Pengecatan bakteri

PENGECATAN BAKTERI

Ada 2 macam cara untukmelihat sel Bakteri

1. Pembentukan Preparat Basah

Keuntungan : Bakteri masih hidupsehingga dapat dilihatgerakannya

Kerugian : sulit mengetahuibentuk yang pasti

2. Pembentukan preparat yangberwarna

Keuntungan : Dapat melihatbentuk yang pasti dan teraturdidalamnya

Kerugian : Bakteri mati

MACAM MACAMPENGECATAN

PENGECATAN

P. POSITIF

P SEDERHANA ( TUNGGAL )

P.BERTNGKAT

P.NEGATIF

PENGECATAN BERTINGKAT A. DIFFERE

NSIAL- P GRAM

- - P TAHAN ASAM

B. STRUKTUR

KHUSUS-P SPORA-- KAPSUL-- FLAGEL

-- GRANULA

P SEDERHANA

BAKTERI AKAN BERWARNA SESUAI

DENGAN WARNA CAT

CAT YANG BIASA DIGUNAKAN :

- METILEN BLUE

- SAFRANIN

KRISTAL VIOLET

DIGUNAKAN UNTUK MELIHAT BENTUK DAN

SUSUNAN SEL

HANYA MENGGUNAKAN 1 MACAM CAT

PENGECATAN BERTINGKAT

DAPAT DIGUNAKAN

UNTUK MEMBEDAKAN

SIFAT KELOMPOK

BAKTERI

UMUMNYA DIPAKAI

- P GRAM

- P TAHAN ASAM

PENGECATAN DIFFERENSIAL

MENGGUNAKAN LEBIH DARI 1 MACAM CAT

PENGECATAN NEGATIF

FAKTOR FKTOR YANG MEMPENGARUHI :

1. Gelas Benda

- Harus betul betul bersih dan kering

- Jika Terdapat lemak/ debu / air -----penyebaran bakteri tidak merata

2. Jumlah cat ( Nigrosin)

- Terlalu banyak : Bakteri tdk terlihat jelas

- Terlalu sedikit : Latar Belakang terlaluterang

3. Jumlah Bakteri

- Terlalu banyak akan terlihat bertumpuktumpuk sehingga bentuknya tidak terlihat

- Terlalu sedikit : sulit menemukan

4. Cara Meratakan :

Suspensi/campuran bakteri harus diseretdiatas gelas benda

PENGECATAN GRAM

• GRAM A• CAT UTAMA• BERISI CAT KRISTAL VIOLET (UNGU)

• GRAM B• LARUTAN MORDAN• ISI : LAR LUGOL• FUNGSI : MENGINTENSIFKAN CAT

UTAMA• GRAM C

• LAR PENCUCI• ISI : ALKOHOL DAN ACETON• FUNGSI : MELUNTURKAN CAT UTAM

• GRAM D• CAT LAWAN• ISI : CAT SAFRANIN

HASIL PENGECATA

N GRAM

GRAM ( + ) = WARNA UNGU

KEBIRUANGRAM (-) =

WARNA MERAH

BAKTERI GRAM

POSITIF

BAKTERI GRAM

NEGATIF

1. Staphylococcus aureus

2. Bacillus subtilis

3. Streptococcus pyogenes

1. Escherichia coli

2. Salmonella typosa

3. 3. NeisseriaGonorhoeae

FAKTOR FAKTOR YANG MEMPENGARUHI P GRAM

1. FIKSASI

Terlalu lama : dinding sel pecah ,Gram + seperti Gram –

2. KERAPATAN SEL PADA SMEAR

Terlalu tebal : Gram - seperti Gram+ Sebab belum semua sel lunturjika dimasukkan Gram C

