Jurnal Biji Pepaya

Page 1752Okt 2011, VOL. 36 N º 10PengantarJagung (Zea mays Linnaeus1753, Gramineae) adalah salah satusereal paling pentingtanaman di dunia, contribut-ing dengan kesejahteraan juta-singa petani miskin. Ini adalahyang penting secara global tanaman dandisukai makanan pokok untuk lebihdari satu miliar orang di Sub-Sahara Afrika dan LatinAmerika, di mana hewan-proSumber Tein tidak terjangkauoleh masyarakat umum. Dari1,4 × 108ha tumbuh secara globaldengan jagung, 96 × 106haterletak dalam mengembangkan negara-mencoba. Empat negara akunlebih dari setengah dari de-veloping dunia ini jagung Culti-elevasi daerah (Pingali dan Pan-dey, 2001): China (26 × 106ha);KATA KUNCI / Kegiatan Biologi / Caricaceae / Jagung / Tanaman Ekstrak / Toksisitas /Diterima: 06/05/2010. Modifikasi: 2011/09/16. Diterima: 2011/09/19.Rodolfo Figueroa Brito. Ph.D.dalam Strategi untuk Daerah Ag-Pembangunan ricultural, Cole-gio de Postgraduados (COL-POS), México. Profesor-Re-pencari, Instituto PolitecnicoNacional, Morelos, México.Arturo Huerta de la Peña. Ph.D.di Agronomi, UniversidadPolitécnica de Madrid, Spanyol.

Profesor-Peneliti, COL-POS, Puebla, México.Ignacio Pérez Moreno. Ph.D. diAgronomi, Universidad deNavarra, Spanyol. Penelitidan Profesor, Universidad deLa Rioja, Logroño, Spanyol.0378-1844/11/10/752-05 $ 3.00 / 0Brasil (12 × 106ha); Meksiko(7,5 × 106ha);danIndia(6 × 106ha).Dalam peringkat global di-rect manusia konsumsijagung, Meksiko adalah di bagian atas,hanya dilampaui oleh Bosnia-Her-zegovina. Pada tahun 2006, per kapitaKonsumsi jagung di Meksikoadalah 260kg/person, dannegara didedikasikan 12 × 106tonbiji-bijian jagung untuk mengarahkan hu-man konsumsi. Menggabungkanmanusia konsumsi denganjagung didedikasikan untuk ternakdan cadangan nasional, untuk-tal tahunan konsumsijagung di Meksiko melayangsekitar 26 × 106ton. Dari jumlah iniJumlah, 20 × 106ton yang pro-diproduksi di dalam negeri, dan-lainnya 6-7 × 106ton adalah im-

porting, yang terakhir menjadi com-berpose terutama kuningjagung untuk pakan ternak dariAmerika Serikat (García-Rano danKeleman, 2007).Salah satu faktor yangkerugian pada tanaman jagung di Mexi-co dan jagung tumbuh-wilayah di Amerika Conti-nent adalah serangga hama, antarayang Spodoptera frugiperda(JE Smith, 1797) (Lepidop-tera: Noctuidae) adalah yang palingpenting. Ini serangan selamasemua tahap pertumbuhan tanamandan dapat menyebabkan hasil pengurangan-tions hingga 10% (Pingalidan Pandey, 2001). Kerugian inipersentase lebih tinggi di tropi-kal dan subtropis daerahAmerika Latin, dengan lebih dari 35%Kerusakan tercatat di Kolombia(Torres y Cotes, 2005) dan40% di Kuba (Fernández,2002). Di Meksiko itu menyebabkantanaman kerugian dari 20 sampai 100%(Del Rincón et al., 2006).Untuk kontrol, baik benihpengobatan dengan sistemik INSEC-ticides atau penerapaninsektisida pasir scat-yang terdaftar di tanah yang digunakan.Telah terbukti bahwasembarangan penggunaansenyawa mengarah ke utamakemerosotan lingkunganpemerintah dan dapat membahayakan bagikesehatan baik produsendan konsumen, dan juga encourages penampilantahan hama populasi,menghilangkan mereka ene-alamimies dan memfasilitasi-resultant pertumbuhan dampaksekunder hama, yang menghasilkanpeningkatan biaya dalam

tumbuh jagung.Insektisida Kegiatan ekstrak biji DARI Carica papaya (l.)Terhadap Kejatuhan ulat grayak Spodoptera frugiperda (JE SMITH)(Lepidoptera: Noctuidae)Rodolfo Figueroa-Brito, Arturo Huerta-de la Peña, Ignacio Perez Moreno,Vicente Santiago Marco Mancebón dan Jesús Francisco López-OlguinRINGKASANPenelitian ini menunjukkan bahwa produk alami dari Caricapepaya dapat dianggap sebagai alternatif yang valid untuk mengontrolhama di bidang pertanian. Sifat insektisida benih ex-saluran dari empat kultivar C. pepaya (Maradol, Mammee, Yel-) rendah dan Hawaii ditambahkan ke diet serangga buatan. Bio-tes dilakukan dengan hexanic, acetonic dan metanolekstrak pada konsentrasi 10, 100 dan 1000ppm. Semua tesdilakukan dengan tahap larva pertama Spodoptera fru-giperda. Variabel respon adalah kematian serangga. Ekstrakdari biji dari kultivar Maradol, Mammee dan KuningC. pepaya, diikuti oleh ekstrak dari biji dari Hawaiikultivar, diterapkan pada konsentrasi 10, 100 dan 1000ppm,yang beracun pada S. larva frugiperda (50-70% dikoreksi-fanaity rate). The acetonic ekstrak Maradol dan Mammeekultivar di 10ppm adalah, yang paling efektif kematian menyebabkandari 73,6 dan 62,8% dari larva, masing-masing.vicente Santiago Marco Mance-BON. Dokter Ingeniero Agróno-mo, Universidad de Politécnica

Madrid, Spanyol. Profesor-Re-pencari, Universidad de LaRioja. Logroño, Spanyol.Jesús Francisco lópez-Olguin.Ph.D. di Agronomi, Universi-Ayah Politécnica de Madrid,Spanyol. Profesor-Peneliti,Benemérita Universidad Auto-noma de Puebla (BUAP), Mexi-co. Alamat: Departamento deAgroecología y Ambiente, In-stituto de Ciencias, BUAP. Av.14 Sur 6301, Edif. 103-A, CU,72.570-Puebla, México. e-mail:jesus.lopez @ correo.buap.mx

Halaman 2753Okt 2011, VOL. 36 N º 10Oleh karena itu penting untukmendorong pelaksanaanhama terpadu manajemen,meningkatkan prosessampling dan pemantauan sebagaidasar yang benar keputusan mak-ing dan mempromosikan rasionalintegrasi alternatif lainalat, sehingga dapat mengurangi ad-Efek ayat disebutkan previ-menerus. Salah satu alat tersebut adalahpenggunaan produk dari nabatisumber. Tanaman mengandung berbagaikeragaman sekunder METABO-lites, beberapa di antaranya mengerahkanperanan penting dalam pertahanan merekaterhadap patogen dan Herbi-Vores (Ware dan Whitaker,2004). Dalam berbagai kasus, memilikitelah menunjukkan bahwa penggunaanproduk yang berasal dari tumbuhan re-duces penerapan syn-Thetic agrokimia denganmengakibatkan tingkat yang lebih rendah dari ketahanan-dikan pembangunan antar hamapopulasi, berkat mereka

berbeda mode tindakan danrasa hormat yang lebih besar untuk menguntungkanserangga fauna (Bahena et al.,2003) karena selektivitas mereka.Figueroa-Brito (2002) mengevaluasi,ed efek bubukdari tanaman yang berbeda yang diterapkansebagai 15% dari diet buatanS. frugiperda. Penulis tidak-ed bahwa daun Pithecel-lobium dulce Benth (Fabace-ae) dan Crescentia alataHBK (Bignoniaceae) danbiji Jacaratia mexicanaA. DC. (Caricaceae) bertindak sebagaipencegahan, dan bahwadaun Prosopis juliflora(Sw.) DC. (Fabaceae) danbiji Carica papaya (L.)(Caricaceae) dan Bromeliahemisphaerica Lam. (Brome-liaceae) terbukti beracun untuk pertamainstar larva hama. DiSelain itu, bubuk dari C. pa-Mammee kultivar paya biji(Figueroa-Brito,2002;Figueroa-Britoetal.,2002a, b), serta orang-orang dariMaradol tersebut, Kuning dan Ha-waiian kultivar (Franco et al.,2006) dalam konsentrasi 10,15 dan 20% adalah sangat beracundan menyebabkan kematian 100%tingkat larva S. frugiper-da dalam waktu kurang dari 96h. Berdasarkanini anteseden, tujuanpenelitian ini adalah: a)mengevaluasi efek toksik darihexanic, acetonic dan metha-nolic ekstrak biji dariMammee, Maradol, Kuning

dan Hawaii kultivar C.pepaya pada larva neonatus dariS. frugiperda, dan b) untuk com-pare toksisitas relatif dariyang berbeda kultivar dan con-centrations dari ekstrak.Bahan dan MetodePengumpulan dan PemeliharaanS. frugiperdaS. frugiperda larva adalahdikumpulkan dari jagung planta-tions di Yautepec, Morelos,Meksiko, selama bulan Juli 2005.Menggunakan sikat dgn seranggadan pinset, 153 larva ditahapan yang berbeda dikumpulkandari tanaman jagung (15hari pertumbuhan). Larvakemudian dibawa ke labora-tory dan makan secara individual padadiet buatan (Burton danPerkins, 1987) dan disimpan ditertutup, plastik silinder con-tainers tinggi, 3cm oleh 3.5cmdiameter. Larva bawah-pergi pupation dalam yang samabotol dan ketika mereka munculsebagai orang dewasa, mereka ditempatkan dikertas cokelat wadah denganvolume 3 liter, mengandungsebuah petri plastik 10cm-diameterpiring dengan kapas basah-ened dalam larutan gula 10%untuk memberi makan mereka. Perkawinan dan lay-ing telur terjadi diwadah ini. Untuk tes,generasi kedua dari neo-nate larva digunakan.Actividad insektisida DE ExTRACTOS DE SEMILLAS DE Carica papaya (l.) Contra El GusanoCOgOllERO Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera: Noctuidae)

Rodolfo Figueroa-Brito, Arturo Huerta-de la Peña, Ignacio Perez Moreno, Vicente Santiago Marco Mancebóny Jesús Francisco López-OlguinResumenATIvIDADE InSETICIDA DE ExTRATOS DE Sementes DE Carica papaya (l.) kontra A Lagarta-DO-CARTuCHO Spodoptera frugiperda (JE, Smith) (Lepidoptera Noctuidae)Rodolfo Figueroa-Brito, Arturo Huerta-de la Peña, Ignacio Perez Moreno, Vicente Santiago Marco Mancebóne Jesús Francisco López-OlguinRESUMOEste estudio Muestra que los productos de naturales Caricapepaya pueden ser como una considerados alternativa validapara el control de Insectos nocivos en la agricultura. Se-estudiaron las propiedades insecticidas de extractos de Semillasde cuatro cultivares de C. pepaya (Maradol, Mamey, Amarillay Hawaiana) incorporados a una dieta buatan para Insectos.Se realizaron bioensayos con extractos hexánicos, acetónicosy metanólicos a de concentraciones 10, 100 y 1000ppm. Untuk-das las pruebas se realizaron con larvas de primer Estadio delgusano cogollero del Maiz Spodoptera frugiperda. La variabelEste estudo mostra que os Produtos naturais de Carica papayapodem ser considerados como uma alternativa valida para o con-trole de insetos nocivos na agricultura. Estudaram-se sebagai proprie-dades inseticidas de extratos de Sementes de quatro cultivares deC. pepaya (Maradol, Mamey, Amarelo e Havai) incorporados a

uma dieta buatan para insetos. Realizaram-se bioensaios comextratos hexânicos, acetônicos e metanólicos em concentrações de10, 100 e 1000ppm. Todas as provas foram realizadas com larvasde primeiro estágio da Lagarta militar do milho Spodoptera frugi-respuesta fue la mortalidad del Insecto. En los resultados seregistró que los extractos de Semillas de los cultivares Mara-dol, Mamey y Amarilla de C. pepaya, seguidos por los ekstrak-tos de Semillas de el kultivar Hawaiana, aplicados en konsentrasi-traciones de 10, 100 y 1000ppm, resultaron tóxicos en las lar-vas de S. frugiperda (50-70% de mortalidad corregida). Entreellos, los extractos acetónicos de los cultivares Maradol y Ma-mey a 10ppm fueron los más efectivos al causar un porcentajede mortalidad de 73,6 y 62,8% de las larvas, respectivamente.perda. Sebuah variável mortalidade Jawaban foi dilakukan seorang inseto. Nos resul-tados FICOU registrado que os extratos de Sementes dos cultivaresMaradol, Mamey e Amarela de C. pepaya, seguidos pelos extratosde Sementes melakukan kultivar Havai, aplicados em concentrações de 10,100 e 1.000ppm, resultaram tóxicos nas larvas de S. frugiperda(50-70% de mortalidade corrigida). Entre belut, os extratos aceto-nicos dos cultivares Maradol e Mamey a foram 10ppm os maisefetivos ao causar uma porcentagem de mortalidade de 73,6 e62,8% das larvas, respectivamente.

Page 3

754OCT 2011, VOL. 36 N º 10Ekstrak tanamanC. pepaya buah-buahan yang ac-quired dari pasar yang berbeda.The Yellow dan Hawaiikultivar di negara bagian Oaxa-ca, dan Mammee danMaradol kultivar di negara bagianMorelos. Benih-benih yangdipisahkan oleh kultivar dan meninggalkankering di tempat teduh selama 15hari. Setelah kering, bijiyang digiling dan diayak dengansebuah LKA Wearke listrik penggiling(Model MF 10 Basic, GMBH& Co, Jerman) dengan menggunakan0.25mm mesh. Dari pow-der yang diperoleh, 500g masing-masingkultivar yang ditimbang danditempatkan dalam 2 liter Erlenmeyertermos dengan 1,5 liter hex-ane untuk maserasi pertama.Campuran yang diperoleh adalahdiaduk ringan di penerimadan kiri di ekstraksi untuk 72hpada suhu ambien. Setelahsaat ini, campuran itu vacu-um disaring menggunakan Whatman®N º kertas 5 filter. SamaProsedur diikuti menggunakanbaik aseton atau metanolpelarut (Figueroa-Brito,2002). The heksana, aseton ataumetanol, sebagaimana berlaku, yangdihapus dari solusidiperoleh tekanan tereduksidistilasi menggunakan sebuah Rotavapor(Büchi model R-114), sehinggamemperoleh, acetonic hexanicdan metanol ekstraksetiap kultivar, dan ini adalahdikeringkan dalam aliran laminar cabi-net, yang akan digunakan dalam bioas-kata.

BioassayUntuk persiapan 250gdiet buatan, berikutkomponen yang diusulkan oleh Bur-ton dan Perkins (1987), adalahdigunakan: biji (30g), gandum(13.75g), ragi bir '(8.75g), asam askorbat (0.87g),sorbic acid (0.27g), metilparahydrobenzoate (0.55g),formaldehid sebesar 10% (2.5ml),air untuk kacang (116ml) danair untuk agar (90ml). Inibahan-bahan yang dicampur dengantersebut, hexanic acetonic atau meth-anolic ekstrak C. pepayabenih kultivar setiapmencapai konsentrasi 10,100 dan 1000ppm. Kontrolterdiri hanya pada buatandiet dan 1ml heksan, ace-nada atau metanol. Diet ingre-dients dan terkonsentrasiekstrak dicampur mengikutiMetode yang disarankan olehFranco et al. (2006). Daricampuran siap, 5ml adalahditempatkan dalam plastik silinderkontainer berukuran 3cmtinggi dengan diameter 3.5cm.Setelah diet-ekstrak atau di-et-pelarut gel, neonatus yanglarva ditempatkan di setiap con-tainer dengan bantuan denda,unta-sikat rambut. Ini pro-cess diulang 3 kali,menggunakan 30 larva untuk setiap rep-lication, dan wadahdiatur dalam benar-benarrandom cara pembibitan yangchamber (Presisi Inkubator818, model FFU20FC4CW018, Electrolux Home Produk,USA) pada 27 ± 1 º C, 60 ± 5%kelembaban relatif dan foto-periode 00:12 h. Mortalitas

tercatat untuk masa hiduplarva, yang tesberlangsung, dan dikoreksi ac-cording dengan metode Abbot(Abbot, 1925). MortalitasData yang diubah menjadi busur-sinus sebelum melakukanANOVA pada signifikansi lev-el dari 5% (α = 0,05). The mor-tality (%) berarti adalah com-dikupas menggunakan uji Tukey(Baja et al, 1997.), Dalam duacara: 1) kematian saranakultivar masing-masing, dalam rangkatahu mana di antara mereka, di gen-eral, adalah yang paling beracun, dan2) dengan membandingkan semua ex-traktat, untuk mengetahui manalebih aktif. Data mentahdisajikan dan mortalitasData dikoreksi data. Statis-Analisis vertikal dilakukanmenggunakan SigmaStat (2004).HasilDengan tidak adanya C. papa-ya, kematian dalam kasuskontrol dengan heksana danmetanol adalah <10% dan dengankontrol aseton itu10,5% (Tabel I). Pada konsentrasi-trasi dari 10ppm, Maradol tersebutdan kultivar yang Mammeeyang paling aktif dengan av-erage angka kematian larva56,7% dalam kedua kasus, menunjukkan-ing perbedaan yang signifikandibandingkan dengan kuning danHawaiian kultivar, yangjuga menunjukkan dif-signifikanferences (p <0,001) antarasendiri (Gambar 1). Re-garding ekstrak, meanuntuk kematian diperoleh denganaseton (47,8 ± 3,2%) adalah sig-nificantly lebih besar (p <0,001)dibandingkan pada mereka dengan cara

metanol dan heksana, tanpaada yang signifikan berbeda-ences antara dua terakhir(Gambar 2). Ketiga ekstrakdari Kuning dan Mammeekultivar, dan hexanic danacetonic ekstrak dari kultivarMaradol, adalah yang paling beracunyang, karena menyebabkan kematiantingkat ≥ 50%. Secara khusus,acetonic ekstrak dari kultivarMaradol adalah yang paling aktifsatu (p <0,001), dengan cor-rected mortalitas 73,6 ± 2,1%(Tabel I).Pada konsentrasi100ppm, Kuning danKultivar Mammee adalahpaling beracun bagi serangga, dengantidak ada kematian yang signifikan rata-rataPerbedaan (Gambar 1) mencatatantara mereka (54,7 ± 6,3 dan53,1 ± 3,3%, masing-masing). Dariekstrak, yang diperolehdengan aseton adalah yang palingaktif (p <0,005), menyebabkan48,5 ± 2,1% mortalitas (Gambar2). Berbagai ekstrak menyebabkankematian yang signifikan tingkatlebih dari 50% (Tabel I). The ace-Gambar 1. Pengaruh kultivar pepaya pada kematian tahap larva pertamaSpodoptera frugiperda makan dengan makanan buatan diperlakukan dengan berbedakonsentrasi ekstrak dari biji.TABEL IKEMATIAN (± SE) DARI tahap larva PERTAMASpodoptera frugiperda FED DENGAN DIET BUATANMENGANDUNG KONSENTRASI BERBEDAHExANIC, ACETONIC DAN metanol ekstrak

DARI BIJI DARI EMPAT kultivar Carica papayaEkstrakKematian ± SE (%)10ppm100ppm1000ppmMaradol HexaneAsetonMetanol50,6 ± 3,1 c73,6 ± 2,1 a46,1 ± 3,9 c38,7 ± 3,1 c63,5 ± 2,8 a47,6 ± 1,9 b44,0 ± 4,3 cd71,7 ± 3,4 a48,1 ± 1,3 cMammee HexaneAsetonMetanol50,1 ± 2,8 c62,8 ± 3,9 b57,1 ± 7,3 bc51,1 ± 3,5 b57,0 ± 2,5 ab51,2 ± 5,0 b57,0 ± 1,0 b48,7 ± 1,6 c52,6 ± 4,2 bcKuning HexaneAsetonMetanol50,3 ± 2,9 c54,0 ± 1,2 c54,7 ± 1,6 c59,7 ± 1,4 a62,3 ± 1,2 a42,3 ± 1,5 c56,1 ± 1,1 b58,9 ± 2,2 b33,1 ± 1,9 eHawaiian HexaneAsetonMetanol

20,6 ± 3,0 e38,5 ± 3,9 d25,3 ± 2,6 e49,7 ± 2,2 b49,5 ± 2,1 b24,1 ± 1,4 d42,2 ± 6,3 cd43,3 ± 5,1 cd36,4 ± 6,7 deKontrol HexaneAsetonMetanol8,9 ± 0,1 f10,5 ± 0,4 f9,6 ± 2,3 f8,9 ± 0,1 e10,5 ± 0,4 e9,2 ± 2,3 e8,9 ± 0,1 f10,5 ± 0,4 f9,2 ± 2,3 fBerarti dalam kolom yang sama diikuti oleh huruf yang berbeda secara signifikanberbeda (Tukey test, p <0,05). SE: error Standard.

