SKRIPSI - eprints.umm.ac.ideprints.umm.ac.id/27748/1/jiptummpp-gdl-uyanwuryan-33749-1... · skripsi uyan wuryani identifikasi rhodamin b pada kerupuk singkong dengan metode kromatografi

SKRIPSI

UYAN WURYANI

IDENTIFIKASI RHODAMIN B PADA KERUPUK

SINGKONG DENGAN METODE KROMATOGRAFI

LAPIS TIPIS DAN DENSITOMETRI

(DI PASAR KOTA MALANG)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2013

SKRIPSI

UYAN WURYANI

IDENTIFIKASI RHODAMIN B PADA KERUPUK

SINGKONG DENGAN METODE KROMATOGRAFI

LAPIS TIPIS DAN DENSITOMETRI

(DI PASAR KOTA MALANG)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2013

ii

Lembar Pengesahan

IDENTIFIKASI RHODAMIN B PADA KERUPUK SINGKONG

DENGAN METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN

DENSITOMETRI

(DI PASAR KOTA MALANG)

SKRIPSI

Dibuat Untuk Memenuhi Syarat Mencapai Gelar Sarjana

Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan

Universitas Muhammadiyah Malang

2013

Oleh:

UYAN WURYANI

09040022

Disetujui oleh:

Pembimbing I Pembimbing II

Drs. Harjana, M.Sc., Apt Sovia Aprina Basuki, S. Farm., M.Si., Apt

NIDN. 0010114302 NIP UMM. 144.0804.0452

iii

Lembar Pengujian

IDENTIFIKASI RHODAMIN B PADA KERUPUK SINGKONG DENGAN

METODE KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN DENSITOMETRI

(DI PASAR KOTA MALANG)

SKRIPSI

Telah diuji dan dipertahankan di depan tim penguji

pada tanggal 10 Juli 2013

Oleh :

UYAN WURYANI

09040022

Tim Penguji

Penguji I Penguji II

Drs. Harjana, M.Sc., Apt Sovia Aprina Basuki, S. Farm, M.Si, Apt

NIDN. 0010114302 NIP UMM. 144.0804.0452

Penguji III Penguji IV

Drs. H. Achmad Inoni, Apt Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt

NIP. 0020124205 NIP.

iv

KATA PENGANTAR

Syukur Alhamdulillah, puji syukur kehadiran Allah SWT yang telah

melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penyusun dapat menyelesaikan

penulisan skripsi ini dengan baik dan tepat pada waktunya. Skripsi yang berjudul

“Identifikasi Rhodamin B Pada Kerupuk Singkong Dengan Metode

Kromatografi Lapis Tipis dan Densitometri” (Di Pasar Kota Malang) ini

disusun sebagai syarat untuk memperoleh gelar sarjana di Departemen Farmasi,

Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadyah Malang.

Pada kesempatan ini perkenankan penulis dengan kerendahan hati

menyampaikan rasa terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:

1. Allah SWT yang telah memberikan kesehatan, kemudahan dan kelancaran

selama proses pengerjaan tugas akhir ini.

2. Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Muhammadyah Malang, Ibu Tri

Lestari Handayani, M. Kep.,Sp.Mat, atas kesempatan yang diberikan untuk

mengikuti program SI.

3. Ketua Program Studi Farmasi Dra. Uswatun Chasanah, Apt, M.Kes. yang

dengan senantiasa memberikan dukungan untuk menjadi lebih baik dalam

menuntuk ilmu.

4. Dekan Fakultas Ilmu Kesehatan, Universitas Air Langga, yang telah memberi

kesempatan untuk menggunakan Densitometri untuk kelancaran skripsi ini.

5. Ketua Program Studi Farmasi Air Langga, yang telah memberi kesempatan

untuk menggunakan Densitometri untuk kelancaran skripsi ini.

6. Bpk. Drs. Harjana, M.Sc., Apt Selaku dosen pembimbing I, yang telah

memberikan bimbingan dan pengarahan dalam menyelesaikan skripsi ini.

7. Ibu Sovia Aprina Basuki, S. Farm, M.Si, Apt. Selaku pembimbing II dan

Selaku kepala laboratorium kimia terpadu II dan sintetis, yang telah

memberikan kesempatan untuk menggunakan fasilitas laboratorium dalam

menyelesaikan skripsi serta memberikan bimbingan dan pengarahan dalam

menyelesaikan skripsi ini.

