Top Banner
perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id commit to user i SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS: EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya paniculata) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO SKRIPSI Untuk Memenuhi Persyaratan Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran Erma Malindha G.0010074 FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET Surakarta 2013
13

SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

Aug 12, 2019

Download

Documents

duongque
Welcome message from author
This document is posted to help you gain knowledge. Please leave a comment to let me know what you think about it! Share it to your friends and learn new things together.
Transcript
Page 1: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

i

SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:

EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya

paniculata) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

Erma Malindha

G.0010074

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

Surakarta

2013

Page 2: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

i

NASKAH JURNAL PUBLIKASI

SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER SERVIKS:

EFEK ANTIPROLIFERASI EKSTRAK DAUN KEMUNING (Murraya

paniculata) TERHADAP KULTUR SEL HELA IN VITRO

Erma Malindha

G.0010074

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

Surakarta

2013

Page 3: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ii

PENGESAHAN SKRIPSI

Skripsi dengan judul : Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks:

Efek Antiproliferasi Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) terhadap

Kultur Sel Hela in Vitro

Erma Malindha, NIM : G0010074, Tahun : 2013

Telah diuji dan sudah disahkan di hadapan Dewan Penguji Skripsi

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta

Pada Hari Jumat, Tanggal 20 Desember 2013

Pembimbing Utama

Nama : Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc

NIP : 19810208 200604 2 003 (…………………………….)

Pembimbing Pendamping

Nama : Brian Wasita, dr., Ph.D

NIP : 19790722 200501 1 003 (…………………………….)

Penguji Utama

Nama : Endang Sri Hardjanti, dr., M.Or

NIP : 19471007 197611 2 001 (…………………………….)

Penguji Pendamping

Nama : Nanang Wiyono, dr., M.Kes

NIP : 19760530 200212 1 002 (…………………………….)

Surakarta, ______________________

Ketua Tim Skripsi Dekan FK UNS

Ari Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D Muthmainah, dr., M.Kes.

NIP 19751221 200501 2 001 NIP 19510601 197903 1 002

Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM

Page 4: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

iii

PERNYATAAN

Dengan ini menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya yang pernah

diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi dan

sepanjang pengetahuan penulis juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah

ditulis atau diterbitkan oleh orang lain kecuali yang secara tertulis diacu dalam

naskah dan disebutkan dalam daftar pustaka.

Surakarta, 20 Desember 2013

Erma Malindha

NIM. G0010074

Page 5: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

iv

ABSTRAK

Erma Malindha, G.0010074, 2013. Skrining Tanaman Obat Berkhasiat

Antikanker Serviks: Efek Antiproliferasi Ekstrak Daun Kemuning (Murraya

paniculata) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro. Skripsi. Fakultas Kedokteran

Universitas Sebelas Maret, Surakarta.

Latar Belakang: Kanker serviks merupakan penyakit keganasan akibat

pertumbuhan sel yang tidak normal pada daerah serviks. Di dunia, prevalensi

kanker serviks sebesar 74% dibandingkan kanker ginekologi lainnya Di Indonesia,

setiap tahun terdeteksi lebih dari 15.000 kasus kanker serviks. Sampai saat ini,

terapi kanker serviks belum memberikan hasil yang memuaskan, mahal, dan

memiliki banyak efek samping. Ekstrak daun kemuning mengandung sejumlah

senyawa aktif yang memiliki potensi sebagai antioksidan, antiinflamasi,

antimutagenik, dan antitumor. Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan dan

mengembangkan antikanker serviks dengan menggunakan ekstrak Daun Kemuning

(Murraya paniculata) terhadap kultur sel Hela secara in vitro yang dilihat dari efek

antiproliferasi sel kanker.

Metode Penelitian: Penelitian ini bersifat eksperimental laboratorik dengan the

post test only controlled group design. Sampel menggunakan kultur sel Hela.