3. WAKTU PENGECATAN SALAH

Gram C terlalu lama : Gram +seperti –

terlalu singkat : Gram –seperti +

4. KONSENTRASI REAGENGram A terlalu encer : Gram ( + ) sepertigram (-)5. KONSENTRASI LARUTAN PELUNTURAlkohol ------ lambaterAceton -------cepat6. UMUR BAKTERITerlalu tua ----- Autolisis (sel pecahpecah) , Gram + seperti Gram –7. MEDIUMpH turun (Asam) : Gram (+) seperti(Gram (-)pH naik ( Basa) : Gram (-) seperti Gram (+)8. NUTRISIKurang Nutrien : Gram (+) seperti(Gram (-)Bakteri paling suka dengan Glukosa

BAKTERI TAHAN ASAM

Bakteri Tahan Asam : merrah

Mycobacterium tubercolusis

Bakteri Tidak tahan Asam : Biru

Macam macam spesies

PENGECATAN SPORA

-Ada beberapa bakteri yangmembentuk spora, spora bakteridisebut Endospora

-- Fungsi : Mempertahankankehidupan / pertumbuhan selvegetatifnya terhadap keadaanyang kurang menguntungkan

-Contoh : kekurangan makanan

-- lingkungan :

- - panas

-- kering

-Dingin

-- radiasi zat zat kimia--

LETAK LETAK SPORA

A. SENTRAL

Ditengah tengah sel

B. TERMINAL

Diujung Sel

C. SUBTERMINAL

Diantara tengah tengah danujung

CONTOH BAKTERI PEMBENTUK SPORA

1. Bacillus Subtillis

2. Clostridium tetani

3. Clostridium perfringens

4. 4. Clostridium Batulinum

HASIL PENGAMATAN

METODE KLIEN

Badan vegetative : warna biru

Spora : warna merahmuda

Sel vegetative : bentukbatang

METODE WIRTZ

Badan vegetative : warnamerah muda

Spora : warna hijau

Sel vegetative : bentukbatang

METODE BARTOLOMEW-MITTWER

Spora : warna hijau

Sel bakteri : warna merah

latar belakang : merah muda

PENGECATAN KAPSUL

-Beberapa bakteri dapatmenghasilkan bahan bahan

berlendir sisekeliling permukaanselnya

-- Jika dikeluarkan secara tidakteratur ----lapisan lendir

-- Jika dikeluarkan secara teratur--- Kapsul

-- Sifat Bakteri yang berkapsul = Koloni berlendir / licin

-Fungsi Kapsul ----- tidak adayang esensial bagi kehidupan sel

-Diduga :

-Makanan cadangan

-Mencegah kekeringan

-Melindungi sel terhadapfogositas

MACAM MACAMPENGECATAN KAPSUL

Diperlukan pengecatan khususkarena

1. Sulit dilihat dibawahmikroskop

2. Jika diwarnai sulit tercat ----afinitas terhadap cat kecil

sehingga pada waktu dicuci --- luntur / hilang

3. Jika difiksasi --- rusak

METODE PENGECATAN

1. BURI

Dasarnya pengecata negatif

Cat : Biru metilen , Nigrosin

Hasil : sel : Biru , Kapsul : Transparan

Latar belakang hitam

2. HIZS

Cat : Basich fuchsin

Pencuci : CuSO4.5 .H2O 20 %

Hasil : Sel – merah ungu

Kapsul Biru muda

3. WELCH

Cat : Karbl Fuchsin

Pencuci : NaCl 0,85 % (GaramFisiologis)

Hasil : Sel : merah ungu Kapsulmerah muda

4. ANTHONY

Cat : KRISTAL VIOLET

Pencuci : CuSO4

Hasil : Sel : ungu Kapsul birumuda

Contoh contoh BakteriBerkapsul

-Klebsiella

-Diplococcus pneumoniae

-Streptococcus

Bacillus subtilis(sederhana)

Bacillus subtilis (gram +)

Staphylococcus aureus (sederhana)

Staphylococcus aureus (gram +)

Pseudomonas putida (sederhana)

Pseudomonasputida (gram -)

Bacillus subtilis (spora)

Bacillus subtilis (spora)

Pengecatan kapsul