Page 4755Okt 2011, VOL. 36 N º 10tonik ekstrak dari kultivarMaradol dan Kuning, danhexanic dari Yellow kultivarekstrak yang paling aktif(63,5, 62,3 dan 59,7% mortali-hubungan, masing-masing) dan dengansignifikan secara statistik berbeda-ence (p <0,001) sehubungan dengansisa ekstrak.Pada konsentrasi 1000ppm-tion, yang Maradol dan Mam-kultivar mee yang palingberacun, tidak ada yang signifikan dif-ference antara mereka, menyebabkantingkat kematian dari 54,4 ± 4,6dan 52,8 ± 5,6% masing-masing(Gambar 1). Menurut

ekstrak, yang acetonic memperlakukan-KASIH menyebabkan tertinggi(P <0,01) kematian pada serangga(Gambar 2), dengan 45,9 ± 1,2%. Dikonsentrasi 10, 100dan 1000ppm, berbagai ekstrakmenunjukkan kematian yang signifikan(> 50%), antara yang ac-Etonic ekstrak dari kultivarMaradol lagi yang palingberacun (p <0,01) untuk S. frugiper-da larva dengan 73,6 ± 2,1, 63,5± 2,8 dan 71,7 ± 3,4% mortalitas,masing (Tabel I).DiskusiStudi ini menunjukkan bahwa variabel-ous ekstrak C. pepayabenih, Maradol Kuningdan Mammee kultivar, dantingkat yang lebih rendah dari budidayaHawaii, beracun bagi S. fru-larva giperda, mencapai cor-rected kematian persentaseantara 50,0 dan 73,6% dikonsentrasi 10, 100 dan1000ppm.Dalam studi sebelumnya denganbubuk C. biji pepaya,Figueroa-Brito (2002) melaporkan100% larva mortalitas pada con-centrations dari 10, 15 dan 20%dengan bubuk dari budidayaMammee. Hal yang sama terjadidengan bubuk dari Marad-ol, Kuning dan Hawaii Culti-vars yang, pada saat yang sama con-centrations, menyebabkan kematiansemua larva setelah 24jam (Gar-CIA, 2004). Franco et al.(2006) mempelajari relat-kematianed ke waktu, mencatat bahwabubuk dari empat kultivar di10 dan 15% disebabkan dikoreksitingkat kematian dalam serangga darilebih dari 90% setelah 72 dan 96hmasing. Dalam mengevaluasi

insektisida efek benihdari empat kultivar dalambentuk ekstrak dalam penelitian ini,lebih rendah daripada tingkat kematianyang dilaporkan untuk bubuk bijidiperoleh. Hal ini dapatdijelaskan oleh fakta bahwatinggi beracun aktivitas C.biji pepaya dalam bentuk bubukmungkin karena kemungkinan syn-ergy, di mana aktif com-ponents bertindak complemen-militer jalan di S. frugiperda.Meskipun lebih rendah konsentrasi-trations, di ekstrak bijiC. pepaya terus ex-ercise efek toksik tinggi padalarva S. frugiperda.Figueroa-Brito (2002) evaluasi-diciptakan hexanic, acetonic atauberair ekstrak daun,biji dan bunga dari C. pa-paya kultivar Mammee disegar dan bentuk bubuk, dikonsentrasi 5, 10, 15dan 20%, diterapkan untuk jagungdaun cakram pada S. frugiperdalarva dan hasilnya menunjukkanbahwa acetonic ekstrakbenih (segar dan pow-dered) adalah yang paling aktif,menyebabkan antara 50 dan 100%kematian pada serangga sama sekalikonsentrasi diuji. Dipenelitian ini, yang miripEfek diperoleh denganacetonic ekstrak dari Mara-dol Kuning dan Mammee cul-tivars, yang palingyang aktif, menyebabkan dikoreksikematian persentase 50 -70%, yang paling efektifmereka semua terbukti menjadiacetonic ekstrak Mara-dol kultivar. Hasil inimungkin karena fakta bahwa

ketika kultivar yang berbedadiuji, terutama Maradol danMammee, dicampur dengan ac-Etone, yang paling aktif komponen-motivasional yang diekstrak.Perlu menunjukkan bahwayang acetonic ekstrakMaradol dan Mammee Culti-vars di 10ppm disebabkan fana-ity tingkat 73,6 dan 62,8%masing. Ini konsentrasi-tions secara signifikan lebih rendahdaripada diadili oleh Figueroa-Brito (2002), yang menemukan bahwaekstrak acetonic benihdari kultivar Mammee di5% menyebabkan kematian 100%.Ada banyak penelitian daritoksisitas dilakukan dengan lainnyatanaman yang mencerminkan serupaperilaku pada S. frugiperda (50 -100% mortalitas), seperti yangdengan macerations dari Trichiliahavanensis (Jacq.) oleh López-Olguin (1994), dari Cabraleacanjerana (Vell.) dan Cedrelafissilis Vell. oleh Rodríguez danVendramim (1996), dari Azadi-rachta indica (A. Juss.) danCedrela odorata L. oleh Rodri-GUEZ dan Vendramim (1997),dan Melia azedarach L. danTrichilia pallida Sw. oleh Rodri-GUEZ dan Vendramim (1998).BanyakMeliaceae spe-ciesterus aktif dibentuk ekstrak etanol,seperti dalam kasusM. azedar-ach (Mikolajczak et al., 1989)dan ekstrak air, sepertiterjadi dengan A. indica (Mikola-jczak dan Reed, 1987), dan T.

pallida (Bogorni dan Vendra-mim, 2005). Di sampingtanaman ini, ada yang laintanaman yang memiliki ekstrakdilaporkan sebagai memiliki INSEC-ticide efek pada S. frugiperda,seperti ekstrak metanolYucca periculosa Baker (Tor-res et al, 2003.), Iostephaneheterophylla (Cav.) Benth. exHemsl. (Figueroa-Brito et al.,2006), acetonic ekstrak P.dulce (Figueroa-Brito et al.,2007) dan ekstrak air dariRicinus communis L. (Trujillodan García, 2001) dan Trichil-AGLOCO pallens C. DC. (Bogornidan Vendramim, 2005).Pengetahuan tentang biologisaktif produk tanaman yang melakukantidak menyebabkan kerusakan pada ENVI-ronment, dengan baru-biodegradmampu struktur dan yang pra-melayani keanekaragaman hayati, kontribusiuntuk pengembangan kurangmerusak strategi daripenggunaan insektisida kimia.Seperti halnya papain dancystecine dari lateks C.pepaya terhadap Spodoptera li-Tura (F.) (Konno et al., 2004),atau sistein protease inhibitorseperti papain pada Coleoptera danHemiptera serangga, sertapada nematoda phytopathogen(Blanco-Labra dan Aguirre,2002). Penelitian lain memilikimenunjukkan efek yang sama dengan yangdari C. biji pepaya; sepertihalnya dengan campuranepiperic phytogedunines atauasetat dari phytogedunines danSenyawa: ligedunin dariCedrela spp. (Céspedes et al.,2000), piplartin, 4-desmetilpi-plartin dan cenocladamin

(Dyer et al, 2003.) Dan Piperindari Piper cenocladum C.DC. (Batista-Pereira et al.,2006), dan acetogenin dariAnnona cherimolia Mill. (Al-varez et al, 2007.) pada S. frugi-perda. Senyawa ini melakukantidak mempengaruhi predator danparasitoid (Bahena et al.,2003), seperti halnya denganDoru taeniatum (Dohrn) danEctatomma ruidum Roger(Schmutterer, 1990), dan pem-Khususnya di Chrysoperla carnea(Stephen) dan Trichogrammaspp, dengan NeemAzal-T / S, PC.05, Blank dan PC Kosong pro-saluran (El-Wakeil et al, 2006.;Aggarwal dan Brar, 2006).Mengingat hasil ob-terjadi saat studi ini bersama-samadengan data eksperimen al-siap berkumpul dalam literatur,itu akan menarik untuk con-tinue dengan penelitian lebih lanjut dengantujuan fraksinasi danmemurnikan senyawa ditemukanGambar 2. Pengaruh konsentrasi yang berbeda hexanic, acetonic danmetanol ekstrak dari biji dari pepaya Carica pada kematian pertamalarva tahap Spodoptera frugiperda makan dengan makanan buatan diobati.

Halaman 5756Okt 2011, VOL. 36 N º 10dalam biji yang diuji Culti-vars C. pepaya, dalam rangkamempelajari apakah mereka terusefektif terhadap S. frugi-perda dalam bentuk murni com-pound atau campurannya, sepertitelah ditunjukkan dengancampuran senyawadari biji Maradol tersebut,

Kuning dan Hawaii kultivar(Figueroa-Brito et al, 2002a., B).Hal ini juga diperlukan untuk melaksanakanevaluasi dari campurandan murni senyawa di semi-lapangan dan dalam kondisi lapangan untukmemperoleh pengetahuan dasar di atau-der untuk mendirikan mungkin merekapenggabungan ke-terpadued pengelolaan hama.KesimpulanHeksana, aseton dan metha-nol ekstrak biji dariMaradol, Mammee dan Yel-rendah kultivar C. pepaya,diikuti oleh ekstrak daribenih dari Hawaii Culti-var, diterapkan pada konsentrasidari 10, 100 dan 1000ppm,yang beracun pada S. frugiperdalarva. The acetonic ekstrakdari Maradol dan Mammeekultivar di 10ppm adalahpaling efektif.ReferensiAbbot W (1925) Sebuah metode com-puting efektivitas suatuinsektisida. J. Econ. Entomol.18: 265-267.Aggarwal N, Brar DS (2006) Efekpersiapan nimba yang berbedadibandingkan dengan sintetis di-secticides pada whitefly para-sitoid Encarsia sophia (Hyme-noptera: Aphelinidae) danpredator Chrysoperla carnea(Neuroptera: Chrysopidae) padakapas pada kondisi laboratorium-tions. J. Pest. Sci. 79: 201-207.Álvarez CO, Neske A, Popich S,Bardon A (2007) efek Beracundari acetagenins annonaceousdari Annona cherimolia(Magnoliales: Annonaceae) padaSpodoptera frugiperda (LEPI-Lepidoptera:. Noctuidae) J. Pestic.

Sci. 80: 63-67.Bahena JF, Sánchez M, Miranda MA(2003) Extractos vegetales y bi-oplaguicidas, alternativas para elCombate del "gusano cogollerodel Maiz "Spodoptera frugiper-da (JE Smith) (Lepidoptera:Noctuidae) Entomol.. Mex. 2:366-372.Batista-Pereira LG, Castral TC, DaSilva MTM, Amaral BR, Fer-nandes JB, Vieira PC, Da SilvaMFGF, Corrêa AG (2006) In-secticidal aktivitas sintetikamida pada Spodoptera frugi-perda. Z. Naturforsch. 61C:196-202.Blanco-Labra A, Aguirre MC (2002)Proteínas involucradas en losmecanismos de defensas de lasplantas. Universidad de Guana-juato. Acta Univ. 12: 3-28.Bogorni PC, Vendramim JD (2005)Subletal efek berair ex-saluran dari Trichilia spp. padaSpodoptera frugiperda (JESmith) (Lepidoptera: Noctuidae)pengembangan jagung. Neotrop.Entomol. 34: 311-317.Burton LR, Perkins WD (1987)Membesarkan earworm jagung danjatuh ulat grayak untuk jagung ketahanan-dikan studi. Proc. Int. Gejalanya mungkin.pada Metodologi untuk Mengembangkan-ing host Tanaman Resistensi terhadapSerangga Jagung CIMMYT..Meksiko. pp 35-37.Céspedes CL, Calderón JS, Lina L,Aranda E (2000) Pertumbuhan-hibitory efek pada jatuh tentara-worm Spodoptera frugiperdabeberapa limonoid terisolasidari Cedrela spp. (Meliaceae).J. Agric. Makanan Chem. 48:1.903-1.908.Del Rincón CMC, Méndez LJ,

Ibarra JE (2006) caracter-ización de Cepas Nativas deBacillus thuringiensis con ac-tividad insektisida hacia elgusano cogollero del MaizSpodoptera frugiperda (LEPI-Lepidoptera:. Noctuidae) Folia En-tomol. Mex. 45: 157-164.Dyer LA, Dodson CD, Stireman-IIIJO, Tobler MA, Smilanich AM,Fincher RM, Letourneau DK(2003) Sinergis efektiga Piper amida pada generalisdan spesialis herbivora. J.Chem. Ecol. 29: 2.499-2.514.El-Wakeil NE, Gaafar NM, Vidal S(2006) Efek samping dari beberapamimba produk di alami ene-mies dari Helicoverpa (Tricho-gramma spp) dan. Chrysoperlacarnea Arch.. Phytopathol.Tanaman. Protec. 39: 445-455.Fernández JL (2002) Estimación deumbrales economicos paraSpodoptera frugiperda (JESmith) (Lepidoptera: Noctuidae)en el cultivo de Maiz. Inv. Agr.Prod. Protec. Veg. 17: 467-474.Figueroa-Brito R (2002) Evaluaciónde extractos vegetales kontra elgusano cogollero Spodopterafrugiperda Smith (Lepidoptera:Noctuidae) en Maiz. Tesis.Universidad Nacional Autóno-ma de Mexico. México, DF33-64 ppFigueroa-Brito R, Camino LM,Pérez-Amador MC, Muñoz V,Bratoeff E, Labastida C (2002a)Komposisi asam lemak dan beracunaktivitas ekstrak acetonicdari Carica papaya L. (Caricace-ae) benih Int.. J. Exp. Bot. 69:97-99.Figueroa-Brito R, Calderón PJS,Pérez-Amador MC, Muñoz V,

Hernández RMC, Valdés EME,Aldana lll (2002b) Keracunandan efek penghambatan pertumbuhanekstrak dan beberapa fraksidari Carica papaya terhadapSpodoptera frugiperda (LEPI-Lepidoptera:. Noctuidae) Rev Lati-Noam. Quim. 30: 98-102.Figueroa-Brito R, Aldana lll,Gutiérrez OM, Lotina HB,Raja DB, Aguilar MI (2006)Actividad bioinsecticida de ex-tractos vegetales kontra Spo-Lepidoptera frugiperda (Lepidop-tera: Noctuidae) Entomol.. Mex.5: 677-681.Figueroa-Brito R, Valdés ME, Al-dana lll, Hernandez RMC,Gutiérrez OM (2007) Actividadinsektisida de Semillas dePithecellobium dulce. EnLópez-Olguin JF, Aragón GA,Rodríguez HC, Vázquez GM(Eds.) Agricultura sostenible:substancias naturales kontraplaga. Benemérita UniversidadAutonoma de Puebla / Colegiode Postgraduados / Universidadde Guadalajara. Meksiko. pp136-141.Franco ASL, Jiménez PA, Luna LC,Figueroa-Brito R (2006) Efectotóxico de Semillas de cuatrovariedades de Carica papaya(Caricaceae) en Spodoptera fru-giperda (Lepidoptera: Noctui-dae). Folia Entomol. Mex. 45:171-177.García RR (2004) Efectividad depolvos de cuatro variedades deCarica papaya (Caricaceae)kontra Spodoptera frugiperda(Lepidoptera: Noctuidae). The-sis. Universidad Autonoma deGuerrero. Iguala, Guerrero,Meksiko. hlm 18-20.

García-Rano H, Keleman A (2007)La Krisis del Maiz y la Torti-lla en México: ¿Modelo oCoyuntura? El Colegio deMéxico. ANEC. Noviembre.2007. Meksiko.Konno K, Hirayama C, NakamuraM, Tateishi K, Y Tamura, Hat-tori M, Kanno K (2004) PapainProspek pepaya pohon membentukherbivora serangga: peran Cys-Teine protease dalam lateks. Tanaman J.37: 370-378.López-Olguin JF (1994) Investig-Acion Agrícola en una zona mar-ginada del estado de Puebla.Elementos 3: 26-32.Mikolajczak KL, Reed DK (1987)Ekstraktif benih dari Melia-ceae: efek pada Spodopterafrugiperda (JE Smith), Aca-lymma vittatum (F.) y Artemiasalina Leach. J. Chem. Ecol.13: 99-111.Mikolajczak KL, Zilkowski BW,Bartelt RJ (1989) Pengaruh me-liaceous biji ekstrak pada pertumbuhandan kelangsungan hidup Spodoptera fru-giperda (JE Smith). J. Chem.Ecol 15:. 121-128.Pingali PL, Pandey S (2001) Duniajagung membutuhkan pertemuan: techno-logis peluang dan priori-ikatan untuk sektor publik. EnPingali PL (Ed.) CIMMYTJagung Dunia Fakta 1999-2000dan Tren. Pertemuan DuniaKebutuhan Jagung: Teknologi Op-kesempatan kerja dan Prioritas untukSektor Publik. CIMMYT. Mexi-co, DF Part 1, hal. 9. www.cim-myt.org / Penelitian / Ekonomi /map/facts_trends/maizeft9900 /html/maizeft9900_contents.htm.Rodríguez HC, Vendramim JD(1996) Toxicidad de extractos

acuosos de Meliaceae enSpodoptera frugiperda (LEPI-Lepidoptera:. Noctuidae) Man. Integ.Plagas 42: 14-22.Rodríguez HC, Vendramim JD(1997) Avaliação da bioatividadede extratos aquosos de Melia-ceae sobre Spodoptera frugi-perda (JE Smith). Rev Agric.72: 305-318.Rodríguez HC, Vendramim JD(1998) Uso de Indeks nutricio-nales para medir el efecto di-sectistático de extractos deMeliáceas sobre Spodopterafrugiperda Man.. Integ. Plagas48: 11-18.Schmutterer H (1990) Propertidan potensi alam Pesti-CIDES dari pohon neem, Aza-dirachta indica Annu.. RevEntomol. 35: 271-97.SigmaStat (2004) SigmaStat®3.1.,Software statistik. Jandel Sci-Scientific Software. San Rafael,CA, USA.Baja RAK, Torrie JH, Dickey DA(1997) Prinsip dan prosedur-dures Statistik dari biometri-Pendekatan kal. McGraw-Hill.New York, Amerika Serikat. 165 hlmTorres A, Cotes L (2005) Efecto dela crioconservación sobre la via-bilidad y Actividad biocontrola-dora de Nomuraea rileyi kontraSpodoptera frugiperda (LEPI-Lepidoptera:. Noctuidae) Rev KolonelEntomol. 33: 133-138.Torres P, Ávila JG, Romo DA, Gar-CIA AM, Marín JC, Aranda E,Céspedes C (2003) Antioksidandan pertumbuhan serangga peraturankegiatan stilbenes dan mantan-traktat dari Yucca periculosa.

Fitokimia 64: 463-473.Trujillo VRJ, García leb (2001)Conocimiento indigena del EFEC-ke de medicinales locales plantassobre Las Plagas agrícolas en losaltos de Chiapas, México Agro-.Ciencia 35: 685-92.Ware WG, Whitaker MD (2004)Pengenalan terhadap insektisida.Dalam Ware GW, Whitaker DM(Eds.) Kitab Pestisida. 4thed. Thomson. Fresno, CA,USA. 496 hlm

Teks asli Inggris

Ware WG, Whitaker MD (2004)Sarankan terjemahan yang lebih baik

Page 1Ilmiah Penelitian dan Essay Vol. 5 (16), hlm 2.201-2.205, 18 Agustus 2010 Tersedia online di http://www.academicjournals.org/SRE ISSN 1992-2248 © 2010 Jurnal Akademik Panjang penuh Research Paper Fitokimia dan antioksidan nutrisi konstituen Carica papaya dan nigrescens Parquetina ekstrak Ngozi Awa Imaga *, George O. Gbenle, Veronica I. Okochi, Minggu Adenekan, Tomi Duro-Emmanuel, Bola Oyeniyi, Kesabaran N. Dokai, Mojisola Oyenuga, Alero Otumara dan Felix C. Ekeh Departemen Biokimia, Fakultas Kedokteran, Universitas Lagos, PMB 12003, Idi-Araba, Lagos State, Nigeria. Diterima 5 Juli 2010 Tanaman obat (phytomedicines alias) adalah bagian tanaman atau seluruh tanaman yang memiliki penyembuhan properti. Obat rakyat dilaporkan menggunakan Carica papaya L. (Caricaceae) dan Parquetina nigrescens L. (Asclepiadaceae) sebagai obat herbal untuk manajemen anemia sel sabit. Penelitian ini dilakukan keluar untuk menyaring ekstrak daun P. nigrescens dan C. papaya L. (Caricaceae) untuk antioksidan kemungkinan fitokimia, konstituen nutrisi proksimat, komposisi asam amino dan mineral hadir konten dalam sampel menggunakan bahan kimia standar dan prosedur kromatografi. Fitokimia skrining mengkonfirmasikan adanya asam folat, vitamin B 12 , Alkaloid, saponin, glikosida, tanin, dan antrakuinon. Penelitian ini juga menunjukkan bahwa masing-masing

tanaman ekstrak flavonoid yang terkandung dan vitamin antioksidan A dan C. Beberapa asam amino antisickling ditetapkan sebelumnya adalah juga hadir dalam tanaman. Glikosida sianogen tidak hadir dari kedua ekstrak tanaman, menunjukkan non-beracun efek dari tanaman ini bila diambil secara lisan. Hasil ini menunjukkan bahwa sebelumnya sifat antisickling dilaporkan dari tumbuhan ini mungkin karena nutrisi antioksidan yang melekat mereka komposisi, sehingga mendukung klaim para penyembuh tradisional dan menunjukkan kemungkinan hubungan antara komposisi kimia dari tanaman dan penggunaannya dalam pengobatan tradisional. Kata kunci: asam amino, antioksidan, mikronutrien, fitokimia, vitamin. PENDAHULUAN Antioksidan adalah sebuah khusus kelompok dari gizi suplemen yang mengais radikal bebas (Padma et al., 2006). Radikal bebas merusak berfungsinya sistem kekebalan tubuh yang mengarah ke kondisi berbagai penyakit. Flavonoid alami senyawa fenolik dalam tanaman yang memiliki efek antioksidan. Alkaloid pada Sebaliknya, yang dikenal anti-inflamasi aktivitas mereka (Iyamu et al., 2003). Fenilalanin dan sejumlah amino asam telah dilaporkan antisickling aktivitas (Onah et al, 2002.) Dan sumber yang kaya akan asam amino dan

antioksidan sangat penting untuk menjaga kesehatan yang baik. Glutathione adalah antioksidan endogen utama * Sesuai penulis. E-mail: [email protected]. Telp: ± 234-1-8023053028. diproduksi oleh sel (Padma et al., 2006) yang menghilangkan peroksida melalui aksi enzim antioksidan glutation peroksidase dan juga mengatur tindakan nutrisi antioksidan seperti vitamin C dan E dalam tubuh. Ketidakmampuan untuk mempertahankan glutathione mengurangi merah sel darah menyebabkan akumulasi peningkatan peroksida yang pada gilirannya menghasilkan melemahnya dinding sel dan seiring hemolisis yang mengarah ke anemia. Beberapa tanaman dilaporkan telah antisickling sifat yang Cajanus cajan ekstrak biji dan ekstrak Zanthoxylum macrophylla akar (IWU et al, 1984;. Elekwa et al, 2005.). Lainnya digunakan sebagai obat tradisional oleh orang-orang lokal dalam mengobati Sickle Anemia sel adalah nigrescens Parquetina daun dan batang (Keluarga: Periplocaceae) dan pepaya Carica daun (keluarga: Caricaceae ) ( Imaga et al ., 2.009 ). Namun , sedikit telah melaporkan tentang antioksidan

Nutr i e nt komposisi. Ini mendorong kita untuk melaksanakan studi penilaian

Halaman 22.202 Sci. Res. Esai fitokimia antioksidan sifat gizi ini tanaman yang digunakan untuk manajemen ethnomedically sel sabit. BAHAN DAN METODE Bahan kimia Semua bahan kimia dan reagen yang digunakan adalah kelas analitis dan diperoleh dari Sigma Chemical Company dan digunakan tanpa lebih lanjut pemurnian. Bahan tanaman Daun C. pepaya dan P. nigrescens dikumpulkan dari Kehutanan Research Institute of Nigeria (frin), Ibadan, Nigeria 2008 dan disahkan oleh Usang Felix dari Institut yang sama. Voucher spesimen dari C. daun pepaya (FHI: 106.994) dan P. daun nigrescens (FHI: 106.998) yang disimpan di Institut herbarium. Ekstraksi daun Kedua tanaman diekstraksi dengan lengkap berair-metanol ekstraksi menggunakan soxhlet aparat dalam metode yang dijelaskan sebelumnya (. Onah et al, 2002) dengan menggunakan air - metanol (1:3, 60 - 80 ° C) sebagai pelarut setelah de-fatting dengan hewan-eter (60 - 80 ° C). Ekstrak yang kemudian membeku-dikeringkan dan digunakan untuk fitokimia dan gizi analisis. Fitokimia skrining

Tes kimia dilakukan secara kualitatif pada ekstrak dan yang bubuk spesimen menggunakan prosedur standar untuk mengidentifikasi asam amino dan konstituen fitokimia seperti yang dijelaskan oleh Edeoga et al. (2005); Sofowara (1993); Trease dan Evans (1996); Harborne (1973) dengan sedikit modifikasi. Test untuk alkaloid Setiap sampel tanaman (0,5 g) dilarutkan dalam 5 ml HCl encer dalam mandi uap dan disaring. Tiga metode yang berbeda yang digunakan. Kekeruhan atau pengendapan dengan salah satu dari reagen berikut adalah diambil sebagai bukti keberadaan alkaloid. 1 ml di atas Filtrat diobati dengan beberapa tetes pereaksi Mayer menimbulkan krim atau endapan kuning pucat. Lain ml 1 dari filtrat adalah diobati dengan beberapa tetes pereaksi Dragendoff yang menimbulkan suatu oranye endapan. Terakhir, 1 ml filtrat diobati dengan itu Wagner reagen menimbulkan endapan coklat cokelat atau kemerahan. Test untuk tanin Sekitar 0,5 g sampel bubuk kering direbus dalam 20 ml air dalam tabung reaksi dan kemudian disaring. Beberapa tetes besi 0,1% klorida ditambahkan dan diamati untuk kecoklatan hijau atau biru- pewarnaan hitam. Test untuk phlobatannins Pengendapan endapan merah ketika ekstrak air dari masing-masing sampel tanaman direbus dengan asam klorida 1% air sebesar diambil sebagai bukti kehadiran phlobatinins. Test untuk saponin Sekitar 2 g sampel bubuk direbus dalam 20 ml suling

