun 1991 untuk menyelidiki daya antijamur getah buah Carica papaya L.

terhadap Candida albicans.6 Penelitian tersebut membuahkan hasil positif, yaitu

terhambatnya pertumbuhan Candida albicans oleh getah Carica papaya L..

Setelah diteliti lebih lanjut, ditemukan pula senyawa lain dalam papain yang dapat

bersifat antibakteri dan anticendawan, yaitu BITC (benzylisothiosianat).

Papain sendiri merupakan protein enzim. Sebagai enzim, papain dapat

bekerja optimal pada suhu kurang dari 60°C.8 Suhu di atas 70°C akan

mengoksidasi dan merusak kualitas papain. Selain itu, substansi papain sangat

mudah tercemar oleh kotoran, serangga dan mikroorganisme bila dikeringkan di

bawah panas matahari.8 Oleh karena itu, Tropical Products Institute di London

mengembangkan metode pengering buatan dalam produksi papain dari hasil

sadapan getah buah pepaya. Pengering tersebut terdiri dari bangunan tertutup

Page 32: Babi Pendahuluan

yang pada lantai bawah tanahnya dipasang sebuah tungku dengan suhu ruangan

diatur sekitar 55°C.

Bakteri uji yang digunakan dalam penelitian penulis adalah

Staphylococcus aureus. S. aureus merupakan bakteri kokus gram positif yang

dapat memproduksi enzim katalase, hyaluronidase, proteinase, dan lipase.3 Enzim-

enzim tersebut membantu proses invasi S. aureus ke dalam jaringan tubuh

manusia dengan cara memecah protein, lemak, dan matrik jaringan ikat di sekitar

fokus infeksi. Bakteri ini juga dapat menyebabkan keracunan makanan karena

memiliki kemampuan memproduksi enterotoksin.3

Berdasarkan penelitian-penelitian yang dilakukan oleh para ahli mengenai

daya antibakteri getah buah pepaya dan komponen antimikroba di dalam getah

pepaya tersebut, bakteri S. aureus seharusnya juga dapat dihambat. Tetapi,

percobaan yang penulis lakukan menunjukkan hasil negatif. Ditinjau dari teori-

teori yang telah dipaparkan di atas, hal tersebut dapat dijelaskan dengan 3 alasan.

Pertama, sediaan getah C. papaya yang digunakan tidak sama dengan sediaan

yang digunakan dalam industri dan penelitian para ahli. Selain karena buah

pepaya yang tumbuh di negara tropis seperti Indonesia memiliki kadar air yang

lebih banyak, sediaan infusa yang digunakan juga mengandung pelarut air,

sehingga dapat mempengaruhi kemampuan yang dimiliki oleh getah buah C.

papaya tersebut, sebab papain tidak sepenuhnya larut dalam air.

Kedua, sifat bakteri S. aureus sendiri yang dapat menghasilkan enzim

protease. Enzim tersebut bisa memecah papain yang juga merupakan protein.

Page 33: Babi Pendahuluan

Ketiga, daya antibakteri getah buah C. papaya yang memang sangat rendah atau

tidak cukup kuat.

Hal ini didukung oleh penelitian Jong Hyun Kim pada tahun 1998,

mengenai daya antibakteri getah C. papaya terhadap Escherichia coli. Penelitian

ini mendapatkan hasil negatif.7 Namun setelah EDTA {ethylene diamine

tetraacetic acid) ditambahkan pada sediaan getah, percobaan menunjukkan hasil

positif. Hal ini dimungkinkan oleh sifat ionik polar EDTA yang kuat22, dengan

demikian komponen-komponen getah akan lebih mudah larut dalam air, sehingga

meningkatkan daya antibakteri dari getah buah C. papaya tersebut.

Page 34: Babi Pendahuluan

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

1. Setelah melakukan percobaan di laboratorium, penulis dapat menyimpulkan

bahwa infusa kulit buah Carica papaya L. muda tidak memiliki daya

antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus. Hal ini dapat disebabkan:

sediaan getah yang digunakan dalam penelitian penulis tidak sama

dengan sediaan getah dalam industri dan penelitian sebelumnya

bakteri Staphylococcus aureus yang dapat menghasilkan enzim protease

2. KHM tidak dapat ditentukan karena percobaan semi kuantitatif dengan

metode difusi menunjukkan hasil negatif

3. KBM juga tidak dapat ditentukan karena infusa kulit buah Carica papaya L.

muda tidak memiliki daya antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus

5.2 Saran

Diharapkan, penelitian lanjutan dapat dilakukan dengan menggunakan:

1. ekstrak getah buah pepaya

2. sediaan getah yang dikeringkan terlebih dahulu, kemudian ditumbuk halus

menjadi tepung, sebab industri dan penelitian sebelumnya menggunakan

sediaan tersebut. Sediaan ini hendaknya dipersiapkan dalam keadaan septik

dan aseptik.

Page 35: Babi Pendahuluan

DAFTAR PUSTAKA

1. Loir YL, Baron F, Gautier M. Staphylococcus aureus and food poisoning.

2003 March 31, 2003;2(l):63-76.

2. Sundari D. Kejadian Keracunan Pangan: Sentra Informasi Keracunan

Nasional Badan Pengawas Obat dan Makanan; 2008.

3. Brooks GF, Carroll KC, Butel JS, Morse S A. Jawetz, Melnick, and

Adelberg's Medical Microbiology. 24 ed: McGraw-Hill; 2007.