8. Bpk. Drs. H. Achmad Inoni, Apt penguji yang telah memberikan pengarahan,

kritik dan saran sehingga membuat skripsi ini lebih baik.

v

9. Ibu Arina Swastika Maulita, S.Farm., Apt Selaku dosen penguji yang telah

memberikan pengarahan, kritik dalam proses penyelaisain skripsi ini.

10. Ika Ratna Hidayati S. Farm.,Apt. Selaku dosen wali yang telah memberikan

bimbingan, nasehat, dukungan dan semangat selama mengikuti Pendidikan

Program Studi Farmasi.

11. Para laboran laboratorium kimia terpadu II: Mbak Susi, Mas Ferdi dsn Mas

Bowo yang selalu memberikan nasehat, motifasi buat anak skripsi kimia.

12. Seluruh staff pengajar Program Studi Farmasi Universitas Muhammadyah

Malang yang telah mendidik sehingga saya dapat menyelesaikan pendidikan

sarjana farmasi.

13. Papa dan mama tercinta, yang selalu menjadi semangat dan motivasi dalam

hidupku. Dengan penuh kasih sayang dan kesabaran selalu memberi semangat,

nasehat, dukungan moral, materi serta doa agar saya dapat menjadi lebih baik.

14. Kakak dan Adikku tersayang Mbak Wahyu, Mas Surya, Nia dan Indra yang

selalu memberikan dukungan, semangat, yang selalu mendengarkan curhat-

curhat dan memberikan nasehat dalam hidup.

15. Teman-teman ku tersayang : Dea, Desi, Radiah, Ogik, Nia, Zari, Yola, Aidah,

Aen, Jharot, kak Jo, kakak Aan,dan kakak Army, Nining, Mega, Evy, mbak

Ety, mbak Eka, Ery, yang selalu memberikan dukungan, semangat dan doa.

16. Teman-teman KKN 74 yang telah memberikan motivasi dan dukungan.

17. Teman-teman seperjuangan farmasi 09 A yang sangat saya sayangi, semoga

persahabatan ini akan tetap abadi untuk selamanya.

18. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu-persatu terimakasih atas

dukungan, bantuan, semangat, dan doa yang telah diberikan dalam

menyelesaikan skripsi ini.

Akhir kata semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi penulis khususnya dan

pembaca umunya serta semoga dapat memberikan bantuan ilmu pengetahuan

dalam bidang kefarmasian bagi kita semua amin.

Malang 10 juli 2013

Penyusun

Uyan wuryani

09040022

vi

RINGKASAN

Kerupuk merupakan makan ringan yang biasanya terbuat dari singkong,

dalam pembuatan kerupuk biasanya produsen menambahkan bahan tambahan

makanan untuk menarik perhatian konsumen, seperti pewarna. Pewarna yang

masih sering digunakan adalah Rhodamin B. Menurut Peraturan Menkes RI,

Nomor 722/Menkes/Per/88 tentang bahan tambahan makanan yang menyebutkan

bahwa ada 10 bahan tambahan makanan yang dilarang diantaranya pewarna

sintetik seperti Rhodamin B karena dapat menyebabkan gangguan kesehatan.

Berdasarkan data dari Dinkes Kota Malang, diketahui belum pernah dilakukan

penelitian tentang zat warna Rhodamin B, pada kerupuk singkong yang berada di

Pasar Kota Malang yaitu di Pasar Besar, Pasar Sukun, dan Pasar Kedungkandang,

sehingga peneliti tertarik untuk melakukan penelitian tentang kandungan

Rhodamin B pada kerupuk tersebut.

Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi adanya zat pewarna

Rhodamin B dalam kerupuk singkong yang berada di pasar Kota Malang dengan

metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan Densitometri. Sampling dilakukan

dengan pengambilan 2 sampel di setiap pedagang yang berada di kota malang,

dimana penelitian dilakukan pada 3 pasar yaitu Pasar Besar, Pasar Sukun, dan

Pasar Kedungkandang maka yang dijadikan bahan uji ada 6 sampel dan dilakukan

replikasi sebanyak 6 kali, total secara keseluruhan sampel adalah 36 sampel.

Metode yang digunakan adalah Analisis kualitatif yaitu dengan KLT,

Densitometer dan Ekstraksi Benang wool (bulu domba) yang menggunakan

parameter uji nilai Rf, Pola Spectra, λ maks dan MF (Match Factor).