Masing-masing kultur sel Hela terdiri dari Kontrol Media (KM), Kontrol Sel (KS),

Kontrol Positif dengan doxorubicin (KP1), dan Kelompok Perlakuan dengan

ekstrak Daun Kemuning (KP2). Ekstrak Daun Kemuning yang digunakan adalah 8

serial dosis (0,625 µg/mL, 1.25 µg/mL; 2.5 µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 20 µg/mL;

40 µg/mL; 80 µg/mL). Senyawa aktif ekstrak diindentifikasi dengan metode

spektrofotometri dan kromatografi lapis tipis. Proliferasi sel dihitung berdasarkan

viabilitas sel menggunakan XTT assay dan dilihat absorbansinya dengan ELISA

reader. Data dianalisis statistik dengan Uji Kruskal Wallis dilanjutkan Uji Mann

Whitney menggunakan SPSS for Window Release 17.0. Untuk menghitung

hambatan proliferasi sel Hela data dianalisis menggunakan rumus IC50.

Hasil Penelitian: Ekstrak Daun Kemuning memiliki kandungan senyawa

aktif coumarin, alkaloid, flavonoid, tanin, dan steroid. Hasil Uji Kruskal

Wallis menunjukkan hasil yang signifikan (p = 0,000). Hasil analisis hambatan

sel (IC50) pada kultur sel Hela dengan ekstrak Daun Kemuning adalah 2,13

µg/ml; dan kultur sel Hela dengan doxorubicin adalah 11,1 µg/ml. Dosis

ekstrak 80µg/mL menunjukkan hasil yang paling baik.

Simpulan: Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) memiliki efek

antiproliferasi terhadap kultur sel Hela secara in vitro. Efek antiproliferasi ekstrak

Daun Kemuning pada kultur sel Hela lebih kuat dibandingkan kontrol positif

doxorubicin.

Kata kunci : Ekstrak daun Murraya paniculata, Antiproliferasi, Sel Hela,

Kanker Serviks

Page 6: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

v

ABSTRACT

Erma Malindha, G.0010074, 2013. Screening of Anticancer Plants for Cervical

Cancer: Antiproliferative Effects Kemuning Leaves Extract (Murraya paniculata)

against Hela Cells Culture In Vitro. Mini Thesis. Faculty of Medicine, Sebelas

Maret University, Surakarta.

Background: Cervical cancer is a malignant disease due to abnormal cell growth

on cervix. In the world, the prevalence of cervical cancer was 74% compared to

other gynecologic cancers. In Indonesia, each year cases of cervical cancer was

detected more than 15,000. Until now, treatment of cervical cancer have not

provided satisfactory results, expensive, and many side effects. Kemuning leaves

(Murraya paniculata) extract contains a number of active compounds that have

potential as an antioxidant, antiinflammatory, antimutagenic, and antitumor. This

study aims to investigate antiproliferative effect of Kemuning leaves extract

(Murraya paniculata) against Hela cell cultures in vitro.

Methods: This research was an experimental laboratory with the post test only

controlled group design. Hela cell were used. Hela cells cultures groups were

consisted of Media Controls (KM), Control Cells (KS), Positive Control using

doxorubicin (KP1), and Treatment using Kemuning Leaves extract (KP2).

Kemuning Leaves extract were used 8 serial doses (0,625 µg/mL, 1.25 µg/mL; 2.5

µg/mL, 5 µg/mL, 10 µg/mL, 20µg/mL; 40µg/mL; 80µg/mL). Active compounds

extract were analyzed using spectrophotometry and thin layer chromatography

methods. Cells proliferation was calculated using XTT cell viability assay and

absorbance was measured using ELISA reader. Data were analyzed statistically

using Kruskal Wallis test (p < 0.05) followed by determined Mann Whitney test (p

< 0.05) Then, the potential of cell growth inhibition was also performed using IC50

formula.

Results: Kemuning Leaves extract contains active compounds coumarin, alkaloids,

flavonoids, tannins, and steroids. Results of Kruskal Wallis test between treatment

and controlled groups showed significant difference (p = 0.000). Significant results

are shown ranging doses of 1.25 µg/mL. The cell growth inhibition effect (IC50) of

Kemuning leaves extract was 2.13 µg/mL and 11.1 µg/mL for doxorubicin,

respectively. Extract dose of 80 µg/mL showed the most excellent effect.

Conclusions: Kemuning leaves (Murraya paniculata) extract has antiproliferative

effects against Hela cell cultures in vitro. Antiproliferative effects of Kemuning

leaves extracts on Hela cell culture is stronger than doxorubicin which serve as

positive control.