Air dalam bak air dan disaring. 10 ml filtrat dicampur dengan 5 ml air suling dan terguncang keras untuk stabil persisten buih. Para buih dicampur dengan 3 tetes minyak zaitun dan terguncang penuh semangat, kemudian mengamati untuk pembentukan emulsi. Pentil untuk flavonoid Tiga metode yang digunakan untuk menentukan adanya flavonoid dalam sampel tanaman (Sofowara, 1993; Harbrone, 1973). 5 ml larutan amonia encer yang ditambahkan ke sebagian dari air filtrat dari masing-masing ekstrak tumbuhan diikuti dengan penambahan terkonsentrasi H2S04. Sebuah pewarnaan kuning diamati dalam setiap ekstrak menunjukkan adanya flavonoid. The pewarnaan kuning menghilang pada berdiri. Beberapa tetes larutan aluminium 1% ditambahkan ke bagian masing-masing filtrat. Sebuah pewarnaan kuning diamati menunjukkan adanya flavonoid. Sebagian dari sampel tanaman bubuk adalah dalam setiap kasus dipanaskan dengan 10 ml etil asetat selama mandi uap selama 3 menit. Campuran disaring dan 4 ml filtrat terguncang dengan 1 ml encer larutan amonia. Sebuah pewarnaan kuning diamati menunjukkan positif tes untuk flavonoid. Test untuk steriods Dua mililiter anhidrida asetat ditambahkan dengan 0,5 g etanol ekstrak sampel masing-masing dengan 2 ml H2S04. Warna berubah dari violet biru atau hijau dalam sampel menunjukkan adanya steroid. Test untuk glikosida jantung (Keller-Killani test)

Lima mililiter masing-masing ekstrak dirawat dengan 2 ml glasial asam asetat yang mengandung satu tetes larutan besi klorida. Ini adalah underlayed dengan 1 ml asam sulfat pekat. Sebuah cincin coklat antarmuka menunjukkan karakteristik deoxysugar dari cardenolides. Sebuah cincin ungu muncul di bawah cincin cokelat, sedangkan pada asam asetat lapisan, cincin kehijauan terbentuk hanya secara bertahap seluruh lapisan tipis. Proksimat analisis Komposisi proksimat dari karbohidrat, protein lemak, dan lainnya nutrisi ditentukan pada daun tanah kering C. pepaya dan P. nigrescens sesuai dengan protokol yang sesuai nomor identifikasi (Horwitz, 2000). Resmi metode AOAC untuk menganalisis berbagai parameter adalah sebagai tercantum: Crude protein 955,04 (2.4.03), serat kasar 962,09 (4.6.01), kelembaban 934,01 (4.1.03), abu 942,05 (4.1.10), lemak kasar 920,39 (4.5.01), dan karbohidrat dengan perbedaan. Micronutrient tekad Uji untuk kehadiran mineral-tembaga, besi, magnesium, mangan dan seng dilakukan mengikuti prosedur standar melalui spektroskopi serapan atom seperti yang dijelaskan oleh Okwu dan Josiah (2006) dengan sedikit modifikasi. Sampel tanah tanaman yang

Page 3Imaga et al. 2.203 Tabel 1. Analisis kualitatif fitokimia dari ekstrak tanaman. Uji P. nigrescens ekstrak metanol air C. pepaya ekstrak metanol air

Alkaloid ± ± Flavonoid ± ± Tanin ± ± Jantung glikosida ± ± Anthraquinones (Gratis) ± ± Antrakuinon (Bound) ± ± Phlobatinins ± ± Saponin ± ± Anthocyanosides - - Semua eksperimen dilakukan dalam rangkap tiga. Legenda: ± Hadir, - Absen. Tabel 2. Proksimat komposisi C. pepaya dan P. nigrescens. Komposisi Persentase C. pepaya Persentase P. nigrescens Lipid 8.27 ± 0.00 11.03 ± 0.01 Protein 0.05 ± 0.00 40.96 ± 0.00 Serat kasar 16,05 ± 0,01 21.09 ± 0,05 Embun 4.39 ± 0.00 2.15 ± 0.00

Abu 15.52 ± 0,05 10,66 ± 0,01 Karbohidrat 55,74 ± 0,00 14.12 ± 0.00 Semua eksperimen dilakukan dalam rangkap tiga dan data disajikan sebagai mean ± SEM%. diayak dengan karet 2 mm saringan dan 2 g dari masing-masing tanaman Sampel ditimbang dan dikenakan kering mencuci di sumur- dibersihkan porselin wadah pada 550 ° C dalam tungku meredam. Itu abu yang dihasilkan dilarutkan dalam 5 ml HNO3/HCl/H2O (01:02:03) dan dipanaskan lembut di piring panas sampai asap cokelat menghilang. Untuk sisa materi dalam wadah masing-masing, 5 ml air deionisasi adalah ditambahkan dan dipanaskan sampai larutan tidak berwarna diperoleh. Itu mineral solusi dalam wadah masing-masing dipindahkan ke dalam 100 ml volumetrik termos dengan penyaringan melalui kertas No 42 whatman penyaring dan volume dibuat untuk tanda dengan air deionisasi. Ini Solusi yang digunakan untuk analisis unsur dengan penyerapan atom spektrofotometer. Sebuah sel 10-cm digunakan dan konsentrasi dari setiap elemen dalam sampel dihitung berdasarkan persentase kering materi. Kualitatif tes untuk kehadiran vitamin antioksidan A, C, E, B 12 dan asam folat yang ditentukan oleh Cair Kinerja Tinggi Kromatografi menggunakan prosedur standar seperti yang dijelaskan oleh Okwu dan Yosia (2006) dengan sedikit modifikasi.

Komposisi asam amino dalam C. ekstrak pepaya ditentukan kualitatif dengan kromatografi lapis tipis dengan menggunakan metode Ekeke dan Shode (1990) dengan sedikit modifikasi. Disiapkan TLC piring yang terlihat dengan ekstrak tumbuh-tumbuhan dan standar asam amino dan didiamkan dalam tangki TLC jenuh dengan pelarut sistem campuran n-butanol asam, asetat dan air dengan perbandingan 08:02:02 v / v Percobaan dihentikan ketika bagian depan pelarut adalah pada jarak yang sesuai dalam tangki [di dekat bagian atas dari pelat]. Itu piring diizinkan untuk udara kering dan disemprot dengan agen lokasi - ninhidrin solusi. Piring kemudian dimasukkan ke dalam oven pada 110 ° C selama 5 min setelah itu titik berwarna terlihat di piring yang dilingkari dan gerakan masa kini asam amino yang dihitung oleh perusahaan Faktor keterbelakangan, R F . HASIL Hasil ekstrak adalah 5,78 dan 10,87% untuk C. pepaya dan P. nigrescens, masing-masing. Kualitatif phytochemical skrining untuk C. pepaya dan P. nigrescens daun ekstrak ditemukan mengandung alkaloid, flavonoid, glikosida, tanin, saponin dan antrakuinon (Tabel 1). Anthrocyanosides tidak terdeteksi dalam sampel. Gizi komponen Analisis proksimat tanaman menunjukkan bahwa semua macronutrients hadir, dengan karbohidrat menjadi

yang paling melimpah di C. pepaya dan protein yang paling melimpah di P. nigrescens (Tabel 2). Vitamin dan mineral analisis mengungkapkan adanya antioksidan penting mikronutrien seperti yang ditunjukkan pada Tabel 2. Kedua daun mengandung Vitamin A, C, B 12 dan Asam folat tetapi kekosongan Vitamin E. ekstrak daun pepaya hanya berisi magnesium, logam lain yang diuji tidak terdeteksi. Sedangkan Ekstrak Parquetina mengandung tembaga, besi, magnesium, mangan dan seng. Histidin, glisin, arginin, treonin, sistein, asam glutamat adalah asam amino ditemukan di kedua Tabel ekstrak tanaman 3.

Page 42204 Sci. Res. Esai Tabel 3. Micronutrient komposisi ekstrak tanaman. Uji sampel (mg / kg) Carica papaya daun Parquetina nigrescens daun Vit. A 7873,4 ± 0,05 1063.5 ± 0,05 Folic acid 2,4 ± 0,05 3,2 ± 0,05 Vit. B12 2,8 ± 0,05 3,9 ± 0,05 Vit. C 89,0 ± 0,05 131,4 ± 0,05 Vit. E 0.00 0.00

Cu - 4610 ± 0,05 Fe - 6740 ± 0,01 Mg 6.76 ± 0.04 0,1 ± 0,04 Mn - 204 ± 0,05 Zn - 9870 ± 0,05 Legenda: (n = 3) semua tes dilakukan dalam rangkap tiga dan nilai-nilai yang dinyatakan sebagai nilai mean ± SEM. PEMBAHASAN Konstituen dari ekstrak C. pepaya (kering) daun dan P. daun nigrescens mengandung senyawa dan mikronutrien yang mungkin bertanggung jawab untuk mereka mengamati aktivitas antioksidan. Ini adalah fenolik senyawa, alkaloid, glikosida, amino asam, antioksidan vitamin dan mineral. Penelitian yang dilakukan terhadap kegiatan antisickling dari phytomedicines menunjukkan bahwa air-metanol bentuk ekstraksi mengandung bertanggung jawab untuk kegiatan yang diamati aktif konstituen (Elekwa et al, 2005;. Onah et al, 2002;. Ekeke dan Shode, 1990; Sofowora et al, 1975).. Ini karena itu, suatu indikasi bahwa senyawa biologis aktif yang polar dan dengan demikian, yang terkandung dalam air- ekstrak metanol daun.

Ekstrak ditemukan kaya akan karbohidrat, beberapa lipid dan protein. Hal ini menunjukkan bahwa daun dapat digunakan sebagai nutraceutical karena daun memiliki beberapa nilai gizi ketika diambil sebagai makanan atau potensial obat sifat bila digunakan sebagai herbal. Tanaman juga dapat disimpan untuk waktu yang lama tanpa kehilangan rasa karena dibuktikan dengan abu proksimat dan kadar air. Alkaloid telah membentuk spektrum luas anti- aktivitas bakteri dan juga digunakan sebagai analgesik dan narkotika untuk menghilangkan rasa sakit. Hal ini mendukung temuan sebelumnya [Sofowora, 1979] yang melaporkan anti-inflamasi aksi Fagara, sebuah Phytomedicine antisickling dikenal (Elekwa et al., 2005). C. pepaya dan P. nigrescens daun ekstrak mungkin memiliki anti-inflamasi properti sebagai hasilnya dari phytochemical yang dapat mengerahkan properti yang mungkin terkandung dalam ekstrak, yang dapat membantu dalam menghilangkan nyeri yang terkait dengan sel sabit krisis dan juga dapat mencegah infeksi oportunistik dalam sel sabit penyakit. Flavonoid, glikosida, dan glikosida jantung ditemukan dalam ekstrak yang sugestif antioksidan properti. Flavonoid glikosida yang dilaporkan antioksidan dan digunakan sebagai anti-inflamasi dalam pengobatan kerapuhan kapiler (IWU, 1993). Kehadiran mereka

dalam ekstrak merupakan indikasi kuat tanaman ' antioksidan dan membran-menstabilkan properti. Ini indikasi aktivitas antioksidan lebih jauh dikonfirmasi oleh kehadiran vitamin antioksidan nutrisi, A dan C dan beberapa asam amino. Asam amino telah lama dikaitkan dengan antisickling aktivitas senyawa (Acquaye et al., 1982). Fenilalanin telah dilaporkan menjadi dominan antisickling agen di C. cajan ekstrak biji (Ekeke dan Shode, 1990). Dalam studi ini, asam amino yang ditunjukkan dalam glutathione formasi [sistein, asam glutamat] ditemukan untuk hadir dalam ekstrak daun. Glisin, sistein dan Asam glutamat merupakan prekursor glutation diketahui, suatu alami protein yang melindungi setiap sel, jaringan dan organ dari radikal bebas beracun dan penyakit. Stres oksidatif berikutnya dari peroksidasi lipid membran eritrosit adalah tanda terkemuka sel sabit Krisis fenomena. Pengambilan tumbuhan nutraceutical (Pepaya dan daun parquetina) memasok beberapa diperlukan asam amino untuk produksi glutation, juga sebagai nutrisi antioksidan yang dibutuhkan untuk melindungi merah darah membran sel dari lisis dan kehancuran. Itu Kegiatan antisickling dilaporkan dari ekstrak daun mungkin dalam bagian sebagai akibat dari adanya prekursor untuk GSH

biosintesis hadir dalam kelimpahan dalam ekstrak. Namun, dalam studi in vivo mungkin diperlukan untuk memperkuat klaim ini. Kemungkinan penggunaan pepaya dan daun parquetina ekstrak sebagai nutraceutical lebih lanjut didukung oleh Kehadiran vitamin B 12 dan asam folat. Folic acid dan vitamin B 12 berguna dalam sintesis sel darah merah, Oleh karena itu, kehadiran mereka di ekstrak tumbuh-tumbuhan yang sugestif darah - membangun properti dari ekstrak. Magnesium ditemukan hadir dalam ekstrak. Ini adalah penting karena studi sebelumnya melaporkan bahwa lisan suplemen magnesium mengurangi dehidrasi eritrosit pada pasien dengan penyakit sel sabit dan ditunjukkan dalam sistem transportasi beberapa (De Franceshi et al., 1997). Ekstrak daun sehingga bisa menjadi sumber yang baik untuk ini mikronutrien yang diperlukan untuk fungsi yang optimal dari Gardos Channel dan sistem membran lainnya transportasi

Halaman 5dalam sel. Glikosida sianogen / anthocyanides yang dilaporkan metabolit sekunder beracun dan berbahaya jika terdapat dalam tanaman (IWU, 1993). Ini tidak hadir dari ekstrak pepaya dan parquetina sehingga menyarankan bahwa daun mungkin tidak beracun. Kehadiran

antioksidan nutrisi vitamin, A dan C dan beberapa amino asam merupakan indikasi lebih lanjut dari aktivitas antioksidan kemungkinan dari ekstrak. Nutrisi ini dapat bertindak secara tunggal atau sinergis untuk mempotensiasi aksi tanaman 'antisickling. The air-metanol ekstrak C. pepaya kering daun dan P. daun nigrescens karena itu, disarankan untuk uji klinis yang tepat dan pemerintah. UCAPAN TERIMA KASIH Para penulis berterima kasih kepada Bpk TI Adeleke Departemen Pharmacognosy, Universitas Lagos, Nigeria dan Dr Ny Henrietta Ogbunnugafor dari itu Departemen dari Biokimia, Nnamdi Azikiwe University, Awka, Nigeria, atas bantuan mereka dalam penelitian ini. REFERENSI Acquaye CTA, muda JD, Ellory JC, Gorecki M, Wilcher M (1982). Mode transportasi dan kemungkinan mekanisme kerja L- Fenilalanin benzylester sebagai agen antisickling. Biochimica et Biophysica Acta. 693: 407-416. De Franceshi L, D Bachir, Galacteros F, G Tchernals, Cynober T, Alper S, Platt O, Beuzard Y, Brugnara C (1997). Oral magnesium suplemen mengurangi dehidrasi eritrosit pada pasien dengan sabit penyakit sel. J. Clin. Berinvestasi, 100 (7): 1.847-1.852. Edeoga HO, Okwu DE, Mbaebie BO (2005). Fitokimia

konstituen dari beberapa tanaman obat Nigeria. Afr. J. Biotech. 4 (7): 685-688. Imaga et al. 2.205 Ekeke GI, Shode FO (1990). Fenilalanin adalah Dominan Antisickling agen di ekstrak biji Cajan Cajanus. Planta Medica 56: 41-43. Elekwa I, Monanu, MO, Anosike EO (2005). Efek dari ekstrak air akar Zanthoxylum macrophylla pada stabilitas membran manusia eritrosit genotipe yang berbeda. Biokemistri 17 (1): 7-12. Harborne JB (1973). Fitokimia metode, London. Chapman dan Hall, Ltd hlm 49-188. Horwitz W (2000). Resmi Metode Analisis AOAC International, 17 th Ed. USA. Imaga KKP, Gbenle GO, Okochi VI, Akanbi SO, Edeoghon SO, Oigbochie V, Kehinde MO, Bamiro SB (2009). Antisickling Properti Carica papaya ekstrak daun. Afr. J. Biochem. Res. 3 (4): 102-106. Iwu MM (1993). Handbook Tanaman Obat Afrika. hlm 141-142. CRC Press, USA. Iwu MM, Igboko AO, Onwubiko H, Ndu UE (1984). Antisickling sifat Cajanus cajan: Efek pada Gelasi Hemoglobin dan Oksigen Affinity. Planta Medica 24: 431-432. Iyamu EW, Ernest AT, Toshio A (2003). Niprisan (Nix - 0699) meningkatkan tingkat kelangsungan hidup tikus transgenik sel sabit di bawah akut hipoksia kondisi. Br. J. Hematol. 122: 1.001-1.008.

Okwu DE, Josiah C (2006). Evaluasi komposisi kimia dua tanaman obat Nigeria. Afr. J. Biotech. 5 (4): 357-361. Onah JO, Akubue PI, Okhide GB (2002). Para Kinetika Pembalikan Pra-sickled Eritrosit oleh Ekstrak berair dari Cajanus cajan benih. Phytother Res, 16:. 1-3. Padma SV, Vandna TL, Warjeet S, Ningomban S (2006). Antioksidan sifat dari beberapa spesies eksklusif dari keluarga zingiberacea dari Manipur Elektronik. J. Environ. Agric. Makanan Chem. 5 (2): 1.318-1.324. Sofowara A (1993). Tanaman obat dan obat tradisional di Afrika. Spectrum Books Ltd, Ibadan, Nigeria, p. 289. Sofowora EA (1979). Prosiding Simposium on Fagara dan Merah Darah your. Eds. A. Sofowora dan AI Sodeye, p. 79-87. Sofowora EA, Issacs-Sodeye NA, Ogunkoya LO (1975). Antisickling sifat Fagara. Lloydia 38: 169-171. Trease GE, Evans WC (1996). Pharmacognosy, 14 th Edisi, WB Saunders Company Ltd Inggris. hlm 1.098 -1.115

Page 1752 Okt 2011, VOL. 36 No 10 Pengantar Jagung (Zea mays Linnaeus 1753, Gramineae) adalah salah satu Sereal paling penting tanaman di dunia, contribut- ing dengan kesejahteraan juta- singa petani miskin. Ini adalah yang penting secara global tanaman dan disukai makanan pokok untuk lebih dari satu miliar orang di Sub- Sahara Afrika dan Latin Amerika, di mana hewan-pro Sumber Tein tidak terjangkau oleh masyarakat umum. Dari 1,4 × 10 8 telah berkembang secara global dengan jagung, 96 × 10 6 memiliki yang terletak dalam Mengembangkan Coun- mencoba. Empat Negara akun lebih dari setengah dari developing dunia ini jagung tanaman- elevasi daerah (Pingali dan Pan- Dey, 2001): China (26 × 10 6 ha); KATA KUNCI / Kegiatan Biologi / Caricaceae / Jagung / Tanaman Ekstrak / Toksisitas / Diterima: 06/05/2010. Modifikasi: 2011/09/16. Diterima: 2011/09/19. Rodolfo Brito Figueroa. Ph.D. dalam Strategi untuk Daerah Ag- Pembangunan ricultural, Cole- Graduate gio (COL- POS), Meksiko. Profesor-Re- pencari, Institut Politeknik Nacional, Morelos, Meksiko. Arturo Huerta de la Peña. Ph.D. di Agronomi, Universitas Politécnica de Madrid, Spanyol.

Profesor-Peneliti, COL- POS, Puebla, Meksiko. Ignacio Perez Moreno. Ph.D. di Agronomi, Universitas Navarra, Spanyol. Peneliti dan Profesor, Universitas La Rioja, Logroño, Spanyol. 0378-1844/11/10/752-05 $ 3.00 / 0 Brasil (12 × 10 6 ha), Meksiko (7,5 × 10 6 ha); dan India (6 × 10 6 ha). Dalam peringkat global direct manusia konsumsi jagung, Meksiko adalah di bagian atas, hanya dilampaui oleh Bosnia-Her- Herzegovina. Pada tahun 2006, per kapita Konsumsi jagung di Meksiko 260kg/person adalah, dan negara didedikasikan 12 × 10 6 ton biji-bijian jagung untuk mengarahkan manusia man konsumsi. Menggabungkan manusia konsumsi dengan didedikasikan untuk jagung ternak dan cadangan nasional, untuk- pemegang saham tahunan konsumsi jagung di Meksiko melayang sekitar 26 × 10 6 ton. Dari jumlah ini Jumlah, 20 × 10 6 Pro-ton diproduksi di dalam negeri, dan- lainnya 6-7 × 10 6

Apakah ton im- porting, Orang yang menjadi com- Berpose Terutama kuning jagung untuk pakan ternak dari Amerika Serikat (García-Rano dan Keleman, 2007). Salah satu faktor yang Kerugian di panen jagung di Mexi- co dan jagung tumbuh- wilayah di Amerika Conti- nent adalah serangga hama, antara Yang Spodoptera frugiperda (JE Smith, 1797) (Lepidoptera- tera: Noctuidae) adalah PALING penting. Selama serangan itu semua tahap pertumbuhan tanaman dan dapat menyebabkan penurunan hasil tions hingga 10% (Pingali dan Pandey, 2001). Kerugian ini persentase lebih tinggi di daerah tropis kal dan subtropis daerah Amerika Latin, dengan lebih dari 35% Kerusakan tercatat di Kolombia (Torres dan Cotes, 2005) dan 40% di Kuba (Fernández, 2002). Di Meksiko itu menyebabkan Tanaman Kerugian dari 20 sampai 100% (Del Rincon et al., 2006). Untuk kontrol, benih Entah pengobatan dengan serangga sistemik ticides atau penerapan insektisida pasir scat- yang terdaftar di tanah yang digunakan. Ini Telah Tampil Bahwa sembarangan penggunaan ini senyawa mengarah ke utama kemerosotan lingkungan pemerintah dan dapat membahayakan bagi The Kesehatan Kedua Produsen dan Konsumen, Dan Juga di- courages penampilan Populasi hama tahan, Menghilangkan mereka Jan-Natural Memfasilitasi untuk panen dan menghasilkan tant pertumbuhan dampak

sekunder hama, Yang menghasilkan dalam Peningkatan biaya dalam tumbuh jagung. Insektisida Kegiatan SEED Ekstrak OF Carica papaya (L.) Terhadap jatuhnya ulat grayak Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) Rodolfo Brito Figueroa, Arturo Huerta-de la Peña, Ignacio Perez Moreno, Vicente Santiago Marco Mancebón dan Yesus Francisco Lopez-Olguin RINGKASAN Penelitian ini menunjukkan Bahwa produk alami dari Carica pepaya dapat dianggap sebagai alternatif yang valid untuk mengendalikan hama di bidang pertanian. Sifat insektisida benih ex- saluran dari empat kultivar C. pepaya (Maradol, Mammee, Yel- ) Rendah dan Hawaii Were ditambahkan ke diet serangga buatan. Bio- Tes Were Dilakukan dengan hexanic, acetonic dan metanol Konsentrasi ekstrak pada 10, 100 dan 1000ppm. Semua tes Dilakukan Dengan Tahap larva pertama Spodoptera fru- frugiperda. Responnya Kematian Variabel serangga. Ekstrak dari biji dari kultivar Maradol, Mammee dan Kuning C. pepaya, Diikuti oleh ekstrak dari biji dari Hawaii kultivar, Terapan di Konsentrasi 10, 100 dan 1000 ppm, Apakah toksik pada S. frugiperda larva (50-70% fana-dikoreksi ity rate). The acetonic ekstrak Maradol dan Mammee kultivar di 10ppm Were The, Paling Efektif kematian Menyebabkan dari 73,6 dan 62,8% dari larva, masing-masing. Vicente Santiago Marco Mance-

batubara. Agronomi Insinyur Dokter mo, Universitas Madrid, Spanyol. Profesor-Re- pencari, Universitas Rioja. Logrono, Spanyol. Yesus Francisco Lopez-Olguin. Ph.D. di Agronomi, Universitas Politécnica de Madrid, Spanyol. Profesor-Peneliti, Berjasa Universitas Otonomi- noma de Puebla (BUAP), Meksiko co. Alamat: Departemen Agroekologi dan Lingkungan, In- stituto of Sciences, BUAP. Av 14 South 6301, Bldg 103-A, CU, 72.570-Puebla, Meksiko. e-mail: jesus.lopez @ correo.buap.mx