Hasil positif mengandung Rhodamin B ditetapkan berdasarkan data

kesesuaian nilai Rf, λmaks, Pola Spektra, dan Match Factor >900 antara sampel

dengan kontrol positif (Rhodamin B) minimal 3 dari 6 kali replikasi yang

dilakukan. Berdasarkan 6 sampel yang diteliti diperoleh hasil bahwa 2 sampel

ositif mengandung Rhodamin B yaitu sampel 1 dan 4. Sedangkan sampel 2,3,5,

dan 6 memberikan hasil negatif tidak mengandung Rhodamin B karena memiliki

nilai match factor <900. Berdasarkan penelitian dapat diketahui bahwa masih ada

produsen yang menambahkan zat pewarna yang berbahaya tersebut kedalam

makanan maka perlu adanya pembinaan kepada pedagang atau produsen makanan

tepatnya di pasar-pasar Kota Malang serta memberikan solusi pewarna yang aman

dikonsumsi seperti Amaranth.

vii

ABSTRAK

Rhodamin B merupakan zat warna sintetik yang telah dilarang

penggunaanya dalam makanan karena dapat menimbulkan gangguan kesehatan

seperti kangker. Penelitian ini bertujuan untuk melakukan identifikasi Rhodamin

B dalam kerupuk singkong yang berwarna merah menyolok. Sampel diperoleh

dari masing-masing 2 pedagang yaitu pasar Besar, Pasar Sukun, dan Pasar

Kedungkandang Kota Malang. Pengujian masing-masing dilakukan 6 kali

replikasi. Metode yang digunakan adalah Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dan

Densitometri. Parameter yang digunakan untuk identifikasi Rhodamin B yaitu

nilai Rf, λMaks, Pola Spektra, dan Match Factor. Jika nilai Rf, λMaks, Pola Spektra

sama antara sampel dam pembanding dan nilai Match Factor>900 maka sampel

dikatakan identik. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terdapat 2 sampel

kerupuk singkong yang positif mengandung Rhodamin B yaitu sampel 1 dan 4

dengan nilai Rf 0.8, λMaks 551nm, pola spektra yang mirip dengan Rhodamin B

dan nilai Match Factor lebih dari 900.

Kata Kunci : Kerupuk Singkong, Rhodamin B, Kromatografi Lapis Tipis,

Densitometri

viii

ABSTRACT

Rhodamine B is one of the synthetic dyes that has ben banned in

food because of it is a carsinogen agent. This study aimed to identify Rhodamine

B in brightly red cassava crackers. Sampels were taken from two selles in every

market, i.e Pasar Besar, Pasar Sukun and Pasar Kedungkandang in Malang. At

each sellesr was six time replication sampled. Rhodamine B was tested by Thin

Layer Chromatography-Densitometry. The identification parameters of

Rhodamine B were the value of Rf, λ max, spectra pattern, and the Match Factor

value. If the value of Rf, λ max, the same with reference and Match Factor value

more than 900 so it could be concluded the samples contained Rhodamine B.

There results showed that the samples-1 and samples-4 contained Rhodamine B,

with Rf 0.8, λ max551 nm, spectra pattern, similar to reference standard and match

factor value more than 900.

Keywords: Cassava Crackers, Rhodamine B, Thin Layer Chromatography,

Densitometry

ix

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL ........................................................................................ i

LEMBAR PENGESAHAN ............................................................................. ii

LEMBAR PENGUJIAN .................................................................................. iii

KATA PENGANTAR ..................................................................................... iv

RINGKASAN .................................................................................................. vi

ABSTRAK ....................................................................................................... viii

DAFTAR ISI .................................................................................................... x

DAFTAR TABEL ............................................................................................ xiii

DAFTAR GAMBAR ....................................................................................... xiv

DAFTAR LAMPIRAN .................................................................................... xv

BAB I PENDAHULUAN ................................................................................ 1

1.1. Latar Belakang ................................................................................. 1

1.2. Rumusan Masalah ............................................................................ 2

1.3. Tujuan Penelitian ............................................................................. 3

1.4. Manfaat Penelitian ........................................................................... 3

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ...................................................................... 4

2.4. Kerupuk Singkong ........................................................................... 4

2.5. Bahan Tambahan Pangan ................................................................ 4

2.6. Bahan Pewarna Makanan ................................................................ 6

2.6.1. Pewarna Alami ....................................................................... 6

2.6.2. Pewarna Sintetik..................................................................... 6

2.6.3. Pengaruh Pewarna Sintetik Makanan Terhadap Kesehatan

Manusia .................................................................................. 8