4. Fitriani V. Getah Sejuta Manfaat. Trubus. April 12, 2006.

5. Handita LK. Getah Pepaya Atasi Kanker. Kompas. 10 Januari 2009.

6. Giordani R, Siepaio M, Moulin-Traffort J, Regli P. Antifungal action of

Carica papaya latex: isolation of fungal cell wall hydrolysing enzymes.

1991 ;34(11 -12):469-77.

7. Kim JH, Park WB, Park CY, Kim OK. Antimicrobial Activity of

Lysozyme and Papain Activated by EDTA and Cysteine against

Escherichia coli in Culture Medium and in Aqueous Aloe vera Extract.

1998;7(3): 160-4.

8. Kalie MB. Bertanam Pepaya. 13 ed. Jakarta: Penebar Swadaya; 1996.

9. Duke JA. CRC Handbook of Medicinal Herbs. CRC Press; 1985.

10. Bever O-B. Medicinal Plants in Tropical West Africa: Cambridge

University Press; 1986.

11. Prihatman K. Pepaya: Sistim Informasi Manajemen Pembangunan di

Perdesaan, BAPPENAS Februari 2000.

Page 36: Babi Pendahuluan

12. Stryer L. Biochemistry. 4 ed. United States: W.H. Freeman and Company;

1995.

13. Joklik WK, Willett HP, Amos DB, Wilfert CM, editors. Zinsser

Microbiology. 20 ed. USA: Appleton and Lange; 1992.

14. Todar K. Todar's Online Textbook of Bacteriology. University of

Wisconsin; 2008.

15. Prescott LM, Harley JP, Klein DA. Microbiology. 5 ed. US: McGraw-Hill;

2003.

16. Ryan KJ, editor. Sherris Medical Microbiology. 3 ed. Connecticut:

Appleton and Lange; 1994.

17. Holt JG, Krieg NR, Sneath PHA, Staley JT, Williams ST. Bergey's

Manual of Determinate Bacteriology. 9 ed. USA: Williams and Wilkins;

1994.

18. Howland RD, Mycek MJ. Lippincott's Illustrated Reviews: Pharmacology.

3 ed. United States of America: Lippincott Williams and Wilkins; 2006.

19. Brunton LL, editor. Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of

Therapeutics. 11 ed. United States: McGraw-Hill; 2006.

20. Forbes BA, Sahm DF, Weissfeld AS. Diagnostic Microbiology. 10 ed. St.

Louis, Missouri: Mosby; 1998.

21. Farmakope Indonesia. 4 ed: Departemen Kesehatan Republik Indonesia;

1995

22. Katzung BG, editor. Basic and Clinical Pharmacology. 9 ed. US: McGraw-

Hill; 2004.

Page 37: Babi Pendahuluan

LAMPIRAN 1

PROSEDUR PENELITIAN

ALUR PENELITIAN

Pembuatan Infiisa Getah

Pembuatan Konsentrasi Getah

Metode Difusi dengan konsentrasi getah 25%, 50%, 75%, dan 100%

Bila terdapat daerah hambat

Metode Dilusi untuk menentukan Konsentrasi Hambat Minimum (KHM) mulai dari konsentrasi getah terendah

yang daerah hambatnya positif

Metode Dilusi untuk menentukan Konsentrasi Bunuh Minimum (KBM) mulai dari tabung pada Metode KHM

dengan konsentrasi tertinggi yang jernih.

Hasil akhir: konsentrasi minimum getah buah Carica papaya yang dapat membunuh bakteri Staphylococcus aureus

Page 38: Babi Pendahuluan

Prosedur Metode Dilusi: KHM dan KBM

1. Siapkan 6 tabung reaksi

2. Tuangkan 1 ml infusa kulit buah C. papaya dengan konsentrasi yang

berbeda- beda ke dalam 5 dari 6 tabung reaksi tersebut (sesuai gambar)

3. Kemudian masukkan 1 ml suspensi bakteri uji (Mc Farland 0,5) yang

berada dalam Mueller-Hinton cair ke 4 tabung reaksi yang pertama

4. Masukkan hanya Mueller-Hinton cair ke dalam tabung reaksi yang ke 5

(digunakan sebagai kontrol steril)

5. Siapkan pula 1 ml suspensi bakteri uji dengan Mueller-Hinton cair pada

tabung terakhir (tabung ke 6), yang digunakan sebagai kontrol

pertumbuhan

Page 39: Babi Pendahuluan

6. Inkubasi pada suhu 37° selama 24 jam

7. Amati pertumbuhan bakteri yang ditandai dengan kekeruhan pada media

untuk menentukan KHM

8. Semua isi tabung kemudian ditanam kembali pada media padat

9. Inkubasi pada suhu 37° selama 24 jam

10. Amati pula pertumbuhan koloni yang ada untuk menentukan KBM

Keterangan :

A = tabung 1B = tabung 2C = tabung 3D = tabung 4C+ = kontrol pertumbuhanC- = kontrol steril

Page 40: Babi Pendahuluan

LAMPIRAN 2

GAMBAR PENELITIAN

A. pepaya semangka B. Irisan kulit buah pepaya

C. penimbangan bahan uji D. irisan kulit buah dalam tabung

E. penambahan aquadest F. pemanasan agar dan infusa

Page 41: Babi Pendahuluan

G. membandingkan suspensi bakteri uji H. Pembuatan sumur pada agardengan larutan McFarland 0,5

I. Inkubasi 37C J. Hasil percobaan : tidak terdapat diameter hambat


Related Documents