Halaman 2753 Okt 2011, VOL. 36 No 10 Hal ini penting untuk OLEH KARENA ITU Foster Penerapan hama terpadu manajemen, Meningkatkan Proses sampling dan pemantauan sebagai dasar yang benar keputusan mak- ing dan Mempromosikan rasional integrasi alternatif lain alat, sehingga dapat mengurangi ad- Disebutkan efek kedepan menjadi- menerus. Salah satu alat tersebut adalah penggunaan produk dari nabati sumber. Tanaman Mengandung luas keragaman metabolit sekunder lites, beberapa Yang mengerahkan Mereka berperan penting dalam pertahanan terhadap patogen dan Herbi- Vores (Ware dan Whitaker, 2004). Dalam berbagai kasus, memiliki Yang menjadi Menunjukkan penggunaan produk yang berasal dari tumbuhan re- duces penerapan syn- Thetic agrokimia dengan Mengakibatkan tingkat yang lebih rendah dari ketahanan-

dikan pembangunan antar hama Populasi, berkat mereka berbeda mode tindakan dan Lebih besar Menghormati menguntungkan serangga fauna (Bahena et al. 2003) karena selektivitas mereka. Figueroa-Brito (2002) mengevaluasi, ed efek bubuk Terapan dari tanaman yang berbeda sebagai 15% dari diet buatan S. frugiperda. Penulis tidak- ed Bahwa daun Pithecel- manis lobium Benth (Fabace- ae) dan Crescentia alata HBK (Bignoniaceae) dan biji Meksiko Jacaratia A. DC. (Caricaceae) ACTED AS pencegahan, dan Bahwa daun Prosopis juliflora (Sw.) DC. (Fabaceae) dan biji Carica papaya (L.) (Caricaceae) dan Bromelia hemisphaerica Lam. (Brome- liaceae) TERBUKTI beracun untuk pertama instar larva hama. Di Selain itu, bubuk dari C. pa- Mammee paya menumbuhkan benih (Figueroa-Brito, 2002; Figueroa-Brito et al. 2002a, b), serta Bagi Maradol tersebut, Kuning dan Ha- waiian kultivar (Franco et al. 2006) dalam Konsentrasi 10, Adalah 15 dan 20% sangat beracun Disebabkan dan Kematian 100% tingkat larva S. frugiper- diberikan dalam waktu kurang dari 96h. Berdasarkan Ini Anteseden, The Tujuan Apakah penelitian ini: a) Evaluasi efek toksik dari hexanic, acetonic dan metha- nolic ekstrak biji dari

Mammee, Maradol, Kuning dan Hawaii kultivar C. pada larva neonatus pepaya S. frugiperda, dan b) untuk com- menghentikan toksisitas relatif dari yang berbeda kultivar dan con- centrations dari ekstrak. Bahan dan Metode Pengumpulan dan Pemeliharaan S. frugiperda S. Apakah larva frugiperda dikumpulkan dari tanaman jagung tions di Yautepec, Morelos, Meksiko, Selama Juli 2005. Menggunakan sikat dgn serangga dan pinset, 153 larva di Dikumpulkan tahapan yang berbeda dari tanaman jagung (15 hari pertumbuhan). Larva Kemudian dibawa ke laboratorium Tory dan makan individualmente pada diet buatan (Burton dan Perkins, 1987) dan disimpan di tertutup, plastik silinder con- tainers tinggi, 3cm oleh 3.5cm diameter. Larva bawah- Dalam ini pupation pergi sama botol dan Ketika Mereka muncul sebagai orang dewasa, Mereka Apakah Ditempatkan di kertas cokelat wadah dengan volume 3 liter, Mengandung 10 cm-diameter plastik Petri hidangan dengan kapas basah wol- ened dalam larutan gula 10% untuk memberi makan mereka. Perkawinan dan lay- ing telur terjadi di Wadah ini. Untuk tes, generasi kedua dari neo- nate larva Were digunakan. Insektisida aktivitas ekstrak biji dari Carica papaya (L.) terhadap Codling Ulat grayak Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera: Noctuidae)

Rodolfo Brito Figueroa, Arturo Huerta-de la Peña, Ignacio Perez Moreno, Vicente Santiago Marco Mancebón dan Yesus Francisco Lopez-Olguin ABSTRAK Atividade InSETICIDA OF ekstrak Carica papaya Sementes DE (l.) terhadap A gypsy-DO- Cartridge Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera Noctuidae) Rodolfo Brito Figueroa, Arturo Huerta-de la Peña, Ignacio Perez Moreno, Vicente Santiago Marco Mancebón dan Yesus Francisco Lopez-Olguin RESUMO Studi ini menunjukkan bahwa produk alami dari Carica pepaya dapat dianggap sebagai alternatif yang valid untuk pengendalian hama di bidang pertanian. Hal ini- insektisida sifat benih tudiaron ekstrak Empat kultivar C. pepaya (Maradol, Mamey, Kuning dan Hawaii) dimasukkan ke dalam pakan untuk serangga. Bioassay dengan ekstrak heksana, aseton dan metanol pada konsentrasi 10, 100 dan 1000ppm. Untuk- tes das dilakukan dengan larva tahap pertama jatuh ulat grayak Spodoptera frugiperda. Variabel Ini estudo Tunjukkan bahwa Anda naturais dari Carica papaya Produtos uma podem dianggap sebagai alternatif yang valid atau- na insetos troli pertanian berbahaya. Estudaram-adalah sebagai proprie- insektisida kegiatan ekstrak dari empat kultivar Sementes C. pepaya (Maradol, Mamey, Amarelo dan Havai) dimasukkan uma insetos makanan buatan. Bioensaios Realizaram adalah com-

Kutipan hexânicos, aseton dan metanol em concentrações dari 10, 100 dan 1000ppm. Semua foram provas dilakukan sebagai com larva dari gipsi militer primeiro memberikan Estágio do milho Spodoptera Frugi- respon adalah kematian serangga. Dalam hasil menunjukkan bahwa ekstrak dari biji dari kultivar Mara- dol, Mamey dan Kuning C. pepaya, diikuti oleh ekstraksi batuk benih kultivar Hawaii, diterapkan dalam konsentrasi ppm konsentrasi 10, 100 dan 1000, adalah beracun dalam jangka- pergi ke S. frugiperda (50-70% kematian dikoreksi). Antara mereka, ekstrak aseton dari Maradol kultivar dan Ma- mey ke 10ppm yang paling efektif dalam menyebabkan persentase mortalitas 73,6 dan 62,8% dari larva, masing-masing. perda. Sebuah variável Jawaban mortalidade foi untuk melakukan inseto. Kami menghasilkan Menyatakan bahwa Anda terdaftar FICOU Sementes ekstrak dari dua kultivar Maradol, Mamey dan Amarela C. pepaya, diikuti Kutipan rambut dari Sementes yang tumbuh Havai, diterapkan concentrações 10 em, 100 dan 1000ppm, nas resultaram larva beracun dari S. frugiperda (50-70% corrigida mortalidade). Di antara belut, I Kutipan aceto- Nicos dua kultivar Maradol dan Mamey ke 10ppm foram os mais ao efetivos penyebab mortalidade porcentagem uma 73,6 dan Das larva 62,8%, masing-masing.

Page 3754 Okt 2011, VOL. 36 No 10

Ekstrak tanaman C. Apakah pepaya buah ac- quired dari pasar yang berbeda. The Yellow dan Hawaii kultivar di negara bagian Oaxaca ca, dan Mammee dan Maradol kultivar di negara bagian Morelos. Benih Were dipisahkan oleh kultivar dan meninggalkan kering di tempat teduh selama 15 hari. Setelah kering, biji Yang digiling dan diayak dengan penggiling listrik LKA Wearke (MF 10 Model Dasar, GMBH & Co, Jerman) dengan menggunakan 0.25mm mesh. Dari pow- Yang diperoleh der, 500g masing-masing Dibebani yang keluar dan menumbuhkan Ditempatkan di 2 Erlenmeyer liter termos dengan 1,5 liter hexane untuk maserasi pertama. Campuran tersebut Diperoleh diaduk ringan di penerima dan kiri di ekstraksi untuk 72h pada suhu ambien. Setelah saat ini, campuran itu divaksinasi um disaring menggunakan Whatman ® No paper 5 filter. Sama Prosedur Diikuti sedang menggunakan Entah aseton atau metanol pelarut (Figueroa-Brito, 2002). The heksana, aseton atau metanol, sebagaimana berlaku, Apakah dihapus dari solusi Diperoleh oleh tekanan Mengurangi distilasi menggunakan rotavapor (Büchi model R-114), sehingga Memperoleh, acetonic hexanic dan metanol ekstrak setiap kultivar, dan ini Were dikeringkan dalam taksi aliran laminar net, yang akan digunakan dalam bioas- kata. Bioassay Untuk persiapan 250g

diet buatan, Berikut Usulan komponen dengan Bur- ton dan Perkins (1987), Apakah digunakan: biji (30g), gandum (13.75g), ragi bir ' (8.75g), asam askorbat (0.87g), sorbic acid (0.27g), metil parahydrobenzoate (0.55g), formaldehid sebesar 10% (2.5ml), air untuk kacang (116ml) dan air untuk agar (90ml). Ini Apakah bahan-bahan dicampur dengan tersebut, hexanic acetonic atau meth- anolic ekstrak C. pepaya benih kultivar setiap Konsentrasi jangkauan 10, 100 dan 1000ppm. Kontrol terdiri hanya pada buatan diet dan 1ml heksan, ace- nada atau metanol. Diet berpenghasilan dients dan Konsentrat Ekstrak campuran Mengikuti Were Disarankan oleh metode Franco et al. (2006). Dari campuran siap, 5ml Were Ditempatkan dalam plastik silinder kontainer berukuran 3cm tinggi dengan diameter 3.5cm. Setelah diet atau di-ekstrak et-pelarut gel, neonatus yang Ditempatkan di larva masing-masing dengan- tainer Dengan bantuan denda, unta-sikat rambut. Ini process itu berulang 3 kali, menggunakan 30 larva untuk setiap rep- lication, dan wadah Diatur dalam benar-benar random cara pembibitan yang chamber (Presisi Inkubator 818, model FFU20FC4CW0 18, Electrolux Home Produk, USA) pada 27 ± 1 º C, 60 ± 5% kelembaban relatif dan foto- periode 00:12 h. Mortalitas tercatat untuk masa hidup

larva, Yang tes Berlangsung, dan dikoreksi according ke Abbot metode (Abbot, 1925). Kematian The Yang Berubah data ke arc- sebelum melakukan sinus ANOVA pada signifikansi lev- pada dari 5% (α = 0,05). The mor- Tality (%) Were berarti com- dinding menggunakan uji Tukey (Baja et al, 1997.), Dalam dua cara: 1) Kematian sarana kultivar masing-masing, dalam rangka Yang dari mereka tahu, di gen- eral, adalah paling beracun, dan 2) Membandingkan oleh semua mantan- traktat, untuk mengetahui mana Lebih aktif. Data mentah disajikan dan Kematian yang Data dikoreksi data. Statis- Analisis vertikal dilakukan menggunakan SigmaStat (2004). Hasil Dalam Tidak adanya C. Paus- dan, dalam kasus Kematian kontrol dengan heksana dan metanol adalah <10% dan dengan tengah memantau aseton 10,5% (Tabel I). Pada konsentrasi- trasi dari 10ppm, Maradol tersebut Adalah kultivar dan Mammee yang paling aktif Dengan An-av erage angka kematian larva 56,7% pada Kedua kasus, menunjukkan- ing perbedaan yang signifikan Dibandingkan dengan Kuning dan Hawaiian kultivar, Yang Juga Menunjukkan dif-signifikan ferences (p <0,001) Antara Sendiri (Gambar 1). Re- garding ekstrak, mean Diperoleh untuk kematian dengan aseton (47,8 ± 3,2%) adalah sig- Lebih besar nificantly (p <0,001) daripada berarti dalam Mereka dengan metanol dan heksana, tanpa

ada yang signifikan Berbeda- ences Antara dua Orang (Gambar 2). Ketiga ekstrak dari Kuning dan Mammee kultivar, dan hexanic dan acetonic ekstrak dari kultivar Maradol, Apakah The Most beracun yang, Seperti Mereka Disebabkan Kematian tingkat ≥ 50%. Secara khusus, acetonic ekstrak dari kultivar Maradol adalah yang paling aktif satu (p <0,001), dengan cor- rected Kematian dari 73,6 ± 2,1% (Tabel I). Pada konsentrasi 100ppm, Kuning dan Yang kultivar Mammee PALING beracun untuk serangga, dengan Kematian tidak berarti signifikan Perbedaan (Gambar 1) Tercatat Antara mereka (54,7 ± 6,3 dan 53,1 ± 3,3%, masing-masing). Dari ekstrak, Mereka Diperoleh dengan aseton Apakah The Most aktif (p <0,005), menyebabkan Kematian 48,5 ± 2,1% (Gambar 2). Berbagai ekstrak Disebabkan untuk kematian yang signifikan tingkat lebih dari 50% (Tabel I). The ace- Gambar 1. Pengaruh kultivar pepaya terhadap Mortalitas tahap larva pertama Spodoptera frugiperda makan dengan makanan buatan yang berbeda DIPERLAKUKAN DENGAN Konsentrasi ekstrak dari biji. TABEL I Kematian (± SE) DARI TAHAP PERTAMA DARI larva Spodoptera frugiperda FED DENGAN DIET BUATAN Konsentrasi DARI YANG MENGANDUNG BERBEDA HExANIC, ACETONIC DAN metanol ekstrak DARI BIJI DARI EMPAT DARI kultivar Carica papaya

Ekstrak Kematian ± SE (%) 10ppm 100ppm 1000ppm Heksana Maradol Aseton Metanol 50,6 ± 3,1 c 73,6 ± 2,1 a 46,1 ± 3,9 c 38,7 ± 3,1 c 63,5 ± 2,8 a 47,6 ± 1,9 b 44,0 ± 4,3 cd 71,7 ± 3,4 a 48,1 ± 1,3 c Heksana Mammee Aseton Metanol 50,1 ± 2,8 c 62,8 ± 3,9 b 57,1 ± 7,3 bc 51,1 ± 3,5 b 57,0 ± 2,5 ab 51,2 ± 5,0 b 57,0 ± 1,0 b 48,7 ± 1,6 c 52,6 ± 4,2 bc Kuning Hexane Aseton Metanol 50,3 ± 2,9 c 54,0 ± 1,2 c 54,7 ± 1,6 c 59,7 ± 1,4 a 62,3 ± 1,2 a 42,3 ± 1,5 c 56,1 ± 1,1 b 58,9 ± 2,2 b 33,1 ± 1,9 dan Hawaiian Hexane Aseton Metanol 20,6 ± 3,0 dan 38,5 ± 3,9 d

25,3 ± 2,6 dan 49,7 ± 2,2 b 49,5 ± 2,1 b 24,1 ± 1,4 d 42,2 ± 6,3 cd 43,3 ± 5,1 cd 36,4 ± 6,7 untuk Heksana Kontrol Aseton Metanol 8,9 ± 0,1 f 10,5 ± 0,4 f 9,6 ± 2,3 f 8,9 ± 0,1 dan 10,5 ± 0,4 dan 9,2 ± 2,3 e 8,9 ± 0,1 f 10,5 ± 0,4 f 9,2 ± 2,3 f Berarti dalam kolom yang sama dengan huruf yang berbeda Diikuti signifikan berbeda (Tukey test, p <0,05). SE: error Standard.

Page 4755 Okt 2011, VOL. 36 No 10 tonik ekstrak dari kultivar Maradol dan Kuning, dan hexanic dari Yellow kultivar Adalah ekstrak paling aktif (63,5, 62,3 dan mortalitas 59,7% hubungan, masing-masing) dan dengan signifikan secara statistik Berbeda- ence (p <0,001) dengan Menghormati sisa ekstrak. Pada konsentrasi 1000ppm tion, yang Maradol dan Mam- Yang The kultivar Kebanyakan mee beracun, tidak ada yang signifikan dif- ference antara mereka, Menyebabkan Tingkat mortalitas dari 54,4 ± 4,6 dan 52,8 ± 5,6% masing-masing (Gambar 1). Menurut Untuk ekstrak, yang acetonic memperlakukan- KASIH Disebabkan tertinggi

(P <0,01) Kematian di serangga (Gambar 2), dengan 45,9 ± 1,2%. Di dengan Konsentrasi 10, 100 dan 1000ppm, berbagai ekstrak Menunjukkan Kematian signifikan (> 50%), antara mana yang ac- Etonic ekstrak dari kultivar The Maradol Sebagian lagi beracun (p <0,01) untuk S. frugiperda larva dengan 73,6 ± 2,1, 63,5 ± 2,8 dan 71,7 ± 3,4% Kematian, masing (Tabel I). Diskusi Studi ini menunjukkan Bahwa various ekstrak C. pepaya benih, Maradol Kuning dan Mammee kultivar, dan Lesser Tingkat budidaya Hawaii, beracun bagi S. fru- larva frugiperda, Mencapai cor- rected Kematian persentase dari Antara 50,0 dan 73,6% di Konsentrasi 10, 100 dan 1000ppm. Dalam studi sebelumnya dengan bubuk C. biji pepaya, Figueroa-Brito (2002) Dilaporkan Mortalitas pada larva 100% con- centrations dari 10, 15 dan 20% dengan bubuk dari budidaya Mammee. Hal yang sama terjadi dengan bubuk dari Marad- ol Kuning, Hawaii dan Culti- vars Yang, pada saat yang sama con- centrations, menyebabkan kematian dalam semua larva setelah 24jam (Gar- Co, 2004). Franco et al. (2006) Kematian Belajar related ke waktu, Memperhatikan Bahwa bubuk dari empat kultivar di 10 dan 15% Disebabkan dikoreksi Tingkat mortalitas serangga dari lebih dari 90% setelah 72 dan 96h masing. Dalam Mengevaluasi insektisida efek benih dari empat kultivar dalam

bentuk ekstrak Dalam studi ini, Tingkat kematian lebih rendah daripada Mereka Dilaporkan untuk bubuk biji Yang diperoleh. Hal ini dapat Dijelaskan oleh kenyataan Bahwa tinggi beracun aktivitas C. biji pepaya dalam bentuk bubuk mungkin karena kemungkinan syn- ergy, di mana yang aktif components bertindak pelengkap militer jalan di S. frugiperda. MESKIPUN ini lebih rendah konsentrasi- trations, di ekstrak biji C. pepaya terus ex- ercise efek toksik tinggi pada larva S. frugiperda. Figueroa-Brito (2002) evaluasi- diciptakan hexanic, acetonic atau Berair ekstrak daun, biji dan bunga dari C. pa- Mammee membudidayakan paya di segar dan bentuk bubuk, di Konsentrasi dari 5,, 10 15 dan 20%, Berlaku untuk jagung daun cakram pada S. frugiperda larva dan hasil Menunjukkan Bahwa acetonic ekstrak benih (segar dan pow- dered) Apakah yang paling aktif, Menyebabkan Antara 50 dan 100% Kematian dalam serangga sama sekali Konsentrasi yang diuji. Di penelitian ini, yang mirip Diperoleh Dengan efek adalah acetonic ekstrak dari Mara- Kuning dan Mammee cul-dol tivars, Yang Were The Most yang aktif, Menyebabkan dikoreksi Kematian persentase 50 - 70% dari PALING Efektif mereka semua terbukti menjadi acetonic ekstrak Mara- dol kultivar. Hasil ini mungkin karena fakta itu Ketika kultivar yang berbeda diuji, dan Terutama Maradol

Mammee, dicampur dengan ac- Etone, yang paling aktif komponen- motivasional yang diekstrak. Perlu menunjukkan Itu The acetonic ekstrak Maradol dan Mammee berbudaya vars di 10ppm Disebabkan fanaity tingkat 73,6 dan 62,8% masing. Konsentrasi tions yang signifikan lebih rendah Mereka diadili oleh Figueroa dari- Brown (2002), yang menemukan itu acetonic ekstrak biji dari Mammee tumbuh di 5% menyebabkan kematian 100%. Ada banyak penelitian dari Dilakukan dengan toksisitas lainnya Tanaman Yang Mencerminkan serupa perilaku pada S. frugiperda (50 - 100% Mortalitas), Seperti Mereka dengan macerations dari Trichilia havanensis (Jacq.) oleh Lopez- Olguin (1994), dari Cabralea canjerana (Vell.) dan Cedrela fissilis Vell. oleh Rodriguez dan Vendramim (1996), dari Azadi- rachta indica (A. Juss.) dan Cedrela odorata L. by Ro- GUEZ dan Vendramim (1997), dan Melia azedarach L. dan Trichilia pallida Sw by Ro- GUEZ dan Vendramim (1998) . Banyak Meliaceae spe- jenis terus aktif di bentuk ekstrak etanol, seperti dalam kasus M. azedarach (Mikolajczak et al., 1989) Berair ekstrak dan, sebagai Terjadi dengan A. menunjukkan (Mikola- jczak dan Reed, 1987), dan T. pallida (Bogorni dan datang- mim, 2005). Dalam Penambahan

Tanaman ini, ada yang lain Tanaman yang memiliki ekstrak Dilaporkan sebagai telah serangga ticide efek pada S. frugiperda, Seperti ekstrak metanol Yucca periculosa Baker (Tor- res et al, 2003.), Iostephane heterophylla (Cav.) Benth. ex Hemsl. (Figueroa-Brito et al. 2006), acetonic ekstrak P. manis (Figueroa-Brito et al. 2007) dan ekstrak berair dari Ricinus communis L. (Trujillo dan Garcia, 2001) dan Trichil- C. pallens besarbesaran DC. (Bogorni dan Vendramim, 2005). Pengetahuan tentang biologis aktif produk tanaman yang melakukan tidak menyebabkan kerusakan pada ENVI- ronment, dengan baru-kompos Yang Mampu struktur dan pra- melayani keanekaragaman hayati, kontribusi untuk pengembangan kurang Strategi merusak daripada penggunaan insektisida kimia. Seperti halnya papain dan cystecine dari lateks C. pepaya terhadap Spodoptera li- mendatang (F.) (Konno et al., 2004), atau sistein protease inhibitor seperti papain pada Coleoptera dan Hemiptera serangga, serta pada nematoda phytopathogen (Blanco-Labra dan Aguirre, 2002). Penelitian lain memiliki Menunjukkan efek yang mirip dengan itu dari C. biji pepaya; seperti Kasus adalah dengan campuran epiperic phytogedunines atau asetat dari phytogedunines dan Senyawa: ligedunin dari Cedrela spp. (Céspedes et al. 2000), piplartin, 4-desmetilpi- plartin dan cenocladamin (Dyer et al, 2003.) Dan Piperin dari Piper cenocladum C.

DC. (Batista-Pereira et al. 2006), dan acetogenin dari Annona cherimolia Mill (Al- Alvarez et al, 2007.) Pada S. Frugi- perda. Senyawa ini melakukan tidak Mempengaruhi predator dan parasitoid (Bahena et al. 2003), seperti Kasus dengan Doru taeniatum (Dohrn) dan Roger ruidum Ectatomma (Schmutterer, 1990), dan pem- Khususnya di Chrysoperla carnea (Stephen) dan Trichogramma spp, dengan NeemAzal-T / S, PC. 05, PC Blank dan Kosong pro- saluran (El-Wakeil et al, 2006.; Aggarwal dan Brar, 2006). Mengingat hasil yang diperoleh Dalam studi ini dipertahankan bersama-sama Dengan data eksperimen al- Berkumpul dalam literatur siap, itu akan menarik untuk con- Penelitian lebih lanjut dengan tinue dengan tujuan fraksinasi dan memurnikan senyawa ditemukan Gambar 2. Pengaruh Konsentrasi berbeda hexanic, acetonic dan metanol ekstrak dari biji dari pepaya Carica pada Mortalitas pertama tahap larva Spodoptera frugiperda makan dengan makanan buatan Ditangani.