2.7 Rhodamin B ..................................................................................... 9

2.7.1. Definisi Rhodamin B ............................................................. 9

2.7.2. Tanda-Tanda Dan Gejala Akut Bila Terpapar

Rhodamin B...................................................................... 10

2.8. Metode Pemisahan Pewarna Sintetik Dalam Makanan .................. 11

2.8.1. Kromatografi Laps Tipis (KLT) ............................................ 11

x

2.8.2. Metode KLT-Densitometri ................................................... 18

2.9. Pasar Kota Malang ........................................................................... 20

2.9.1. PasarBesar ............................................................................. 20

2.9.2. Pasar Sukun ........................................................................... 20

2.9.3. Pasar Kedungkandang ........................................................... 21

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL .......................................................... 22

3.1. Kerangka Konsep ............................................................................ 22

3.2. Konsep Teoritis ................................................................................ 23

BAB IV METODE PENELITIAN .................................................................. 25

4.1. Jenis Dan Rancanagan Penelitian .................................................... 25

4.2. Metode Sampling ............................................................................. 25

4.2.1. Populasi ................................................................................. 25

4.2.2. Sampel. ................................................................................. 25

4.3. Lokasi Dan Waktu Penelitian .......................................................... 25

4.4. Alat Dan Bahan ............................................................................... 26

4.4.1. Alat ........................................................................................ 26

4.4.2. Bahan ..................................................................................... 26

4.5. Prosedur Uji Kualitatif ..................................................................... 26

4.5.1. Persiapan Benang Wool (Bulu Domba) Bebas Lemak ......... 26

4.5.2. Persiapan Larutan Sampel ..................................................... 26

4.5.3. Larutan Baku Pembanding .................................................... 27

4.5.4. Analisis Dengan Klt-Densitometri ........................................ 27

4.6. Analisis Data .................................................................................... 27

BAB V HASIL PENELITIAN......................................................................... 28

5.1. Jumlah Sampel dan Cara Pengambilan Sampel............................... 28

5.2. Hasil Isolasi Zat Warna dari Sampel ............................................... 28

5.3. Hasil Penentuan Harga Rf dan Wama Noda dengan KLT .............. 29

5.4. Hasil Pengukuran Spektra Absorbansi Dengan Densitometri ......... 29

5.5. Cara Perhitungan Rf Plat Replikasi 1 .............................................. 31

5.6. Sampel Kontrol Negatif .................................................................. 31

BAB VI PEMBAHASAN ................................................................................ 32

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 35

xi

7.1.Kesimpulan ....................................................................................... 35

7.2 Saran ................................................................................................ 35

DAFTARPUSTAKA ....................................................................................... 36

LAMPIRAN ..................................................................................................... 38

xii

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

ILL BahanPewarna Sintetik Yang Diijinkan Di Indonesia ......................... 7

11.2. Bahan Pewarna Sintetik Yang Dilarang Di Indonesia ................................. 8

11.3. Beberapa Penjerap Fase Diam Yang Digunakan Pada KLT ....................... 14

11.4. Parameter-Parameter Plikasi Yang Direkomendasikan ............................... 15

V.I. LokasiDanPenamaanPengambilan Sampel ......................................... 28

V.2. Warna Hasil Isolasi Zat Warna Dari Sampel............................................... 28

V.3. Pembanding Harga Rf Sampel Dengan Pembanding Dan Warna

Noda ......................................................................................................... 29

V.4. Perhitungan Match Factor Dan Amaks Anatar Sampel Dan

Pembanding ............................................................................................. 30

V.5. Perhitungan Match Factor Dan Amaks Anatar Sampel Dan

Pembanding ............................................................................................. 31

V.6. Kontrol Negatif Sampel .................................................................................31

xiii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1.Struktur Rhodamin B (Marmion, 1984) .............................................. 9

2.1. Peta Pasar Besar ....................................................................................... 20

2.2. Peta Pasar Sukun ............................................................................................. 20

2.3. Peta Pasar Kedungkandang ........................................................................ 21

3.1. Kerangka Konseptual ................................................................................. 22

6.1. Mekanisme Pengikatan Rhodamin B Dalam Benang Wool ....................... 33

xiv

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar Riwayat Hidup 3 ...................................................................................................... 8

2. Surat Pemyataan........................................................................................................... 39

3. Alat Dan Bahan Yang Digunakan Dalam Praktikum ............................................... 40

4. Hasil KLT ...............................................................................................................................42

5. Cara Perhitungan Rf .................................................................................................... 44

6. Gamabar Pola Spektra Sampel Dan Pembanding ........................................................... 45

7. Cara Perhitungan Match Factor ................................................................................. 49

xv

DAFTAR PUSTAKA

Anonima. 2012. Manual Methods Analysis of Foods. Page 94. Food Savety And

Standards Authority of India Ministry of Health and Family Welfare

Government of India New Delhi.