Kata kunci : Murraya paniculata Leaves extract, Antiproliferative, Hela cell,

cervical cancer

Page 7: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vi

PRAKATA

Alhamdulillah, segala puji bagi Allah Subhanahu Wa Ta’ala yang telah

memberikan kekuatan, kesabaran, dan kelapangan yang tak terduga, sehingga

penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan laporan penelitian dengan

judul “Skrining Tanaman Obat Berkhasiat Antikanker Serviks: Efek Antiproliferasi

Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata) terhadap Kultur Sel Hela in Vitro”.

Skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat kelulusan tingkat sarjana di

Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta. Kendala dalam

penyusunan skripsi ini dapat teratasi atas pertolongan Allah SWT melalui

bimbingan dan dukungan banyak pihak. Untuk itu, perkenankan penulis

mengucapkan terima kasih kepada:

1. Prof. Dr. Zainal Arifin Adnan, dr., Sp.PD-KR-FINASIM., selaku Dekan Fakultas

Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta.

2. Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc., selaku Pembimbing Utama yang telah

banyak meluangkan waktu untuk memberikan motivasi dan bimbingan.

3. Brian Wasita, dr., Ph.D., selaku Pembimbing Pendamping yang telah banyak

meluangkan waktu untuk memberikan bimbingan dan solusi.

4. Endang Sri Hardjanti, dr., M.Or, selaku Penguji Utama yang telah

memberikan banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.

5. Nanang Wiyono, dr., M.Kes, selaku Anggota Penguji yang telah memberikan

banyak masukan dalam penyusunan skripsi ini.

6. Group Research Kanker FK UNS (Brian Wasita, dr., Ph.D, Nanang Wiyono,

dr., M.Kes, Ratih Puspita Febrinasari, dr., M.Sc) atas kesediaan, kerjasama, dan

bantuan dalam pelaksanaan peneitian ini.

7. Tim skripsi Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret Surakarta, Ari

Natalia Probandari, dr., MPH., Ph.D.; Nur Hafidha Hikmayani, dr.,

MClinEpid.; Kusmadewi, dr; Ibu. Sri Eni Narbiatty, SH, MH; dan Bp. Sunardi

yang telah meluangkan waktu dan banyak membantu.

8. Ayah Agus Alip Mulyono, S.Pd. dan Ibu Sukarni, S.Pd., adik Wahyu Dwi

Nugroho, dan adik Dewi Arum Sari, keluarga yang luar biasa, terima kasih atas

doa yang tanpa jeda, motivasi yang tiada henti, kesabaran yang menenangkan,

dan kasih sayang yang tak pernah lekang.

9. Akhmad Miftahudin Fazri, teman seperjuangan skripsi yang luar biasa beserta

sahabat yang selalu menemani, membantu, dan memotivasi.

10. Hajar, Dina, Silvia, Adi, teman yang menemani, membantu, dan memotivasi.

11. Seluruh Keluarga Besar Kastrat de Geneeskunde dan BSMI Surakarta yang

senantiasa menjadi rumah pelepas lelah dan teman yang hangat.

12. Keluarga Besar Asisten Farmakologi FK UNS 2010, atas dukungan dan

bantuan selama ini.

13. Semua pihak yang telah membantu terselesainya skripsi ini, yang tidak dapat

penulis sebutkan satu-persatu.

Meskipun tulisan ini masih belum sempurna, penulis berharap skripsi ini bisa

bermanfaat untuk pengembangan ilmu pengetahuan. Penulis mengharapkan masukan,

kritik, dan saran dari pembaca untuk kesempurnaan skripsi ini.