Halaman 5756 Okt 2011, VOL. 36 No 10 dalam biji yang diuji Culti- vars C. pepaya, dalam rangka Apakah Mereka terus belajar menjadi Efektif terhadap S. Frugi- perda dalam bentuk murni com- pon atau Campuran mereka, seperti telah Tampil dengan Campuran dari senyawa dari biji Maradol tersebut, Kuning dan Hawaii kultivar

(Figueroa-Brito et al, 2002a., B). Hal Apakah Juga Diperlukan untuk melaksanakan evaluasi ini Campuran dan murni senyawa di semi- lapangan dan dalam kondisi lapangan untuk Mendapatkan pengetahuan dasar dalam atau- der untuk Membangun mungkin mereka penggabungan ke-terpadu ed pengelolaan hama. Kesimpulan Heksana, aseton dan metha- nol ekstrak biji dari Maradol, Mammee dan Yel- rendah kultivar C. pepaya, Diikuti oleh ekstrak dari benih yang berbudaya Hawaii var, Terapan di Konsentrasi dari 10, 100 dan 1000 ppm, Apakah toksik pada S. frugiperda larva. The acetonic ekstrak dari Maradol dan Mammee Adalah kultivar di 10ppm PALING efektif. REFERENSI Abbot W (1925) Sebuah metode com- puting efektivitas suatu insektisida. J. Econ. Entomol. 18: 265-267. Aggarwal N, Brar DS (2006) Efek persiapan nimba yang berbeda dibandingkan dengan sintetis di- secticides pada whitefly parasitoid Encarsia sophia (Hyme- noptera: Aphelinidae) dan predator Chrysoperla carnea (Neuroptera: Chrysopidae) pada kapas di bawah kondisi laboratorium tions. J. Pest. Sci 79: 201-207. Alvarez CO, Neske A S Popich, Bardon A (2007) efek Beracun dari acetagenins Annonaceous dari Annona cherimolia (Magnoliales: Annonaceae) pada Spodoptera frugiperda (LEPI-

Spodoptera:. Noctuidae) J. Pestic. Sci 80: 63-67. Bahena JF, Sánchez M, Miranda MA (2003) Tanaman ekstrak dan bi- oplaguicidas, alternatif untuk memerangi "ulat grayak jagung "Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) Entomol.. Mex. 2: 366-372. Batista-Pereira LG, castrale TC, Da MTM Silva, Amaral BR, Fer- Nande JB, Vieira PC, Da Silva MFGF, Corrêa AG (2006) In- secticidal aktivitas sintetik amida pada Spodoptera Frugi- perda. Z. Naturforsch. 61C: 196-202. Blanco-Labra A, Aguirre MC (2002) Protein yang terlibat dalam mekanisme pertahanan dari tanaman. Universitas Guana- . juato Acta Univ 12: 3-28. Bogorni PC, Vendramim JD (2005) Encer subletal efek ex- saluran dari Trichilia spp. pada Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) pengembangan jagung. Neotrop. Entomol. 34: 311-317. Burton LR, Perkins WD (1987) Membesarkan earworm jagung dan jatuh ulat grayak untuk jagung tahan- dikan studi. Proc. Gejalanya mungkin. pada Metodologi untuk Mengembangkan- ing host Tanaman Resistensi terhadap Serangga Jagung CIMMYT.. Meksiko. hlm 35-37. Céspedes CL Calderon JS, Lina L, Aranda E (2000) Pertumbuhan- hibitory efek pada jatuh tentara- worm Spodoptera frugiperda beberapa limonoid terisolasi dari Cedrela spp. (Meliaceae). J. Agric. Makanan Chem 48: Dari 1903 ke 1908.

Del Rincon CMC, LJ Mendez, Ibarra JE (2006) Karakter- isasi strain asli Bacillus thuringiensis dengan ac- insektisida terhadap aktivitas ulat grayak Spodoptera frugiperda (LEPI- Spodoptera:. Noctuidae) Folia In- Tomol. Mex. 45: 157-164. Dyer LA, CD Dodson, Stireman-III JO, MA Tobler, Smilanich AM, Fincher RM, Letourneau DK (2003) Sinergis efek tiga Piper amida pada generalis dan spesialis herbivora. J. Kimia Ecol. 29: 2.499-2.514. El-Wakeil NE, NM Gaafar, Vidal S (2006) Efek samping dari beberapa mimba produk di alami Jan- panen Helicoverpa (Trichoderma gramma spp) dan. Chrysoperla carnea. Arch Phytopathol. Tanaman. Protec. 39: 445-455. Fernandez JL (2002) Perkiraan ekonomi ambang untuk Spodoptera frugiperda (JE Smith) (Lepidoptera: Noctuidae) jagung tumbuh Inv.. Agr. Protec Prod. Veg. 17: 467-474. Figueroa-Brito R (2002) Evaluasi ekstrak tanaman terhadap ulat grayak Spodoptera frugiperda Smith (Lepidoptera: Noctuidae) pada jagung. Tesis. Universitas Otonomi Nasional ma Meksiko. Mexico City Pp. 33-64. Brito Figueroa-R LM Road, Perez-Amador MC, Muñoz V, Bratoeff E, Labastida C (2002a) Komposisi asam lemak dan beracun aktivitas ekstrak acetonic dari Carica papaya L. (Caricace- ae) benih. Int J. Exp Bot. 69: 97-99. Figueroa-Brito R, Calderon PJS,

Perez-Amador MC, Muñoz V, RMC Hernandez Valdes EME, Aldana III (2002b) Keracunan dan efek penghambatan pertumbuhan ekstrak dan beberapa fraksi dari Carica papaya terhadap Spodoptera frugiperda (LEPI- Spodoptera:. Noctuidae) Rev Latin Noam. Quim. 30: 98-102. Figueroa-Brito R, Aldana BMPK Gutierrez OM, Lotina HB, DB Raja, Aguilar MI (2006) Biopestisida kegiatan ex- traktat tanaman terhadap Spo- Spodoptera frugiperda (Lepidoptera- tera: Noctuidae) Entomol.. Mex. 5: 677-681. Figueroa-Brito R, Valdes ME, Al- dana lll, Hernandez RMC, Gutierrez OM (2007) Kegiatan insektisida benih Pithecellobium dulce. Di JF Lopez-Olguin, Aragon GA, HC Rodriguez, GM Vazquez (Eds.) Pertanian Berkelanjutan: alami zat terhadap wabah. Berjasa Universitas Autonoma de Puebla / Universitas Graduate / Universitas Guadalajara. Meksiko. pp 136-141. Franco ASL, PA Jimenez, Luna LC, Figueroa-Brito R (2006) Pengaruh empat beracun benih Carica papaya varietas (Caricaceae) di Spodoptera fru- frugiperda (Lepidoptera: Noctui- dae). Folia Entomol. Mex. 45: 171-177. RR Garcia (2004) Efektivitas empat jenis bubuk Carica papaya (Caricaceae) terhadap Spodoptera frugiperda (Lepidoptera: Noctuidae). The- sis. Autonomous University of Guerrero. Iguala, Guerrero,

Meksiko. pp 18-20. Garcia-Rano H, Keleman A (2007) Krisis Jagung dan Torti- panggilan di Meksiko: Model atau Situasi? El Colegio de Meksiko. ANEC. November. 2007. Meksiko. Konno K, Hirayama F, Nakamura M, Tateishi K, Y Tamura, Hat- tori M, Kanno K (2004) Papain Prospek pepaya pohon membentuk herbivora serangga: peran Cys- Teine protease di Plant lateks. J. 37: 370-378. Lopez-Olguin JF (1994) Investig- asi zona pertanian mar- ginada Puebla negara. Elemen 3: 26-32. KL Mikolajczak, DK Reed (1987) Ekstraktif benih dari Melia- ceae: efek pada Spodoptera frugiperda (JE Smith), Aca- lymma vittatum (F.) dan Artemia salina Leach. J. Kimia Ecol. 13: 99-111. KL Mikolajczak, Zilkowski BW, Bartelt RJ (1989) Pengaruh me- biji ekstrak pada liaceous pertumbuhan dan kelangsungan hidup Spodoptera fru- frugiperda (JE Smith). J. Chem Ecol 15:. 121-128. Pingali PL, Pandey S (2001) Dunia jagung pertemuan kebutuhan: techno- Peluang dan prioritas logis ikatan untuk sektor publik. Di Pingali PL (Ed.) CIMMYT Jagung Dunia Fakta 1999-2000 dan Tren. Pertemuan Dunia Kebutuhan Jagung: Teknologi Op- kesempatan kerja dan Prioritas untuk Sektor Publik. CIMMYT. Mexi- co, DF Part 1, hal. 9. www.cimmyt.org / Penelitian / Ekonomi / map/facts_trends/maizeft9900 / html/maizeft9900_contents.htm. HC Rodriguez, JD Vendramim

(1996) Toksisitas ekstrak Meliaceae di air Spodoptera frugiperda (LEPI- Spodoptera:. Noctuidae) Man Integ. Hama 42: 14-22. HC Rodriguez, JD Vendramim (1997) memberikan Avaliação bioatividade Kutipan aquosos Melia- ceae on Spodoptera Frugi- perda (JE Smith). Rev Agric. 72: 305-318. HC Rodriguez, JD Vendramim (1998) Menggunakan indeks gizi tions untuk mengukur efek diekstrak sectistático Meliáceas on Spodoptera frugiperda. Man Integ. Hama 48: 11-18. H Schmutterer (1990) Properti dan potensi alam Pesti- CIDES dari pohon neem, Aza- dirachta ditunjukkan. Annu. Rev Entomol. 35: 271-97. SigmaStat (2004) SigmaStat ® 3.1., Software statistik. Jandel Sci- Scientific Software. San Rafael, CA, USA. Baja RAK, Torrie JH, Dickey DA (1997) Prinsip dan prosedur- dures Statistik dari biometrik Pendekatan kapur. McGraw-Hill. New York, Amerika Serikat. 165 hlm Torres A, Cotes L (2005) Pengaruh kriopreservasi terhadap viabilitas biocontrola stabilitas dan aktivitas- Dora Nomuraea rileyi terhadap Spodoptera frugiperda (LEPI- Spodoptera:. Noctuidae) Rev Kolonel Entomol. 33: 133-138. Torres P, Avila JG, Romo DA, Gar- Cia AM, Marin JC, Aranda E, Cespedes C (2003) Antioksidan Peraturan dan serangga pertumbuhan Kegiatan stilbenes dan mantan-

traktat dari Yucca periculosa. Fitokimia 64: 463-473. VRJ Trujillo Garcia leb (2001) Adat pengetahuan yang efektif obat tanaman untuk lokal sobre las plagas agrícolas en los altos de Chiapas, México. Agro- ciencia 35 : 685-92. Ware WG, Whitaker MD (2004) An introduction to insecticides. In Ware GW, Whitaker DM (Eds.) The Pesticide Book . 4 th ed. Thomson. Fresno, CA, USA. 496 pp.

Page 1Volume 54 (1) :1-14, 2010 Acta Biologica Szegediensis http://www.sci.u-szeged.hu/ABS REVIEW 1 School of Biosciences dan Teknologi, Vellore Institute of Technology University, Vellore, Tamil Nadu, India, 2 Amity Institute Bioteknologi, Amity Universitas Kampus, Noida, Uttar Pradesh, India, 3 Central Obat Standar Kontrol Organisasi, Timur Zone, Kolkata, Departemen Kesehatan dan Kesejahteraan Keluarga, Pemerintah India, India Kemajuan dalam biosintesis glikosida sianogen dan analisis pada tanaman: Review Deepak Ganjewala 1,2 *, Shiv Kumar 1,3 , Asha Devi S. 1 , Kumari Ambika 1 ABSTRAK Sejumlah spesies tanaman menghasilkan repertoar glikosida sianogen melalui skema umum biosintesis. Glikosida sianogen memainkan peran penting dalam organisasi kimia sistem pertahanan pada tumbuhan dan tanaman-serangga interaksi. Beberapa tanaman komersial tanaman seperti sorgum (Sorghum bicolor), singkong (Manihot esculenta) dan barley (Hordium vulgare) yang cyanogenic dan mengumpulkan sejumlah besar glikosida sianogen. Itu

studi biosintesis dhurrin di sorgum telah mendukung terobosan awal beberapa dalam penelitian glikosida sianogen. Meskipun banyak keanekaragaman struktural dalam cyanogenic glikosida, hampir semua dari mereka diyakini berasal dari hanya enam asam amino yang berbeda L-valin, L-isoleusin, leusin L-, L-fenilalanin, tirosin atau L-dan cyclopentenyl-glisin (non protein amino acid). Pengetahuan kita tentang biosintesis glikosida sianogen dan molekuler proses regulasi yang mendasari biosintesis mereka telah meningkat mengesankan di masa lalu beberapa tahun. Identifikasi cepat, karakterisasi dan kloning gen penyandi enzim dari yang biosintesis glikosida sianogen dan jalur katabolik dari beberapa tanaman telah sangat difasilitasi pemahaman kita tentang biosintesis glikosida sianogen dan regulasi. Hari ini adalah diketahui bahwa enzim dari jalur biosintesis glikosida sianogen di sorgum diorganisir sebagai Metabolon paling mungkin untuk orang lain jalur metabolisme sekunder. Pengetahuan negara seni biosintesis dan regulasi glikosida sianogen dimungkinkan metabolisme rekayasa jalur tersebut mengakibatkan pengembangan transgenik singkong, tembakau, teratai dan Arabidopsis dengan dimanipulasi konten glikosida sianogen. Bersamaan, banyak perkembangan baru telah disaksikan dalam metode / teknik / prosedur untuk mendeteksi cyanogenic glikosida di pabrik, makanan sampel dan bahan makanan. Tinjauan ini secara berurutan membahas semua masalah ini dengan informasi terbaru yang dikumpulkan dari laporan yang diterbitkan pada

cyanogenic glikosida. Acta Biol Szeged 54 (1) :1-14 (2010) KATA KUNCI Arabidopsis kromatografi cyanogenic glikosida sitokrom P450s dhurrin Metabolon metabolisme rekayasa transgenik Diterima 1 Juni 2010 * Sesuai penulis. E-mail: [email protected] 1 Lebih dari 2.600 spesies tanaman menghasilkan segudang cyanogenic glikosida (CGs), salah satu yang terbesar dan dipelajari secara ekstensif kelas metabolit sekunder tanaman (Moller dan Conn 1980; Poulton 1990, Conn 1991; Fleming 1999, Moller dan Seigler 1999; Vetter 2000; Zagrobelny et al. 2004). Kimia, CGs yang deÞned sebagai glikosida dari-hydroxynitriles; tanaman toko senyawa ini dalam vakuola (Fleming 1999; Vetter 2000). Sebagian besar keluarga tanaman menghasilkan CGs yang milik Angyospermatophyta dan sisanya ke dicotyledon- opsida dan Monocotyledonopsida (Vetter et al. 2000). Sev- tanaman eral penting tanaman yaitu, sorgum. (Sorghum bicolor) (Moller dan Conn 1980; Halkier dan Moller 1989, 1990), singkong (Manihot esculenta) (Andersen et al. 2000), barley (Hordium vulgare, Forslund dan Johnson 1997, Nielsen et al. 2002) antara lain yang pada dasarnya biosynthesize dan

CGs menumpuk. Beberapa bakteri dan sejumlah hewan terutama yang memakan tumbuhan juga mengandung cyanogenic CGs. [Lihat review byVetter (2000) untuk distribusi, fungsi, biosintesis dan analisis CGs pada tanaman]. Cyanogenic glikosida memiliki dampak yang besar pada biologi serangga juga. Za- Grobelny et al. (2004) telah rumit dibahas biosintesis dan degradasi CGS pada serangga menekankan peran mereka dalam tanaman-serangga interaksi. Mengenai biosintesis CGs, mereka berasal dari hanya enam asam amino yaitu L-valin, L-isoleusin, L-leusin, L-fenilalanin, tirosin atau L-dan dari non protein amino acid cyclopentenyl-glisin. Cyanogenic biosintesis glikosida telah dipelajari secara luas di banyak penting tanaman, sorgum (Sorghum bicolor; Moller dan Conn 1980; Halikar dan Moller 1989, 1990, Sibbesen et al. 1994; 1995, Koch et al. 1995, Jones et al. 1999), singkong (Manihot esculenta) (Andersen et al. 2000), pantai panah rumput (Triglochin maritimum, Nielsen dan Moller 1999; 2000) dan barley (Hordeum vulgare,. Nielsen et al 2002). Namun, biosintesis dhurrin suatu CGs diturunkan tirosin ditemukan di sor-

Halaman 22 Ganjewala et al. ghum telah relatif paling rumit dipelajari antara lain. Hari ini pengetahuan yang kita miliki tentang biosintesis dan

peraturan CGs pada tanaman sebagian besar telah dikumpulkan dari studi yang dilakukan di sorgum. Pada tumbuhan, CGs biosintetik jalur dapat diobati dengan suara bulat dalam tiga langkah (Gambar 1). Langkah-I: Sebuah asam amino prekursor diubah menjadi aldoxime melalui dua hidroksilasi N-turut kelompok amino orangtua asam amino oleh enzim sitokrom P450-keluarga. Langkah-II: aldoxime pada gilirannya diubah menjadi sianohidrin. Ini Reaksi dikatalisis oleh enzim lain sitokrom P450-. Langkah-III: cyanohydrins mendapatkan glikosilasi oleh enzim larut UDP-glukosiltransferase. Dalam sorgum, dua enzim sitokrom, dan CYP79A1 CYP71E1, rcatalyze langkah Þrst dan kedua masing-masing dan UDP-glukosiltransferase mengkatalisis langkah Þnal mengarah ke dhurrin biosintesis. Sebuah studi baru-baru ini telah menyarankan bahwa atas tiga enzim diatur sebagai Metabolon sehingga mengasuransikan suatu penyaluran efisien prekursor / substrat dan intermediet diperlukan untuk biosintesis dhurrin di sorgum (Nielsen et al. 2008). Sebelumnya, organisasi en- Zymes sebagai Metabolon dan penyaluran metabolik telah dengan baik didokumentasikan dalam biosintesis produk tanaman alami (Jorgensen et al. 2005). Dalam tanaman dan serangga, CGs mengalami proses katabolik akhirnya menimbulkan hidrogen sianida. Enzim,-glukosidase dan-hydroxynitrilases adalah re-

porting untuk mengkatalisis katabolisme CGs pada tanaman dan serangga (Vetter 2000;. Zagrobelny et al 2004). Dalam beberapa tahun terakhir, kemajuan luar biasa telah dibuat pada setiap aspek dari penelitian CGs, terutama pada identiÞca- tion dan karakterisasi gen penyandi enzim dari CGs biosintetik dan jalur katabolik cepat identiÞed dan ditandai dari tanaman cyanogenic banyak beberapa tahun terakhir tahun (Koch et al, 1995;. Hughes et al 1994;. Hasslacher et al. 1996, Trummler dan Wajant 1997; Bak et al. 1998; Andersen et al. 2000, Nielsen dan Moller 2000; Wang et al. 2004; lihat Tabel 2). Dengan gen kloning rekayasa, metabolisme jalur yang mengarah ke CGs telah menjadi lebih mudah, dengan menggunakan cDNA, transgenik tanaman dengan habis atau tingkat disempurnakan CGs telah dikembangkan (Bak et al, 2000;. Tattersall et al. 2001; Morant et al. 2003, 2007; Siritunga dan Sayre 2004a, b, Moller dan Bak 2005, Kristensen et al. 2005). Transgenik sianogen bebas menanam singkong menggunakan teknik RNAi memiliki telah dikembangkan (Siritunga dan Sayre 2004b). Sebelumnya, transgenik tanaman singkong dengan sianogen diabaikan adalah de- dikembangkan oleh penghambatan selektif biosintesis CGs di daun dan akar dengan ekspresi antisense dari gen CYP79D1/D2 fragmen (Siritunga dan Sayre 2004). Arabidopsis dan lotus tanaman telah berhasil direkayasa dengan memperkenalkan di

mereka sebuah biosintesis seluruh dhurrin jalur dari sorgum untuk menghasilkan dhurrin (Tattersall et al, 2001;.. Morant et al 2003, 2007; Kristensen et al. 2005). Namun, berbagai artikel di hampir setiap aspek Penelitian CGs tersedia, informasi tentang gen kloning dari CGs biosintesis dan katabolisme yang belum tersebar dan tidak tersedia di satu tempat. Tujuan utama saat ini Artikel ini adalah untuk memberikan informasi tentang gen kloning dari CGs biosintesis dan katabolisme. Selain itu, aspek lain dari CGs termasuk terjadinya mereka, fungsi dan biosintesis CGs berasal dari enam asam amino orangtua dengan penekanan yang diberikan kepada enzim, P450s sitokrom dan transferase glucosyl memiliki telah dibahas brießy. Akhirnya, kami telah memasukkan informasi- tion pada kemajuan teknis dalam metode analisis / deteksi CGs. Fungsi CGs pada tanaman Sejumlah besar CGs diproduksi di tanaman untuk menengahi kedua fungsi umum dan khusus. Bahkan, peran utama CGs dalam organisasi sistem pertahanan kimia dalam tanaman dan dalam interaksi plantÐinsect (Zagrobelnya et al. 2004). Lihat review oleh Zagrobelnya et al. (2004) untuk penjelasan rinci pada peran CGs di pabrik-serangga interaksi. CGs juga telah telah digambarkan sebagai senyawa penyimpan nitrogen (Forslund dan Jonsson 1997, Busk dan Moller 2002). Selain itu, mereka menawarkan

menjanjikan sebagai kemo-taksonomi calon (Vetter, 2000). Untuk herbivora yang spesialis pada tanaman mengandung- CNGs ing, mereka berfungsi sebagai phagostimulants (Gleadow dan Woodrow 2002). Bahkan produk degradasi, dari CGs tersebut as-cyanoalanine dilaporkan untuk melayani untuk mencegah predator. -Cyanoalanine yang memiliki aktivitas neurotoxin kuat adalah produk katabolik dari CGs dalam beberapa tanaman (Ressler et al. 1969). Dataset menunjukkan bahwa upaya untuk menetapkan peran biologis speciÞc untuk glukosida cyanogenic mungkin tidak bermakna. Fungsi bervariasi tergantung pada jenis tanaman, ekosistem, dan abiotik dan biotik faktor stres. Accord- ingly, hanya percobaan Þeld cermat dan ekstensif dapat memutuskan L - Amino ac id Aldox imes H ydrox ynitrile C ya nogenic G LYC os ide s C ytoc hrom EP 4 5 0 C ytoc hrom EP 4 5 0 U DP-gluc os yltra ns fe ra se I - P ha se II - P ha se III - P ha se Gambar 1. Skema Umum biosintesis glikosida sianogenik pada tanaman.

Page 33 Cyanogenic glikosida: biosintesis dan analisis yang Þtness keseluruhan tanaman singkong acyanogenic (Jorgensen et al. 2005). Biosintesis CGs

Biosintesis CGs telah dipelajari di sejumlah tanaman termasuk sorgum (Sorghum bicolor), singkong (Manihot esculenta), pantai panah rumput (Triglochin maritimum), dan barley (Hordeum vulgare, Koch et al, 1995;. Jones et al. 1999, Nielsen dan Moller, 1999; Andersen et al. 2000; Nielsen et al. 2002, Forslund et al. 2004). Berdasarkan Laporan CGs semua diyakini disentesis dari satu dari enam asam amino, L-valin (L-Val), L-isoleusin (L-Ile), L-leusin (L-Leu), L-fenilalanin (L-Phe) atau L-tirosin (L-Tyr) dan cyclopentenyl-glisin (cyclopentenyl-Gly). Beberapa studi sebelumnya menggunakan berlabel prekursor asam amino di sejumlah tanaman telah mengungkapkan integrasi ketat biosintesis asam amino dengan CGs pada tanaman (Vetter 2000). Yang paling rumit CGs dipelajari adalah dhurrin, yang disentesis di pabrik sorgum. Hari ini, semua rincian sur- pembulatan dhurrin biosintesis dan regulasi di sorgum tersedia termasuk, gen kloning dan ditandai, intermediet dan enzim yang terlibat dalam biosintesis nya. Dua sitokrom-P450s enzim, CYP79A1 dan CYP71E1 dan sebuah UDP-glukosiltransferase (UGT85B1) yang terlibat dalam biosintesis dari dhurrin di sorgum telah diisolasi dan ditandai. Bersamaan dengan CGs, tanaman juga menghasilkan glucosides nitril tapi biosintesis mereka pada tanaman adalah kurang dipahami.

