METODE IMMOBILISASI ENZIM (Lima)

1

METODE IMMOBILISASI ENZIM

Dra. Asnah Marzuki, M.Si., Apt

2

Enzim ImmobilEnzim yang dalam keadaan tak bergerak yang berada

dalam satu wadah terlindung.Ada 3 kategori :1. Immobilisasi enzim dengan cara inklusiPemasukan enzim dalam satu jaringan 3 dimensi dari suatu gel atau suatu polimer, dalam mikrokapsul dalam serat kosong atau serat berisi.2. Immobilisasi enzim dengan cara adsorpsiMelalui interaksi dengan suatu support organik atau mineral.3. Immobilisasi enzim dengan cara ikatan kovalenTerjadi ikatan kovalen antara suatu gugus kimia enzim dengan gugus reaktif dari satu pendukung, baik langsung maupun tidak langsung.

3

1. Metode Inklusi- Polimerisasi Massa (Homogen)

4

Gel PoliakrilamidAkrilamid Poliakrilamid (Monomer)

Reaksi polimerisasi umumnya dimulai dengan penambahan kalium persulfat (K2S2O8) atau riboflavin dan dipercepat dengan N, N, N’, N’ tetra metilen diamin.Ini dapat berjalan dengan baik tanpa oksigen pada untuk menghindari denaturasi.

PolimerisasiN, N’

metilenBis

akrilamid

5

Reaksi ini juga dapat dimulai dulu dengan sinar UV, X atau

6

Immobilisasi Enzim Secara Ikatan KovalenGugus fungsi yang terdapat pada molekul enzim

Gugus Struktur Asam Amino

Amino primer -NH2 N-terminal (lisin)

Asam karboksilat -COOH C-terminal (asam aspartat, asam glutamat)

Fenol Tirosin

Tiol -SH Sistein

Imidazol Histidin

Hidroksil -OH Serin, Treonin

7

8

Prinsip Aktivasi Support (Pendukung) Gugus Fungsi Cara Aktivasi

Enzim Support

-NH2 -CHO Glutaraldehid

-NH2 -COOH Azoture, Karbodiimida

-NH2 -OH Sianogen BromidaTriazin

Garam diazonium

-SH -SH Jembatan disulfida

9