Surakarta, Desember 2013 Erma Malindha

Page 8: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

vii

DAFTAR ISI

PRAKATA ............................................................................................................ vi

DAFTAR ISI ......................................................................................................... vii

DAFTAR TABEL ................................................................................................. ix

DAFTAR GRAFIK ............................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ xi

DAFTAR LAMPIRAN ......................................................................................... xii

BAB I. PENDAHULUAN ............................................................................. 1

A. Latar Belakang Masalah................................................................ 1

B. Perumusan Masalah ..................................................................... 4

C. Tujuan Penelitian ......................................................................... 4

D. Manfaat Penelitian ....................................................................... 5

BAB II. LANDASAN TEORI ......................................................................... 6

A. Tinjauan Pustaka .......................................................................... 6

1. Kanker Serviks .......................................................................... 6

2. Doxorubicin .............................................................................. 17

3. Daun Kemuning (Murraya paniculata) .................................... 19

4. Kultur Sel Hela ......................................................................... 25

5. Uji Antiproliferasi Sel ............................................................... 30

B. Kerangka Pemikiran ..................................................................... 36

C. Hipotesis ...................................................................................... 37

BAB III. METODE PENELITIAN .................................................................... 38

Page 9: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

viii

A. Jenis Penelitian............................................................................... 38

B. Lokasi Penelitian............................................................................ 38

C. Subjek Penelitian ...................................................... 38

D. Teknik Sampling ........................................................................... 38

E. Rancangan Penelitian .................................................................... 39

F. Identifikasi Variabel Penelitian ..................................................... 40

G. Definisi Operasional Variabel Penelitian ...................................... 40

H. Alat dan Bahan Penelitian ............................................................. 43

I. Cara Kerja .................................................................................... 44

J. Teknik Analisis Data .................................................................... 53

BAB IV. HASIL PENELITIAN ........................................................................ 55

BAB V. PEMBAHASAN ................................................................................ 60

BAB VI. SIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 65

A. Simpulan ....................................................................................... 65

B. Saran ............................................................................................. 65

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 66

LAMPIRAN .......................................................................................................... 76

Page 10: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

ix

DAFTAR TABEL

Tabel 2.1. Stadium Kanker Serviks (Muttaqin, 2010) ....................................... 14

Tabel 4.1. Hasil Uji Ekstrak Murraya paniculata (Daun Kemuning)................ 55

Tabel 4.2. Hasil Nilai Signifikan (p) Uji Mann Whitney untuk Masing-

Masing Kelompok Perlakuan Ekstrak Daun Kemuning ................... 58

Tabel 4.3. Hasil Penghitungan IC50 pada Dua Kelompok Perlakuan ................. 62

Page 11: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

x

DAFTAR GRAFIK

Grafik 4.1. Presentase Viabilitas Sel Hela dengan Perlakuan Ekstrak Etanol

70% Daun Kemuning pada XTT Assay. Data Disajikan dalam

Bentuk Rata-Rata ± SD. ................................................................... 56

Grafik 4.2. Presentase Viabilitas Sel Hela dengan Perlakuan Doxorubicin

pada XTT Assay. Data Disajikan dalam Bentuk Rata-Rata ±

SD. ...................................................................................................... 57

Page 12: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar 2.1. Penampang Kanker Serviks (Boardman, 2012) ........................... 6

Gambar 2.2. Organisasi Genom HPV Tipe 16 dan 18 (Kurg, 2011) ................ 10

Gambar 2.3. Murraya paniculata (Rahman et al., 2010) .................................. 21

Gambar 2.4. Hela Cell Line (George, 2010) ..................................................... 26

Gambar 2.5. Ilustrasi Skematik Peran dari Cyclin, CDK dan CDK

Inhibitor pada Regulasi Siklus Sel (Kumar et al., 2007) .............. 30

Gambar 2.6. Defek Utama yang Terdapat pada Kanker (Malumbres et al.,

2009) ............................................................................................. 31

Gambar 2.7. Skema Kerangka Pemikiran ......................................................... 36

Gambar 3.1. Skema Rancangan Penelitian........................................................ 39

Page 13: SKRINING TANAMAN OBAT BERKHASIAT ANTIKANKER …eprints.uns.ac.id/21151/1/Cover.pdfperpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id Universitas Sebelas Maret, Surakarta. hambatan doxorubicin

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Izin Penelitian

Lampiran 2. Etichal Clearance

Lampiran 3. Hasil Uji Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata)

Lampiran 4. Foto Pembuatan Ekstrak Daun Kemuning (Murraya paniculata)

Lampiran 5. Foto Plate dan Foto Kegiatan XTT Assay Kultur Sel Hela

Lampiran 6. Perhitungan IC50

Lampiran 7. Hasil Analisis Viabilitas Sel Menggunakan SPSS