Peran P450senzymes sitokrom di CGs biosintesis Sitokrom-P450s adalah enzim-enzim yang sangat baik ditandai, ubiquitously muncul di banyak tanaman dan spesies hewan dan memainkan peran penting dalam jalur biokimia banyak. Mereka memiliki kemampuan untuk mengkatalisis berbagai reaksi biokimia melalui C-hidroksilasi dan epoksidasi, N-dan S-oksidasi, de- hydrations, dan O-, N-dan S-de-alkilasi (Zagrobelny et al. 2004). Banyak sitokrom-P450s terkait dengan biosyn- tesis terpenoid, phenylpropenes mudah menguap, mudah menguap berasal asam lemak, hormon tanaman (giberelin), Brassinosteroids, ecdysteroids dikenal (Dudereva et al 2004;. Fischbach dan Clardy 2007). Hingga sampai saat ini sekitar 800 sitokrom-P450s urutan yang terdiri dari 53 keluarga diketahui dari tanaman. Setidaknya dua sitokrom P450s enzim mengkatalisis Þrst tersebut dua dedicated langkah biosintesis CGs. Þrst komit- ted langkah konversi asam amino untuk orang tua aldoximes dikatalisis oleh sitokrom P450--I. Dalam dedicated berikutnya aldoximes langkah yang diubah menjadi sianohidrin oleh aksi sitokrom P450--II. Beberapa sitokrom-P450s enzim dari tanaman yang terkait dengan biosintesis CGs yang berbeda memiliki telah diisolasi dan dikarakterisasi (Koch et al, 1995;. Kahn et al. 1997; Bak et al. 1998, Nielsen dan Moller, 1999, 2000, Zhang et al. 2003, Andersen et al. 2000; Forslund et al. 2004). Salah satu

yang Þrst sitokrom-P450s ditandai dan sequencing adalah sitokrom-P450tyr dari sorgum yang mengkatalisis con- versi L-tirosin ke Zp-hidroksi-phenylacetaldoxime langkah berkomitmen Þrst dari jalur biosintesis dhurrin. Sitokrom-P450tyr diakui sebagai anggota Þrst dari baru keluarga sitokrom P450-dan diberi nama CYP79 dan sekarang CYP79A1 (Koch et al, 1995;. Sibbesen et al 1995.). Juga, sitokrom-P450tyr adalah membran Þrst terikat multifungsi enzim diisolasi dari tanaman. Sebuah membran- terikat sitokrom P450-N-hydroxylases jenis namun dikenal dari hewan dan ragi yang memiliki substrat yang luas speciÞcity mengkatalisis hidroksilasi dari berbagai xenobiotik. Berbeda dengan sitokrom-P450s N-hydroxylases jenis, sitokrom P450tyr adalah substrat enzim yang speciÞc hydroxylates substrat endogen hanya tunggal, tirosin (Koch et al, 1995;. Sibbesen et al 1995.). TodayseveralcytochromeP450sareknown, twoCYP79D1 dan CYP79D2 dari singkong (Zhang et al 2003;. Andersen et al. 2000) dua lainnya CYP79D3 dan CYP79D4 dari lotus (Forslund et al 2004.) Dan satu CYP79B1 dari Sinapis alba. Para cytochromeP450s, CYP79D1 dan CYP79D2 mengkatalisis dua langkah Þrst berkomitmen dalam biosintesis linamarin dalam singkong sementara CYP79D3 dan CYP79D4 merupakan enzim kunci

dalam biosintesis glukosida cyanogenic (lotaustralin dan linamarin) dan nitril glukosida (rhodenosydes A dan D) dalam tanaman teratai. Di atas sitokrom-P450s dari sorgum, singkong dan teratai adalah serupa dalam struktur dan fungsi- tion. Urutan analisis keselarasan telah mengungkapkan homologi antara lotusÕs CYP79D3 dan CYP79A1 dari sorgum dan di antara CYP79D4 teratai dan CYP73E1 dari sorgum (Szczyglowski et al, 1997;. Forslund et al 2004.). Namun, cassavaÕs CYP79D1 dan CYP79D2 ditampilkan urutan 54% kemiripan dengan CYP79A1 dari sorgum. Demikian pula, CYP79B1 dari S. alba juga menunjukkan kesamaan urutan 54% (dengan 73% mencetak kesamaan) untuk CYP79A1 dari sorgum namun CYP79B1 menunjukkan kesamaan urutan 95% menjadi CYP79B2 ofArabidopsis (Bak et al. 1998). Juga, sitokrom-P450s sangat speciÞc substrat dan hanya menggunakan satu asam amino sebagai substrat. Dalam CGs diberikan biosyn- Thetic jalur, sitokrom P450-I, satu, yang mengkatalisis langkah berkomitmen Þrst relatif memiliki substrat lebih tinggi speciÞcity dari sitokrom P450-II yang memiliki luas sub- maksud menunjukkan speciÞcity. Misalnya, di sorgum CYP79A1 terlibat dalam biosintesis dhurrin sangat suka tirosin sebagai substrat sementara CYP71E1 memiliki substrat yang lebih luas Speci- Þcity. CYP71E1 ini secara luas dapat hydroxylate para aldoximes

berasal dari fenilalanin, dan valin / atau isoleusin dalam iklan- dition kepada mereka berasal dari tirosin (Celenza et al. 2001). The CYP79 jelai, bagaimanapun, adalah identik dengan CYP79A1 dan CYP79E1 dari sorgum tapi lebih suka leusin sebagai substrat dan tidak tirosin tersebut. Analog dari CYP71E1 hadir di T. maritima menunjukkan minat kurang dalam aldoximes sebagai substrat jika berasal

Page 44 Ganjewala et al. dari fenilalanin (p-hidroksi-phenylacetonitrile). Di Lotus japonicum, dua P450s sitokrom, CYP79D3 dan CYP79D4 hampir identik (95%) telah menunjukkan pilihan yang berbeda untuk asam amino sebagai substrat, CYP79D3 untuk L-isoleusin dan CYP79D4 untuk L-valin. Dalam singkong, sebaiknya CYP79D1 memilih L-valin sebagai substrat dan tidak L-isoleusin sub- maksud menunjukkan pilihan untuk CYP79D3 teratai. Beberapa lainnya substrat speciÞc sitokrom-P450s akting pada valin, leusin dan tirosin telah dilaporkan dari rumput panah pantai (Tri- glochin maritima) dan singkong (Manihot esculenta; Nielsen dan Moller 1999, Andersen et al. 2000). Keragaman besar dalam struktur CGs pada tanaman telah dikaitkan baik dengan speciÞcity substrat dari Þrst cyto- krom-P450s serta luas speciÞcity substrat dari kedua sitokrom-P450s. Mungkin, langkah kedua dikatalisis

oleh cytochromeP450-II diperkirakan menjadi sumber keanekaragaman dalam struktur CGs. Misalnya sitokrom CYP79A1 di sorgum dilakukan tiga kali berturut-turut N-hydroxylations dari tirosin asam amino (Moller dan Seigler 1999). Namun, di barley, hydroxylations dari 3-methylbutyro-nitril intermediate- makan, dilakukan oleh sitokrom CYP71E mengakibatkan hydroxynitiriles sesuai dengan Þve glucosides siano yang berbeda (Moller dan Seigler 1999). Mengikat ganda dan ßexible posisi 3-methylbutyro-nitril dalam situs aktif dari CYP71 monooxygenases memungkinkan enzim untuk melaksanakan tambahan hydroxylations pada atom karbon tetangga serta untuk melaksanakan hydroxylations berturut-turut pada dua atau tiga atom karbon lain diikuti oleh reaksi dehidrasi (Nielsen et al. 2002). Baru-baru ini, Watanabe et al. (2007) telah menjelaskan kemo-dan regioselectivity dari monooxygenases setelah penyelidikan dari oksidasi asiklis beberapa monoterpen oleh P450 di BM-3 dan mutan nya. Fischbach dan Clardy (2007) juga telah disukai modiÞca-oksidatif tions dikatalisis oleh empat monooxygenases sitokrom P450 untuk keragaman struktural giberelin. Hal ini masuk akal bahwa tanaman cyanogenic mungkin telah mengadopsi strategi yang sama dari diversiÞcation melalui pos-aldoxime hidroksilasi oleh sitokrom-P450s mengakibatkan keragaman struktural dalam CGs.

Peran UDP-GLC glukosiltransferase di CGs biosintesis UDP-GLC glucosyltransferases mengkatalisis langkah ketiga dari CGs biosintesis. Mereka sangat dihargai karena enzim untuk peran mereka dalam biosintesis berbagai primer dan metabolit sekunder pada tanaman (Vogt dan Jones 2000). Reaksi dasar dikatalisis oleh enzim ini adalah transfer dari gugus gula dari molekul donor diaktifkan untuk speciÞc akseptor molekul, membentuk ikatan glikosidik. CAZy The database (Karbohidrat Enzim Aktif) memberikan con- menerus diperbarui classiÞcation dari glycosyltransferases menggunakan nukleotida diphospho-gula, nukleotida monophospho-gula dan gula fosfat (EC 2.4.1.x) dan protein yang terkait dalam berbeda urutan berbasis keluarga. Pada tumbuhan sianogenik glutathione- cosyltransferase Melakukan glucosylation dari sianohidrin (Þnal langkah dalam biosintesis CGs) untuk menghasilkan CG yang berbeda. A L-Tyro SINE N-hidroksi-tirosin N, N-hidroksi-tirosin p-hidroksifenil acetaldoxime p-hydroxymandalonitrile TAXIPHYLLIN (E)-p-hidroksifenil acetaldoxime (Z)-p-hidroksifenil acetaldoxime CYP79E! OR CYP79 E2 CYP7 3E1 Homolog UGT85B1 p-hydroxymandalonitrile TRIGLOCHININ

O 2 + NADPH NADP + L-Tirosin N-hidroksi-tirosin N, N-hidroksi-tirosin p-hidroksifenil acetaldoxime p-hydroxymandalonitrile TAXIPHYLLIN (E)-p-hidroksifenil acetaldoxime (Z)-p-hidroksifenil acetaldoxime CYP79E! OR CYP79 E2 CYP7 3E1 Homolog UGT85B1 p-hydroxymandalonitrile TRIGLOCHININ O 2 + NADPH NADP + Gambar. 2a Skema biosintesis L-tirosin cyanogenic berasal. glikosida, dhurrin di Sorghum bicolor. Gambar 2b Skema biosintesis L-tirosin cyanogenic berasal. glikosida, taxiphyllin dan triglochinin di Triglochin maritim.

Halaman 55 Cyanogenic glikosida: biosintesis dan analisis larut UDP-GLC-glukosiltransferase (UGT85B1) katalis glucosylation p-hidroksi-mandelonitrile pada langkah Þnal dari dhurrin biosintesis di sorgum telah diisolasi dan ditandai (Jones et al, 1999;. Kahn et al 1999;. Thorsoe

et al. 2005). Tirosin berasal CGs CGs beberapa yaitu, dhurrin, triglochinin, taxiphyllin, holocalin. dan vicianin berasal dari L-tirosin. Studi biosynthesis dari dhurrin (p-hidroksi-(S)-mandelonitrile-lD-glukosida) di Sorghum bicolor telah memberikan wawasan lebih dalam tirosin berasal CGs (Koch et al, 1995;. Sibbesen et al 1995;. Kahn et al. 1997; Bak et al. 1998; Neilsen et al. 2007). Jalur A (Gambar 2a) yang mengarah ke dhurrin biosintesis di sorgum telah sepenuhnya dijelaskan (Sibbesen et al 1994;. 1995; Koch et al. 1995). Biosintesis dhurrin dimulai dengan konversi L-tirosin ke Zp-hidroksifenil acetaldoxime katalis oleh enzim CYP79A1. The CYP71E1 selanjutnya enzim kemudian mengkatalisis konversi Zp-hidroksifenil acetaldoxime ke sianohidrin, p-hidroksi-mandelonitrile (Koch et al. 1995, Sibbesen et al. 1995, Kahn et al. 1997; Bak et al. 1998). Namun, sejumlah intermediet yang tidak biasa dan labil seperti sebagai N-hydroxyamino acid, N, N-dihydroxyamino asam, E- dan Z-oximes dan sianohidrin yang juga diproduksi selama intermediet biosynthesis.These dhurrin, kecuali Z-oksim yang efÞciently disalurkan untuk pembentukan dhurrin maka bisa tidak terjebak (Moller dan Conn 1980; Sibbesen et al 1995.; Kahn et al. 1997, Kristensen et al. 2005). Kedua CYP79A1 dan CYP71E1 adalah membran terikat multi-fungsional sitokrom

P450s dan melakukan enam dari tujuh langkah dalam sintesis dhurrin dengan (Z)-p-hydroxyphenylacetaldoxime sebagai inter-enzymatic menengah (Morant et al. 2003). Pada langkah Þnal dari jalur, yang labil p-hidroksi-mandelonitrile stabil oleh glucosylation melalui larut UDP-glukosiltransferase UGT85B1 untuk menghasilkan dhurrin (Jones et al, 1999;. Kahn et al. 1999; Thorsoe et al. 2005; Gambar. 2a). Sebuah jalur yang sama dengan mengubah sitokrom-P450s adalah digunakan oleh semua tanaman lain untuk biosintesis tirosin lainnya berasal CGs, seperti triglochinin dan taxiphyllin (Gambar 2b). Cabang-cabang jalur off dari sudut pembentukan p-hidroksi-phenylacetonitrile. Titik cabang intermediate- makan p-hidroksi-phenylacetonitrile mengarah ke taxiphylin dan triglinin di T. maritim, linustatin dan neolinustatin di Linum usitatissimum, linamarin dan lotaustralin di Trifolium repens L. (Nielsen dan Moller 1999) dan linamarin di Manihot esculenta Crantz (Nielsen dan Moller 1999;. Koch et al 1992). Phenylalanne diturunkan CGs Fenilalanin samping nenek moyang CGs banyak, juga melayani sebagai prekursor untuk biosintesis metabolit sekunder seperti sebagai ßavonoids (Celenza, 2001;. Bennett, et al 1997). Beberapa yang penting CGs berasal dari L-fenilalanin termasuk prunasin (suatu glikosida sianogenik aromatik), acacipeta- lin, proacacipetalin, 3-hydroxyheterodendrin, sambunigrin,

amygdalin, (R)-vicianin, zierin, epilucumin dan zierinxylo- sisi. Namun, hanya sedikit yang diketahui tentang biosintesis dan peraturan CGs berasal fenilalanin pada tanaman kecuali biosintesis prunasin di Carica papya. Carica papaya bersamaan biosynthesizes glucosinolates (benzylglu- cosinolate) dan cyanogenic glucosides (prunasin) menggunakan L-P HE NY L AL A NIE NI Benzyl-aldoxime Hidroksinitril PRUNASIN Monox ygenas e CYP 71E 1? U DP-GT Beberapa langkah L-leucine Z-3-methylbutanaloxime t CYP79 UDP-GT Z-3-methylbutyro nitril CYP71E1 Sutherlandin Epidermin dihidro-osmaronin Osmaronin Epiheterodendrin ? ? ? Hydroxy-nitril Subsequenthydroxylations di ? ? ? Posisi Gambar 3. Skema biosintesis L-fenilalanin yang berasal cyanogenic glikosida, prunasin di Carica papaya. Gambar 4. Skema biosintesis L-leucine berasal cyanogenic glucosides di Hordium vulgare.

Halaman 66 Ganjewala et al. umum biokimia jalur. Dalam C. pepaya, sitokrom-

P450 (monoxygenase) mengkatalisis langkah khusus dari Þrst konversi L-fenilalanin ke benzylaldoxime dalam biosintesis prunasin (Bennett et al, 1997;.. Gambar 3). Itu sitokrom P450-monoxygenase adalah salah satu dari tiga yang berbeda enzim (ßavoprotein, sitokrom P450 MOS, dan peroxi- dases) terlibat dalam pembentukan aldoximes dari amino asam pada tumbuhan. Selain C. pepaya, spesies Brassica telah dilaporkan untuk menghasilkan glucosinaolates, mirip dengan C. papaya. Namun, pengetahuan kita mengenai biosintesis tersebut dari glucosinolates pada tanaman sangat miskin tetapi telah menjadi jelas bahwa dalam glucosides nitril, gugus hidroksil dan nitril yang tidak terkait dengan atom karbon yang sama aglikon tersebut. Juga, hidrolisis nitril glucosides oleh-glukosidase tidak menghasilkan HCN rilis (Forslund et al. 2004). Leusin diturunkan CGs Leusin diturunkan CGs, sutherlandin, epidermin, osmaronin, dihidro-osmaronin dan epiheterodendrin telah dilaporkan dari bibit barley (H. vulgare) (Nielsen et al. 2002). Dalam barley, biosintesis CGs sangat terkotak, di satu kompartemen (jenis jaringan) biosintesis hasil CGs; CGs sehingga dihasilkan diakumulasikan dalam kompartemen lain dan mereka menjalani katabolisme di kompartemen lain di mana enzim-glukosidase mulai degradasi CGs (Gbr. 4).

Sesuai skema umum biosintesis CGs, di barley juga, langkah didedikasikan Þrst dikatalisis oleh homolog CYP79 sebagai akibat dari mana L-leusin diubah menjadi Z-3-methylbutanaloxime. The antara resultan, Z-3-methylbutanaloxime kemudian dalam dua reaksi berturut-turut dikatalisis oleh suatu homolog CYP71E dikonversi ke sianohidrin melalui nitril senyawa sebagai perantara (Nielsen et al. 2002). Dalam Langkah Þnal, nitril yang glikosilasi oleh UDP-glucosyl transferase yang kemudian menghasilkan CGs (Gbr. 4). Hal ini melaporkan bahwa pada barley Homolog CYP71E hydroxylates 3-methylbutyro-nitril menengah di karbon atom. Mengikat posisi ganda dan ßexible dari 3-metil- butyro-nitril dalam situs aktif dari monooxygenase CYP71 memungkinkan enzim untuk melaksanakan hydroxylations tambahan pada atom karbon tetangga serta di dua atau tiga lainnya atom karbon. Hidroksilasi bersama dengan dehidrasi Reaksi menyediakan mekanisme untuk menjelaskan bersamaan dengan generasi hydroxynitiriles sesuai dengan Þve berbeda CGs dalam bibit barley (Nelsen et al. 2002). Valin dan isoleusin diturunkan CGs Glikosida sianogenik linamarin dan lotaustralin ditemukan di Spesies Lotus diyakini disentesis dari valin dan isoleusin (Moller dan Seigler 1999;. Gambar 5). Dalam sebagian besar spesies dari Lotus, linamarin dan lotaustralin adalah biosynthe- berukuran sama dengan glukosida nitril, seperti rhodiocyanoside

A, D dan rhodiocyanoside (Gebrehiwot dan Beuselinck 2001; Andersen et al. 2000). Penelitian sebelumnya dengan radio berlabel valin pada spesies Lotus telah mengungkapkan bahwa petioles, pelepah daun, dan apeks pucuk yang paling aktif dalam sintesis linamarin (Bediako et al. 1981). Penelitian lebih lanjut dengan radio substrat berlabel L-isoleusin dan valin-L mengindikasikan bahwa linamarin berasal dari L-valin sementara lotaustralin dan nitril glucosides rhodiocyanosideA, dan rhodiocyanoside D berasal dari L-isoleusin (Forslund et al 2004.). Kemungkinan besar, spesies Lotus juga menggunakan biochemi-umum kal jalur untuk biosintesis CGs atas dan nitril glukosida. Dalam spesies Lotus, yang Þrst langkah dua berkomitmen konversi L-valin dan L-isoleusin untuk mereka sesuai- ing oximes dikatalisis oleh dua enzim sitokrom-P450s CYP79D3 dan CYP79D4, masing-masing (Forslund et al. 2004; Gambar. 5). Tidak seperti orang lain, spesies Lotus menggunakan dua terpisah dan jalur biokimia independen yang terletak di akar dan udara bagian untuk biosintesis CGs. Dua jalur telah terpisah CYP79 enzim yang mengekspresikan diferensial dalam akar dan bagian udara, CYP79D3 eksklusif dinyatakan dalam udara bagian sementara CYP79D4 di akar (Forslund et al. 2004). Gambar 5. Skema biosintesis L-valin dan L-isoleusin glukosida cyanogenic diturunkan, linamarin dan lotaustralin dan nitril glutathione-

cosides, rhodiocyanoside A dan D di japonicus Lotus. L-valin (E)-2-methylpropanal oksim (Z)-2-methylpropanal oksim L-IS EUCINE OL (E)-2-methylbutanal oksim (Z)-2-methylbutanal oksim Hidroksinitril Linamarin Rhodiocyanoside A Lotaustralin Rhodiocyanoside D Hydroxynitriles CYP 7 9 D4 CYP 7 9 D3 P u ta tiv e CYP 7 1 E 1 O r th o log P u ta tiv e UGT 8 5 B O r th o log

Page 77 Cyanogenic glikosida: biosintesis dan analisis Juga enzim berbeda dalam sifat katalitik yang menghalangi- menambang glikosida proÞles cyanogenic di lotus. Urutan analisis asam amino menunjukkan kesamaan 94% antara CYP79D3 dan CYP79D4 kesamaan namun sedikit antara mereka diamati di wilayah promotor (Forslund et al. 2004). Meskipun tingkat tinggi kesamaan urutan, dan CYP79D3 CYP79D4 telah menunjukkan speciÞcity substrat. CYP79D3 The di L. japonicus telah menunjukkan afÞnity kuat untuk L-isoleusin sebagai substrat sedangkan CYP79D4 L valin-pilihan sebagai substrat untuk biosintesis linamarin.