Badan Standarisasi Nasional (BSN). SNI 01-2895-1992. Cara Uji Pewarna

Tambahan Makanan.

Cahyadi, S,. 2006. Analisis dan Aspek Kesehatan Bahan Tambahan Pangan.

Cetakan. Pertama . PT. Bumi Aksara. Jakarta.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1988, Peraturan Menteri Kesehatan

Republik Indonesia No. 722/Menkes/PerlIX11988 Tentang Bahan

Tambahan Makanan, Jakarta.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 1999, Peraturan Menteri Kesehatan

Republik Indonesia No. 1168/MENKES/PER/X/1999 Tentang Bahan

Tambahan Makanan, Jakarta.

Departemen Kesehatan Republik Indonesia, 2003, Peraturan Menteri Kesehatan

Republik Indonesia No. 942/MENKES/SK/VII/2003 Tentang Pedoman

Persyaratan Hygiene Sanitasi I Makanan Jajanan, Jakarta.

Dixon, E. A.,G. Renyk. 1982. Isolation, Separation, and Identification of synthetic

Food Colors. J. Chem. Educ. 59. pp. 67-69.

Gandjar, Rahman. (2007). Kimia farmasi analisis. Pustaka Pelajar. Yogyakarta

Gritter, Bobbitt, Schwarting. 1991. Pengantar Kromatografi. Edisi kedua,

Penerjemah, Kosasih. Padmawinata. penerbit ITB.

Hamdani. 2012. Manajemen Pemasaran Jasa, Edisi Kedua, Penerbit Salemba

Empat, Jakarta.

Hidayat, N., & Saati, E.A., 2006, Membuat Pewarna Alami, Penerbit Trubus

Agrisarana, Surabaya.

Merck Index. 2006. Chemistry Constant Companion, Now With a new Addition,

Ed 14, 1410, 1411, Merck & Co., Inc, Whitehouse, Nj, USA. Page 660.

Nollet, L., M., L. 2004. Handbook of Food Analysis, Second Edition. CRC Press,

Llc. Page 2226

Riandini. (2008). Bahan Kimia dalam Makanan dan Minuman. Shakti Adiluhung.

Jakarta.

Rohaendi, Dedi. 2009. Memproduksi Kerupuk Sangrai. PT Gramedia Pustaka

Utama. Jakarta.

xvi

Rohman, A. 2009.Kromatografi Untuk Analisis Obat. Graha Ilmu.Yogyakarta.

Hal 246.

Saparinto, Cahyo. (2006). Bahan Tambahan Makanan. Kanisius. Yogyakarta.

Soeprijono,P., Poerwanti, Widayat, Jumaeri, 1974, serat-serat tekstil, Institute

Teknologi Tekstil, Bandung, 134-136, cit: Kurnia, D.C.D., 2005, Analisis

zat warna pada saos yang beredar di Yogyakarta dengan metode

Kromatografi kertas dan spektrofotometri UV-Vis, Skripsi, Fakultas

MIPA, Universitas Islam Indonesia, Yogyakarta.

Sri, Sugiyatmi. 2008. Hubungan Pengetahuan dan Sikap Produsen Kerupuk

Terhadap Penggunaan Zat Pewarna Rhodamin B pada Kerupuk yang

Diproduksi di Desa Kalitekuk, Kecamatan Karanganyar, Kabupaten

Demak. (online) http://digilib.unimus.ac.id/files/disk1/10/jtptunimus-gdl-

s1-2008-srisugiyat-489-2-bab1.pdf. Diakses 8 februari 2013.

Stahl, E., 2005, Analisis Obat secara Kromatografi dan Mikroskopi, Penerbit ITB,

Bandung.

Veronica, Margaret, Sihombing. 2008. Analisa Kadar Zat Pewarna Kuning pada

Tahu yang di Jual di Pasar-Pasar di Medan. (Online)

http://repository.usu.ac.id/bitstream.pdf. Diakses 9 februari, 2013.