Dalam beberapa kasus seperti di Lotus dan spesies Brassica di addi- tion untuk CGs, glucosides nitril yang disentesis menggunakan umum prekursor dan jalur CGs (Lechtenberg et al. 1996, Nielsen et al. 2002, Forslund et al. 2004). Dalam lotus spesies, glucosides nitril yaitu rhodiocyanoside A dan D berasal dari prekursor L-isoleusin yang juga merupakan prekursor untuk CGs, bagaimanapun, biosintesis kelas ini senyawa masih belum pasti. Dalam beberapa tahun terakhir, biosintesis glikosida CGs dan nitril di L. japonicus telah ex- ekstensif dipelajari dengan tujuan untuk mengembangkan sebagai model sistem untuk memahami biosintesis seiring CGs dan nitrile glikosida pada tanaman (Handberg dan Stougaard, 1992; Asamizu et al. 2000, Nakamura et al. 2002, Perry et al. 2003). Saat sequencing, cDNA dan genomik dalam L. japonicus sedang berlangsung di Kazusa DNA Research Institute (http:// www.kazusa.or.jp / en / database.html) dan akan tersedia segera. Urutan genom dapat mendukung beberapa awal terobosan dalam CGs dan biosintesis nitril glukosida dan regulasi pada tanaman. Molekul biologi dan metabolik rekayasa biosintesis CGs Pengkodean gen enzim biosintesis CGs dan degradation telah diisolasi cepat kloning dan ditandai dalam beberapa tahun terakhir (Tabel 2). Dalam kasus sorgum, semua gen penyandi enzim biosintesis dhurrin telah

terisolasi, kloning, dan ditandai (Nielson et al. 2008.). Selain, daftar termasuk gen untuk sitokrom-P450s, UDP- glucosyltransferases, sintase cyanoalanine, hidroksinitril layases, glukosidase, rhodenases dan hidrolase vicianin. Itu gen kloning (cDNA) adalah alat yang sangat baik dalam biologi molekuler dan digunakan untuk memperoleh pemahaman tentang peraturan-molekul tory proses yang mendasari jalur biosintesis mengarah ke berbagai produk. Pengetahuan yang mendalam seluruh peraturan mekanisme sangat penting untuk rekayasa metabolisme con- bersangkutan biosintesis jalur. Dalam cara yang sama, memiliki cDNA sangat memfasilitasi pemahaman kita tentang regulasi molekul biosintesis CGs serta rekayasa metabolisme yang biosintesis CGs jalur pada tanaman acyanogenic. Metabolik rekayasa jalur biokimia valu- produk tanaman mampu berkembang pesat misalnya modi- Þcation warna ßower, peningkatan sintesis lignin oleh down-regulasi dan produksi farmasi berguna sekunder metabolit. Ada laporan yang tersedia di SUC- cessful metabolik rekayasa CGs dan pengembangan transgenik tanaman. Ketersediaan gen kloning (cDNA) dari jalur CGs dan pengetahuan yang lebih dalam dari proses regulasi telah sangat diperlukan dalam rekayasa metabolisme CGs biosintesis pada tanaman bernilai komersial. Dalam beberapa tahun terakhir, menggunakan rekayasa metabolisme sitokrom P450-enzim,

transgenik singkong dengan CGs habis, Arabidopsis thaliana memproduksi CGs, dan L. japonicus dengan diubah sianogenik Isi cyanoalkenyl atau glukosinolat telah sukses- sepenuhnya dikembangkan (Tattersall et al, 2001;. Morant et al 2003,. 2007; Kristensen et al. 2005). Utama tujuan rekayasa metabolik Biosintesis CGs adalah untuk menghasilkan varietas CGs bebas dari tanaman dan transgenik tanaman seperti Arabidopsis dengan diubah atau meningkatkan produksi CGs. With the above objectives, CGs content in cassava, sorghum, barley, lotus, tobacco and Ara- bidopsis have been manipulated using metabolic engineering (Tattersall et al. 2001; Morant et al. 2003, 2007; Kristensen et al. 2005). Based on the reports on genetic engineering of the CGs, mainly two strategies have been used for engineering of CGs pathways. According to the Þrst strategy, a gene encoding enzyme of CGs pathway along with a promoter is introduced into non-cyanogenic plants. Second strategy utilizes RNAi technique for development of transgenic plants with altered or enhanced levels of cyanogenic glycosides. Jor- gensen et al. (2005) have used RNAi technique for developing transgenic cyanogen free cassava plants ( Manihot esculenta Crantz, cv MCol22). The RNAi was used to block expression of CYP79D1 and CYP79D2 the two key genes encoding the Þrst committed enzymes in linamarin and lotaustralin synthe-

sis. On the other hand, Siritunga and Sayre (2004b) generated transgenic cassava by selective inhibition of CGs biosynthesis in leaves and roots by antisense expression of CYP79D1/ D2 gene fragments. Selectively inhibition of these genes in leaves resulted in transgenic plants with largely reduced (60- 94% reduction) linamarin content while the inhibition of same set of genes in roots has drastically reduced (99%) linamarin content in resultant transgenic plants. Previously, transgenic cassava plants were generated by over-expression (13-fold) of hydroxynitrile lyase (HNL) using a double 35S CaMV promoter (Siritunga et al. 2004a). This strategy was based on the fact that over expression of hydroxynitrile lyase (HNL) will accelerate cyanogenesis and cyanide volatilization during food processing thereby reducing cyanogen toxicity in cassava foods. HNL catalyze the conversion of acetone cyanohydrin to cyanide. Unlike previous transgenic cyanogen free cassava, transgenic plants over-expressing HNL in roots retain the herbivore deterrence of cyanogens while providing a safer food product. Arabidopsis plants are promising in metabolic engineering of CGs. The Þrst transgenic Arabidopsis producing p- hydroxybenzylglucosinolate was developed by introducing

Halaman 88

Ganjewala et al. CYP79A1 from Sorghum bicolor (Bak et al. 1999). The ability of CYP79A1 to integrate itself in to cyanogenic glycoside pathway is important for its implications in genetic engineering of CGs (Bak et al. 1999). Later, Bak and associates (2000) have developed transgenic tobacco and Arabidopsis plants expressing two multifunctional cytochrome-P450s, CYP79A1 and CYP71E1 of sorghum. These transformed plants were cyanogenic accumulating metabolites derived from intermediates in dhurrin biosynthesis.As a most recent development in transgenics CGs plants, two transgenic plants A. thaliana and L. japonicus have been developed by introducing entire dhurrin biosynthetic pathway from sorghum (Morant et al. 2003, 2007; Kristensen et al. 2005). In transgenic A. thaliana plant dhurrin content was recorded 4% (w/w) of leaf dry-weight. Ectopic expression of CYP79D2 from cassava ( Manihot esculenta Crantz.) in L. japonicus has been resulted in a 5- to 20-fold increase of linamarin content, whereas the relative amounts of lotaustralin and rhodiocyanoside A/D remained unaltered (Forslund et al. 2004). Catabolism of CGs In plants, CGs undergoes catabolic pathways for their complete degradation into hydrogen cyanide (HCN). Enzim -glucosidases and -hydroxynitrile lyases are the most

important enzymes of catabolic pathways in plants (Conn 1980; Hosel and Conn 1982; Poulton 1990; Fig. 6). En- zyme -glucosidase hydrolyzes CGs to the corresponding -hydroxynitriles, which then dissociates spontaneously into a sugar, a keto- compound, and HCN if pH value is above 6. At lower pH, -hydroxynitriles did not dissociate spontaneously but an enzyme -hydroxynitrile lyase may catalyze its dissociation. Hydrogen cyanide, the Þnal product of dissociation of -hydroxynitriles then detoxiÞed via two separate routes (Zagrobelny et al. 2004). The Þrst route in- volves the formation of -cyanoalanine from cysteine and is catalyzed by -cyanoalanine-synthase (Fig. 6). Selanjutnya, -cyanoalanine is converted into asparagine (Miller and Conn 1980). This route seems to be most common in plants and possibly in insects also. The second route proceeds by conversion of HCN into thiocyanate and is catalyzed by rhodanese (Bordo and Bork 2002; Fig. 6). Vertebrates predominantly utilizes thiocyanate route, however some plants and insects are also reported to use this route. Genes encoding some of the enzymes of CGs catabolic- pathways have been cloned and characterized (Table 1). Di plants, -hydroxynitrile lyase are located in the tissues where -glucosidases are present though their activity is observed in

protein bodies (Swain et al. 1992), instead of in chloroplasts or apoplastic space as typically reported for -glucosidases (Hickel et al. 1996). -glucosidase and -hydroxynitrile lyase that begins the cleavage of CNGs are localized in chloroplasts or apoplastic space in plants (Conn 1980; Hosel and Conn 1982; Poulton 1990). -glucosidase has capability to recog- nize the aglycone moiety of CGs present within the plant species (Hosel et al. 1987; Hosel and Conn 1982; Nahrstedt 1985), on the other hand, -hydroxynitrile lyases have shown the activity in protein bodies (Swain et al. 1992). -cyanoalanine synthase of mitochondria detoxifies HCN in pyridoxal phosphate (PLP) dependent reaction and produce -cyanoalanine. The process is beneÞcial both ways as the detoxification of HCN prevents the mitochondrial degradation from the vulnerable attack of HCN, the resulted detoxiÞcation product -cyanoalanine serve to deter preda- tors (Ressler et al. 1969). Rhodanase is also proposed to be an enzyme involved in cyanide detoxiÞcation (Beesley et al. 1985) which is evidenced by high levels of rhodanase activity in 3-day-old etiolated Sorghum bicolor seedlings (Miller and Conn 1980). Rhodanese perhaps is not a common enzyme in plants but it is associated with sulfonation of proteins (Bordo and Bork 2002). Detection of CGs

Several chromatographic procedures have been described for the qualitative and quantitative detection of CGs in plant samples, previously (Brimer et al. 1981; 1983; Brimer and Dalgaard 1984; Brimer and Molgaard 1986; Brimer 1988) (Tabel 3). Curtis et al. (2002) have described a new method to simultaneously detect cyanide and carbonyl compounds arising from CGs in plants. A portable gas chromatograph housing two detectors using a single carrier gas is employed to measure the carbonyl compound (photoionization detector) and cyanide as its cyanogen chloride derivative (electron capture detector) from the headspace of a plant sample. Ini method affords in-Þeld, rapid screening of plants to determine CY NOGE NIC GL YC OS IDE S (C Gs ) α-Hydrox ynitriles K e to-C ompounds Hydrogen C ya nide β-glucosidase α-hydroxynitriles lyase + Route 1 Route 2 β-Cyanoalanine Tiosianat (rhodanide) Sulfit + β-Cyanoalanine synthase Cysteine Rhodananese Thiosulfate P la nts , Ins ec ts Highe r

a nima ls P la nts , Ins ec ts Figure 6. Schematic pathway of catabolism of cyanogenic glycosides.

Halaman 99 Cyanogenic glycosides: biosynthesis and analysis cyanogenicity. Simultaneous detection of both the cyanide and the carbonyl compounds allows for conÞrmation of the presence of CGs and eliminates the problem of false positives often seen in traditional cyanide test kits. Metode ini bisa be useful for screening cyanogenic foodstuffs to determine suitability for consumption. A cyanide-speciÞc biosensor has been developed for the detection of CGs in the micro molar concentration in many medicinal and food plants (Keusgen et al. 2004). An immo- bilized cyanidase has been employed in this biosensor. Bawah this method, enzymatically formed ammonia is either detected by a potentiometric sensor based on an ammonia electrode or by a pH-sensitive electrolyte/insulator/semiconductor (EIS) layer structure made of Al/p-Si/SiO 2 /Si 3 N 4 (Keusgen et al. 2004). CGs were also studied using Raman spectroscopy (Thygesen et al. 2004). Surface-enhanced Raman Spectros-

Enzim Tanaman Accession No. Ukuran Protein/Gene Referensi Cytochrome P450ox Sorghum bicolor AAC39318 531 CYP71E1 Kahn et al. 1.997 Cytochrome P450tyr Sorghum bicolor AAA85440 Q43135 558 558 CYP79 CYP79A1 Koch et al. 1.995 Cytochrome P450 Manihot esculenta AAP57704 AF140614 511 541 C15 Zhang et al. 2.003 Andersen et al. 2.000 Putative Cytochrome P450 Lotus japonicus AAB69644 490 Forslund et al. 2.004 Cytochrome P450 Triglochin maritima AAF66544 AAF66543 533 540 CYP79E2 CYP79E1 Nielsen and Moller 2000; Nielsen and Moller 1999 A-type cytochromes P450,

CYP71E1, CYP98, and CYP99 Sorghum bicolor AAC39318 AAC39317 AAC39316 531 519 512 CYP71E1 CYP99A1 CYP98A1 Bak et al. 1.998 UDP-glucose:p-hydroxymandelo- nitrile-O-glucosyltransferase Sorghum bicolor AAF17077 492 UDPGT Jones et al. 1.999 A-hydroxynitrile lyase Manihot esculenta CAA82334 AAV52632 CAA11219 CAA11428 258 258 258 158 Abhydrolase_1 HNL HNL4 HNL 24 Hughes et al. 1.994 Wang et al. 2.004 (S)-hydroxynitrile lyase Hevea brasiliensis AAC49184 257 Hnl Hasslacher et al. 1.996 Hydoxynitrile lyase Prunus dulcis AAL11514 IJU2_B 563

536 hnl1 hnl1 Dreveny et al. 2.001 (R)-(+)-mandelonitrile lyase Prunus serotina P52707 573 MDL3 Hu and Poulton 1999 Rodanese Triticum aestivum AAK64575 307 TST Niu et al. 2.002 Rodanese Arabidopsis thaliana CAB53639 CAB64716 CAB88023 318 378 366 RDH2 Mst1 Mst2 Hatzfeld and Saito 2000; Pap- enbrock and Schmidt 2000 Dhurrinase ( -glucosidase) Sorghum bicolor AAC49177 565 Glyco_hydro-1 Cicek and Esen 1998; Ver- doucq et al. 2.004 Dhurrinase ( -glucosidase) Zea mays AAD09850 563 Glu2 Bandaranayake and Esen1996; Czjzek et al. 2.000 Dhurrinase ( -glucosidase) Secale cereale AAG00614

568 Glyco_hydro-1 Nikus et al. 2.003 B-glucosidase Prunus avivum AAA91166 531 Glyco_hydro-1 Wiersma et al. 1996; Gerardi et al.2001 B-glucosidase (Amygdalin hydrolase) Prunus serotina AAA93234 553 AH1 Zheng and Poulton1995; Zhou et al. 2.002 B-glucosidase Manihot esculenta CAA64442 551 Bgl1A Liddle et al. 1.998 B-glucosidase-DIMBOA Zea mays 1E4N_B 1E4N_A 512 512 Glyco_hydro-1 Glyco_hydro-1 Cicek, and Esen 1999; Czjzek et al. 2.000 B-(1)4- -glucosidase Prevotella ruminicola Bacteria (gram –ve) AAA86753 785 cdxA Wulff-Strobel and Wilson 1.995 B-cyanoalanine synthase Solenum tuberosum BAB18760 BAB20032

351 aa 347 aa PCAS-1 PCAS-2 Maruyama et al. 2.001 B-cyanoalanine synthase Betula pendula AAN86822 352 aa Beta-CAS Vahala et al. 2.003 Vicianin Hydrolase Vicia angustifolia ABD03937 509 Ahn et al. 2.007 Cyanide hydratase Gloeocercospora sorghi AAA33353 P32964 368 368 Cht CHT Wang and Etten 1992 -acetone cyanohydrin lyase Linum usitertussimum CAA70304 422 Trummler and Wajant1997 Prussanin -glucosidase Prunus serotina P29265 P29264 P29263 15 16 14 Li et al1992 Table 1. Cloned genes encoding enzymes of cyanogenic glycoside biosynthesis and catabolism.

Halaman 1010 Ganjewala et al.

copy (SERS) has been demonstrated to be a more sensitive method for the determination of the cyanogenic potential of plant tissue. The SERS method was optimized by ßow injection (FI) using a colloidal gold dispersion as efßuent. Very recently, Cho et al. (2006) have described an enzyme immunoassay method for the detection of high amygdalin content in various seeds and nuts. It utilizes an antiserum reactive to amygdalin for the detection of amygdalin. Bahkan, there are various other methods available to detect amygdalin in food extracts. Bacala and Barthet, (2007) reported gas chromatographic analysis of the cyanogenic glycosides linustatin and neolinustatin from ßaxseed ( Linum usitatissimum L.) using phenyl- -D-glucopyranoside as an internal standar. Two quantitative methods direct (using linustatin and neolinustatin external standard curves) or indirect (by use of methyl- -D-glucopyranoside as a surrogate external standard) were employed for the linustatin and neolinustatin. Limits of detection for all standards were in the low- to sub- nanogram level and were 10-100 times lower than the lower limit of quantiÞcation. Thus from the above discussion it is very clear that a broad-spectrum qualitative and quantitative methods are available for the detection of CGs. Namun, these methods have their own pros and cons, and have a limit

of detection of CGs from nano- to milligram level. Selanjutnya- more, the principal underneath the detection, suitability and applicability of these methods is markedly varies. Kesimpulan Cyanogenic glycosides (CGs) are abundant in plant kingdom. They are amongst most important components of plant defense systems and mediate interactions of plants with insects. The study of the biosynthesis of CGs is desirable because several commercial and edible crop plants are cyanogenic, particularly sorghum, cassava and barley. Pemahaman the CGs biosynthetic pathways and enzymatic steps as well as molecular regulatory process underlying therein is crucial for metabolic engineering of these pathway in order to de- velop cyanogen free crop plants. Already, transgenic cassava plants with no CGs have been successfully developed through metabolic engineering of key enzymes namely cytochromes- P450s. Similarly, transgenicArabidopsis thaliana with ability to produce dhurrin, tobacco and Lotus japonicus with altered cyanogenic, cyanoalkenyl or glucosinolate proÞles have been successfully generated. Metode Bahan Cyanogenic compounds Deteksi batas Referensi Pyridine-barbituric acid colorimetric prosedur Soybeans and soybean

produk Cyanide (HCN) Mikrogram Honig et al. 1.983 Direct determination method Beans and bean paste produk Linamarin Miligram Kawamura et al. 1.993 Picrate and acid hydrolysis methods Flax seed and flax seed meal; Bamboo shoots; sorghum leaves Total cyanide content Ppm. Haque and Beab- dury 2002 Picrate paper kits Singkong Total cyanide content Mikrogram Hidayat et al. 2.000 Barbituric acid pyridine, pyridine- pyrazolone and high performance kromatografi cair Ax seed Cyanogenic glikosida Microgram Kobaisy et al. 1.996 Densitometric method Cyanogenic plant Small amounts of cyanogenic Senyawa Nanogram Brimer and Mol- gaard, 1986 Direct determination of cyanides by potentiometric biosensors Several cyanogenic medicinal and food plants Cyanogenic glikosida Micromolar

Keusgen et al. 2.004 Chromatographic determination using a porous graphitic carbon column Almond tree roots Prunasin and amygdalin Berenguer Na- varro et al. 2.002 LC combined with tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) Vitis vinifera L. Epimers of prunasin and sambuni- menyeringai Franks et al. 2.005 Gas chromatographic analysis Linum usitatissimum L. Linustatin and neolinustatin Low- to sub- nanogram Bacala and Bar- thet 2007 Gas chromatography-electron capture/photoionization detection Bahan pangan Simultaneous determination of cyanide and carbonyl compounds Curtis et al. 2.002 GC/EI-MS or GC/NCI-MS Passiflora fruits Mandelonitrile (Prunasin, amygdalin, mandelonitrile rhamnopyranosyl -D-glucopyranosides, sambunigrin glycosides Chassagne et al. 1.996 Immunoassay using polyclonal antibodi Pits of fruits and nuts Amygdalin Microgram-milligram Cho et al. 2.006 Table 2. Methods for the detection of cyanogenic glycosides in plants.

Halaman 11

11 Cyanogenic glycosides: biosynthesis and analysis With regard to CGs, genes encoding enzymes involved in their biosynthesis as well as degradation have also been cloned and characterized. Today cloned genes (cDNA) encoding enzymes of the dhurrin biosynthetic pathway from sorghum are available. Our knowledge, however is not limited to the characterization of enzymes but extended to many structural and organizational details including the concept of metabolon formation by the enzymes of cyanogenic glycoside biosynthesis has been uncovered. Also, some progress has been made towards understanding role of sub-cellular compartmentation in regulation of cyanogenic glycosides biosynthesis in plants. Existence of isoforms of cytochrome- P450 represents the compartmentalization of cyanogenic glycosides biosynthesis in plants. Several insect species are dependent on cyanogenic plants for cyanogenic glycoside as their food and live in association with such plants throughout their life cycle. By using the available cDNAs, transgenic plants can now be generated with an altered qualitative and quantitative content of cyanogenic glycosides and the plant- insect interaction could be shattered. Or cyanogenic plants can be made acyanogenic (with no detectable cyanogen

glycosides) to deter insects dependent on such cyanogenic plants for cyanogenic glycosides as their food. Cyanogenic glycosides often have toxic effects in humans when consumed along with food and food products. In recent years, several efÞcient, highly sensitive and rapid method of detection of cyanogenic glycosides in foods and foodstuffs have been developed to determine suitability of these products for hu- man consumptions. Despite great progress made on every front, biosynthesis, molecular biology and metabolic engineering of cyanogenic glycosides, still we are short of detailed knowledge of the different regulatory mechanisms controlling biosynthesis of cyanogenic glycosides in plants.Also, extensive studies to be carried out to elucidate mechanisms or processes or enzyme characteristics particularly those which favors the formation of metabolon during biosynthesis of cyanogenic glycosides in tanaman. Another, unsolved but important issue related to cyanogenic glycosides biosynthesis in plants is the concomitant biosynthesis and accumulation of nitrile glucosides about which comparatively very little is known. However, it is ex- pected that complete elucidation of Lotus japanicus genome sequence may provide some important clues to understand biosynthesis of the nitrile glucosides and their biosynthetic

relationship with cyanogenic glycosides in plants. Simultane- ously, current methods of detection of cyanogenic glycosides should be constantly evaluated to improve their efÞciency and sensitivity and newer methods should be developed for detection of cyanogen glycosides in wide variety of plant samples, foods and foodstuffs. Ucapan Terima Kasih Authors are grateful to Dr. G. Viswanathan, Chancellor, VIT University, Vellore and Dr. Ashok Chauhan, Founder Presi- dent,Amity University, Uttar Pradesh for providing necessary support and facilities. Referensi Ahn YO, Saino H, Mizutani M, Shimizu BI, Sakata K (2007) Vicianin hydrolase is a novel cyanogenic -glycosidase speciÞc to -vicianoside (6-O- -L-arabinopyranosyl- -D-glucopyranoside) in seeds of Vicia angustifolia . Plant Cell Physiol 48:938-947. Andersen MD, Busk PK, Svendsen I, Moller BL (2000) Cytochromes P-450 from cassava ( Manihot esculenta Crantz) catalyzing the Þrst steps in the biosynthesis of the cyanogenic glucosides linamarin and lotaustralin. Cloning, functional expression in Pichia pastoris . J Biol Chem 275:1966-1975. Asamizu E, Nakamura Y, Sato S, Tabata S (2000) Generation of 7137 non redundant expressed sequence tags from a legume, Lotus japonicus . DNA Res 7:127-130 Bacala R, Barthet V (2007) Development of extraction and gas chromatography analytical methodology for cyanogenic glycosides in ßaxseed

( Linum usitatissimum ). J AOAC Int 90:153-61 Bak S, Kahn RA, Nielsen HL, Moller BL, Halkier BA (1998) Cloning of three A-type cytochromes P450, CYP71E1, CYP98, and CYP99 from Sorghum bicolor (L.) Moench by a PCR approach and identiÞcation by expression in Escherichia coli of CYP71E1 as a multifunctional cytochrome P450 in the biosynthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin. Plant Mol Biol 36:393-405. Bak S, Olsen CE, Peterson BL, Moller BL, Halikier BA (1999) Metabolic engineering of p-hydroxybenzylglucosinolates in Arabidopsis by expression of the cyanogenic CYP79A1 from Sorghum bicolor. Tanaman J 20:663-672. Bak S, Olsen CE, Halkier BA, Moller BL (2000) Transgenic tobacco and Arabidopsis plants expressing the two multifunctional sorghum cytochrome P450 enzymes, CYP79A1 and CYP71E1, are cyanogenic and accumulate metabolites derived from intermediates in dhurrin biosyn- tesis. Plant Physiol 123:1437-1448. Bandaranayake H, Esen A (1996) Nucleotide sequence of a -glucosidase (glu2) cDNA from maize. (Accession No. U44087) (PGR96-009). Tanaman Physiol 110:1048-1052. Bediako MKM, Tapper BA, Pritchard GG (1981) Metabolism, synthetic site and translocation of cyanogenic glycosides in cassava. In Tropical Crops Terry ER, Oduro KO, Cavenees F, ed., Proceedings of the First Triennial Symposium of the International Society for Tropical Root Tanaman. African Branch. International Development Research Centre, Ottawa, pp. 143-148.

Beesley SG, Compton SG, Jones DA (1985) Rhodanese in insects. J Chem Ecol 11:45-50. Bennett RN, Kiddle G, Wallsgrov RM (1997) Biosynthesis of benzylglu- cosinolate, cyanogenic glucosides and phenylpropanoids in C arica papaya. Phytochemistry 45:59-66. Berenguer NavarroV, Giner Galvan RM, rane Teruel N,Arrazalo Paternina G (2002) Chromatographic determination of cyanogenglycosides prunasin and amygdalin in plant extracts using a porous graphitic carbon column. J Agric Food Chem 50:6960-6963. Bordo D, Bork P (2002) The rhodanese/Cdc25 phosphatase superfamily sequence structure function relations. EMBO Rep 3:741-746. Brimer L, Brogger Christensen S, Jaroszewski Jerzy W, Nartey F (1981) Structural elucidation and partial synthesis of 3-hydroxyheterodendrin, a cyanogenic glucoside from Acacia sieberiana var. woodii. Phytochem- istry 20:2221-2223. Brimer L, Dalgaard L (1984) Cyanogenic glycosides and cyanohydrins in tanaman jaringan. Qualitative and quantitative determination by enzymatic post-column cleavage and electrochemical detection, after separation by high-performance liquid chromatography. J Chromatogr 303:77-88. Brimer L, Christensen SB, Molgaard P, Nartey F (1983) Determination of cyanogenic compounds by thin-layer chromatography. 1. A densito-

Page 1212 Ganjewala et al. thesis of dhurrin in Sorghum bicolor (L.) Moench and the involvement of 1-ACI-nitro-2-(p-hydroxyphenyl) ethane as an intermediate. J Biol

Chem 265:21114-21121. Handberg K, Stougaard J (1992) Lotus japonicus , an autogamous, diploid legume species for classical and molecular-genetics. Plant J 2:487-496. Haque RM, Beabdury JH (2002) Total cyanide determination of plants and foods using the picrate and acid hydrolysis methods. Food Chemi 77:107-114. Hasslacher M, Schall M, Hayn M, Griengl H, Kohlwein SD, Schwab H (1996) Molecular cloning of the full-length cDNA of (S)-hydroxynitrile lyase from Hevea brasiliensis . Functional expression in Escherichia coli and Saccharomyces cerevisiae and identiÞcation of an active site residue. J Biol Chem 27:5884-5891. Hatzfeld Y, Saito K (2000) Evidence for the existence of rhodanese (thiosulfate:cyanide sulfurtransferase) in plants: preliminary characterization of two rhodanese cDNAs from Arabidopsis thaliana. FEBS Lett 470:147-150. Hickel A, Hasslacher M, Griengl H (1996) Hydroxynitrile lyases: functions dan properti. Physiol Plant 98:891-898. Hidayat A, Zuaraida N, Hanarida I, Damardjati DS (2000) Cyanogenic content of cassava root of 179 cultivars grown in Indonesia. J Makanan Compost Anal 13:71-82. Honig DH, Hockridge ME, Gould RM, Rackis JJ (1983) Determination of cyanide in soybeans and soybean products. J Agric Food Chem 31:272-275. Hosel W, Con EE (1982) The aglycone speciÞcity of plant -glucosidase. Trends Biochem Sci 7:219-221. Hosel W, Tober I, Eklund SH, Conn EE (1987) Characterization of beta- glucosidases with high speciÞcity for the cyanogenic glucoside dhurrin

in Sorghum bicolor (L.) moench seedlings. Arch Biochem Biophys 252:152-62. Hu Z, Poulton JE (1999) Molecular analysis of (R)-(+)-mandelonitrile lyase microheterogeneity in black cherry. Plant Physiol 119:1535-1546. Hughes J, Carvalho FJ, Hughes MA (1994) PuriÞcation, characterization, and cloning of alpha-hydroxynitrile lyase from cassava ( Manihot esculenta Crantz). Arch Biochem Biophys 311:496-502. Jones PR, Moller BL, Hoj PB (1999) The UDP-glucose: p-hydroxymande- lonitrile-O-glucosyltransferase that catalyzes the last step in synthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin in Sorghum bicolor . J Biol Chem 274:35483-35491. Jorgensen K, Rasmussen AV, Morant M, Nielsen AH, Bjarnholt N, Zagro- belny M, Bak S, Moller BL (2005) Metabolon formation and metabolic channeling in the biosynthesis of plant natural products. Curr Opin Plant Biol 8:280-291. Kahn RA, Bak S, Svendsen I, Halkier BA, Moller BL (1997) Isolation and reconstitution of cytochrome P450ox and in vitro reconstitution of the entire biosynthetic pathway of the cyanogenic glucoside dhurrin from sorghum. Plant Physiol 115:1661-1670. Kahn RA, Fahrendorf T, Halkier BA, Moller BL (1999) Substrate speciÞcity of the cytochrome P450 enzymes CYP79A1 and CYP71E1 involved in the biosynthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin in Sorghum bicolo r (L.) Moench. Arch Biochem Biophys 363:9-18. KawamuraY, Hikidi S, Maruyama K, Uchiyama S, SaitoY (1993) Improve- ment of the direct determination method of linamarin in beans and bean

paste products. J Food Hyg Soc Japan 34:74-79. Keusgen M, Kloock JP, Knobbe DT, Junger M, Krest I, Goldbach M, Klein W, Schoning MJ (2004) Direct determination of cyanides by potentiometric biosensors. Sens Actuat B Chem 103:380-385. Kobaisy M, Oomah BD, Mazza G (1996) Determinations of cyanogenic glycosides in ax seed by barbituric acid pyridine, pyridine-pyrazolone and high performance liquid chromatography methods. J Agric Food Chem 44:3178-3181. Koch B, Nielson VS, Olsen CE, Moller BL (1992) The biosynthesis of cyanogenic glycosides in seedlings of cassava (Manihot esculents Crantz). Arch Biochem Biophys 292:141-150. Koch BM, Sibbesen O, Halkier BA, Svendsen I, Moller BL (1995) The primary sequence of cytochrome P450tyr, the multifunctional N- metric method for quantiÞcation of cyanogenic glycosides, employing enzyme preparations ( -glucuronidase) from Helix promatia and picrate- impregnated ion-exchange sheers. J Agric Food Chem 31:789-793. Brimer L, Molgaard P (1986) Simple densitometric method for estimation of cyanogenic glycosides and cyanohydrins under Þeld conditions. Biochem Syst Ecol 14:97-103. Brimer L (1988) Determination of cyanide and cyanogenic compounds in biological systems. Ciba Foundation symposium 140:177-200. Busk PK, Moller BL (2002) Dhurrin synthesis in sorghum is regulated at the transcriptional level and induced by nitrogen fertilization in older tanaman. Plant Physiol 129:1222-1231. Celenza JL (2001) Metabolism of tyrosine and tryptophan-new genes for old

jalur. Curr Opin Plant Biol 4:234-240. Chassagne D, Crouzet JC, Bayonove CL, Baumes RL (1996) IdentiÞcation and quantiÞcation of passion fruit cyanogenic glucosides. J Agric Food Chem 44:3817-3820. ChoAY,Yi KS, Rhim JH, Kim KI, Park JY, Keum EH, Chung J, Oh S (2006) Detection of abnormally high amygdalin content in food by an enzyme immunoassay. Mol. Cells 21:308-313. Cicek M, Esen A (1998) Structure and expression of a dhurrinase ( -glucosidase) from sorghum. Plant Physiol 116:1469-1478. Cicek M, Esen A (1999) Expression of soluble and catalytically active plant (monocot) beta-glucosidases in E. coli. Biotechnol Bioeng 20:392- 400. Conn EE (1980) Cyanogenic compounds. Annu Rev Plant Physiol 31:433- 451. Conn EE (1991) Metabolism of natural products: Lessons learned from cyanogenic glycosides. Planta Med 1:57-68. CurtisAJ, Grayless CC, Fall R (2002) Simultaneous determination of cyanide and carbonyls in cyanogenic plants by gas chromatography-electron capture/photoionization detection. Analyst 127:1446-1449. Czjzek M, Cicek M, Zamboni V, Bevan DR, Henrissat B, Esen A (2000) The mechanism of substrate (aglycone) speciÞcity in -glucosidases is revealed by crystal structures of mutant maize -glucosidase-DIMBOA,- DIMBOAGlc, and -dhurrin complexes. Proc Natl Acad Sci USA 97:13555-13560. Dreveny I, Gruber K, Glieder A, Thompson A, Kratky C (2001) The hydroxynitrile lyase from almond: a lyase that looks like an oxidoreductase. Structure 9:803-815.

Dudareva N (2004) Biochemistry of plant volatiles. Plant Physiol 135:1893- 1902. Fischbach MA, Clardy J (2007) One pathway many products. Nat Chem Biol 3:353-355. Fleming FF (1999) Nitrile-containing natural products. Nat Prod Rep 16:597-606. Forslund K, Jonsson L (1997) Cyanogenic glycosides and their metabolic enzymes in barley, in relation to nitrogen levels. Physiol Plant 101:367- 372. Forslund K, Morant M, Jorgensen B, Olsen CE, Asamizu E, Sato S, Tabata S, Bak S (2004) Biosynthesis of the nitrile glucosides rhodiocyanoside A and D and the cyanogenic glucosides lotaustralin and linamarin in Lotus japonicus . Plant Physiol 135:71-84. Franks TK, Hayasaka Y, Choimes S, van Heeswijck R (2005) Cyanogenic glucosides in grapevine: polymorphism, identiÞcation and developmen- tal pattern. Phytochemistry 66:615-173. Gebrehiwot L, Beuselinck PR (2001) Seasonal variations in hydrogen cyanide concentration of three Lotus species. Agron J 93:603-608. Gerardi C, Blando F, SantinoA, Zacheo G (2001) PuriÞcation and characteri- sation of a beta-glucosidase abundantly expressed in ripe sweet cherry ( Prunus avium L.) fruit. Plant Sci 160:795-805. Gleadow RM, Woodrow IE (2002) Constraints on effectiveness of cyanogenic glycosides in herbivore defense. J Chem Ecol 28:1301-1313. Halkier BA, Moller BL (1989) Biosynthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin in seedlings of Sorghum bicolor (L.) Moench and partial puriÞ- cation of the enzyme system involved. Plant Physiol 90:1552-1559.

Halkier BA, Moller BL (1990) The biosynthesis of cyanogenic glucosides in higher plants. IdentiÞcation of three hydroxylation steps in the biosyn-

Halaman 1313 Cyanogenic glycosides: biosynthesis and analysis hydroxylase catalyzing the conversion of L-tyrosine to p-hydroxyphenyl acetaldehyde oxime in the biosynthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin in Sorghum bicolor (L.) Moench. Arch Biochem Biophys 323:177-186. Kristensen C, Morant M, Olsen CE, Ekstrom CT, Galbraith DW, Moller BL, Bak S (2005) Metabolic engineering of dhurrin in transgenicArabidopsis plants with marginal inadvertent effects on the metabolome and transcriptome. Proc Natl Acad Sci USA 102:1779-1784. Lechtenberg M, Nahrstedt A., Fronczek FR (1996) Leucine-derived nitrile glucosides in the rosaceae and their systematic signiÞcance. Phytochem- istry 41:779-785. Li CP, Swain E, Poulton JE (1992) Prunus serotina amygdalin hydrolase and prunasin hydrolase: PuriÞcation, N-terminal sequencing, and antibody produksi. Plant Physiol 100:282-290. Liddle S, Keresztessy Z, Hughes J, Hughes MA (1998) A genomic cyanogenic beta-glucosidase gene from Cassava (Accession No. X94986). (PGR98-148). Plant Physiol 117:1526-1526. Maruyama A, Saito K, Ishizawa K (2001) Beta-cyanoalanine synthase and cysteine synthase from potato: molecular cloning, biochemical characterization, and spatial and hormonal regulation. Plant Mol Biol 46:749-60.

Moller BL, Conn EE (1980) The biosynthesis of cyanogenic glucosides in higher plants. Channeling of intermediates in dhurrin biosynthesis by a microsomal system from Sorghum bicolor (Linn) Moench. J Biol Chem 255:3049-3056. Moller BL, Seigler DS (1999) Biosynthesis of cyanogenic glucosides and related compounds. In Plant Amino Acids . Singh BK, ed., Marcel Dekker, New York, USA, pp. 563-609. Moller BL, Bak S (2005) Metabolic engineering of dhurrin in transgenic Arabidopsis plants with marginal inadvertent effects on the metabolome and transcriptome. Proc Natl Acad Sci USA 102:1779-784. Morant AV, Jorgensen K, Jorgensen B, Dam W, Olsen CE, Moller BL, Bak S (2007) Lessons learned from metabolic engineering of cyanogenic glucosides. Metabolomics 3:383-398. Morant M, Bak S, Moller BL, Werck-Reichhart D (2003) Plant cytochromes P450: tools for pharmacology, plant protection and phytoremediation. Curr Opin Biotechnol 14:1-12. Nahrstedt A (1985) Cyanogenic compounds as protecting agents for organisme. Plant Sys Evol 150:35-47. Nakamura Y, Kaneko T, Asamizu E, Kato T, Sato S, Tabata S (2002) Struc- tural analysis of a Lotus japonicus genome. II. Sequence features and mapping of sixty-Þve TAC clones which cover the 6.5-Mb regions of the genome. DNA Res 9:63-70. Nielsen JS, Moller BL (1999) Biosynthesis of cyanogenic glucosides in Triglochin maritima and the involvement of cytochrome P450 enzymes. Arch Biochem Biophys 368:121-130. Nielsen JS, Moller BL (2000) Cloning and expression of cytochrome P450

enzymes catalyzing the conversion of tyrosine to p-hydroxyphenylacetaldoxime in the biosynthesis of cyanogenic glucosides in Triglochin maritima . Plant Physiol 122:1311-1322. Nielsen KA., Olsen CE, Pontoppidan K, Moller BL (2002) Leucine derived cyano-glucosides in barley. Plant Physiol 129:1066-1075. Nielsen KA, Tattersall DB, Jones PR, Moller BL (2008) Metabolon formation in dhurrin biosynthesis. Phytochemistry 69:88-98. Nikus J, Esen A, Jonsson LMV (2003) Cloning of a plastidic rye (Secale cereale) beta-glucosidase cDNA and its expression in Escherichia coli . Physiol Plant 118:337-345. Niu JS, Yu L, Ma ZQ, Chen PD, Liu DJ (2002) Molecular cloning, characterization and mapping of a rhodanese like gene in wheat. Yi Chuan Xue Bao 29:266-272. Papenbrock J, SchmidtA (2000) Characterization of a sulfurtransferase from Arabidopsis thaliana . Eur J Biochem 267:145-154. Perry JA, Wang TL, Welham TJ, Gardner S, Pike JM,Yoshida S, Parniske M (2003)A TILLING reverse genetics tool and a web-accessible collection of mutants of the legume Lotus japonicus . Plant Physiol 131:866-871. Poulton JE (1990) Cyanogenesis in plants. Plant Physiol 94:401-405. Ressler C, Nigam S, Giza Y (1969) Toxic principle in vetch: isolation and identiÞcation of -L-glutamyl-l- -cyanoalanine from common vetch seeds: distribution in some legumes. J Am Chem Soc 91:2758-2765. Szczyglowski K, Hamburger D, Kapranov P, de Bruijn FJ (1997) Con- struction of a Lotus japonicus late nodulin expressed sequence tag

library and identiÞcation of novel nodule-speciÞc genes Plant Physiol 114:1335-1346. Sibbesen O, Koch B, Halkier BA, Moller BL (1994) Isolation of the heme- thiolate enzyme cytochrome P-450TYR, which catalyses the committed step in the biosynthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin in Sorghum bicolor (L.) Moench. Proc Natl Acad Sci USA 91:9740-9744. Sibbesen O, Koch B, Halkier BA, Moller BL (1995) Cytochrome P-450TYR is a multifunctional heme-thiolate enzyme catalyzing the conversion of l-tyrosine to p -hydroxyphenylacetaldehyde oxime in the biosynthesis of the cyanogenic glucoside dhurrin in Sorghum bicolor (L.) Moench. J Biol Chem 270:3506-3511. Siritunga D,Arias-Garzon D,WhiteW, Sayre RT (2004a) Over-expression of hydroxynitrile lyase in transgenic cassava roots accelerates cyanogenesis and food detoxiÞcation. Plant Biotechnol J 2:37-43. Siritunga D, Sayre R (2004b) Engineering cyanogen synthesis and turnover in cassava ( Manihot esculenta ). Plant Mol Biol 56:661-669. Swain E, Li CP, Poulton JE (1992) Tissue and subcellular localization of enzymes catabolizing (R)-amygdalin in mature Prunus serotina seeds. Plant Physiol 100:291-300. Tattersall DB, Bak S, Jones PR, Olsen CE, Nielsen JK, Hansen ML, Hoj PB, Moller BL (2001) Resistance to an herbivore through engineered cyanogenic glucoside synthesis. Science 293:1826-1828. Thorsoe KS, Bak S, Olsen CE, Imberty A, Breton C, Moller BL (2005) Determination of catalytic key amino acids and UDP sugar donor speci-

Þcity of the cyanohydrin glycosyltransferase UGT85B1 from Sorghum bicolor . Molecular modelling substantiated by site-speciÞc mutagenesis and biochemical analyses. Plant Physiol 139:664-673. Thygesen LG, Jorgensen K, Moller BL, Engelsen SB (2004) Raman spec- troscopic analysis of cyanogenic glucosides in plants: development of a ßow injection surface-enhanced Raman scatter (FI-SERS) method for determination of cyanide. Appl Spectrosc 58:212-217. Trummler K, Wajant H (1997) Molecular cloning of acetone cyanohydrin lyase from ßax ( Linum usitatissimum ). DeÞnition of a novel class of hydroxynitrile lyases. J Biol Chem 272:4770-4774. Vahala J, Ruonala R, Keinanen M, Tuominen H, Kangasjarvi J (2003) Eth- ylene insensitivity modulates ozone-induced cell death in birch. Tanaman Physiol 132:185-195. Verdoucq L, Moriniere J, Bevan DR, Esen A, Vasella A, Henrissat B, Czjze M (2004) Structural determinants of substrate speciÞcity in family 1 beta-glucosidases: novel insights from the crystal structure of sorghum dhurrinase-1, a plant beta-glucosidase with strict speciÞcity, in complex with its natural substrate. J Biol Chem 279:31796-31803. Vetter J (2000) Plant cyanogenic glycosides. Toxicon 38:11-36. Vogt T, Jones D (2000) Glycosyltransferase in plant natural product synthesis. Characterization of supergene family. Trends Plant Sci 5:380-386. Wang D, Li W, Wan J (2004) Cloning and preliminary expression of alpha- hydroxynitrile lyase gene from cassava. Chinese J Appl Environ Biol 10:428-431.

Wang P,Van Etten HD (1992) Cloning and properties of a cyanide hydratase gene from the phytopathogenic fungus Gloeocercospora sorghi . Bio- chem Biophys Res Commun 187:1048-1054. Watanabe Y, Laschat S, Budde M, Affolter O, Shimadac Y, Urlacher VB (2007) Oxidation of acyclic monoterpenes by P450 BM-3 monooxygenase: inßuence of the substrate E/Z-isomerism on enzymechemo- and regioselectivity. Tetrahedron, 63:9413-9422. Wiersma PA, Fils-Lycaon BR (1996) Molecular cloning and nucleotide sequence (Accession No. U39228) of a beta-glucosidase cDNA from ripening sweet cherry fruit (PGR95-127). Plant Physiol 110:337-337. Wulff-Strobel CR, Wilson DB (1995) Cloning, sequencing, and characterization of a membrane-associated Prevotella ruminicola B(1)4 beta-glucosidase with cellodextrinase and cyanoglycosidase activities. J Bacteriol 177:5884-5890. Zagrobelny M, Bak S, RasmussenAV, Jorgensen B, Naumann CM, Lindberg

Halaman 1414 Ganjewala et al. Moller BL (2004) Cyanogenic glucosides and plant-insect interactions. Phytochemistry 65:293-306. Zhang P, Bohl-Zenger S, Puonti-Kaerlas J, Potrykus I, Gruissem W (2003) Two cassava promoters related to vascular expression and storage root formasi. Planta 218:192-203. Zheng L, Poulton JE (1995) Temporal and spatial expression of amygdalin hydrolase and (R)-(+)-mandelonitrile lyase in black cherry seeds. Tanaman Physiol 109:31-39.

Zhou J, Hartmann S, Shepherd BK, Poulton JE (2002) Investigation of the microheterogeneity and aglycone speciÞcity-conferring residues of black cherry prunasin hydrolases. Plant Physiol 129:1252-1264.

Alifatik Amide dari Biji Carica papaya sebagai Larvicide nyamuk, Pupicide, Adulticide, repellent dan racun asap Anjali Rawani 1 Anupam Ghosh 2 Subrata Laskar 3 Goutam Chandra 1 1. Nyamuk dan Unit Riset mikrobiologi, Departemen Zoologi, Universitas Burdwan, West Bengal, India 2. Departemen Zoologi, Bankura Christian College, Bankura-722.101, Benggala Barat, India 3. Produk Natural Laboratorium, Jurusan Kimia, Universitas Burdwan, West Bengal, India

Penulis Sesuai penulis Journal of Mosquito Penelitian 2012, Vol. 2, No 2 doi: 10.5376/jmr.2012.02.0002 Diterima: 19 Oktober 2012 Diterima: 24 Oktober 2012 Diterbitkan: 25 Oktober 2012 © 2012 BioPublisher Publishing Landasan Ini adalah artikel akses terbuka yang diterbitkan di bawah ketentuan Creative Commons Attribution License , yang memungkinkan penggunaan tak terbatas, distribusi, dan reproduksi dalam media apapun, asalkan karya asli benar dikutip. Disukai kutipan untuk artikel ini:

. Rawani et al, 2012, Aliphatic Amide dari Biji Carica papaya sebagai Mosquito Larvicide, Pupicide, Adulticide, racun dan asap Repellent, Jurnal Penelitian Nyamuk,, Vol.2 No.2 8-18 (doi: 10.5376/jmr.2012.02 .0002)

Abstrak

Ekstrak kasar dan pelarut ekstrak biji Carica Papaya diselidiki untuk anti-nyamuk potensial, termasuk larvisida, pupicidal, toksisitas adulticidal, asap dan kegiatan penolak terhadap Culex quinquefasciatus dan Anopheles stephensi, vektor filaria dan malaria masing-masing. Angka kematian larva instar ke-3 dari Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi pada konsentrasi 0,5% secara signifikan lebih tinggi (p <0,05) dibandingkan dengan angka kematian sebesar 0,1%, 0,2%, 0,3% dan 0,4% dari konsentrasi ekstrak kasar. Di antara ekstrak pelarut, ekstrak petroleum eter menunjukkan kematian tertinggi pada 100 ppm dengan LC 50 dan LC 90 nilai 31.16 ppm dan 341,86 ppm terhadap Cx. quinquefasciatus, 18,39 ppm dan 250,76 ppm terhadap An. stephensi. Dalam pengujian untuk kegiatan pupicidal, ekstrak tumbuhan ini dipamerkan potensi sedikit pupicidal dengan LC 50 nilai 86.53 ppm dan 72,16 ppm terhadap Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi masing. Ini menunjukkan repellency terhadap perempuan dewasa dari kedua spesies nyamuk dengan 78% dan 92% masing-masing perlindungan. Hal ini juga menyediakan waktu perlindungan menggigit dari 4 jam dan 5 jam masing-masing terhadap Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi. Dalam kegiatan adulticidal ada 70% dan kematian 63,3% dari nyamuk dewasa terhadap Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi setelah 72 jam. Uji toksisitas menunjukkan bahwa asap dari 200 nyamuk dewasa dewasa nyamuk 190 dari Cx. quinquefasciatus dan 186 nyamuk An. stephensi jatuh ke lantai setelah 5 jam asap. Salah satu senyawa beracun terdeteksi memiliki R f = 0,853 (80% dan kematian 83% dalam 24 jam masing-masing untuk Cx quinquefasciatus dan An stephensi..). Analisis IR memberikan informasi awal tentang sifat polihidroksi amida alifatik dari bahan aktif.

http://translate.googleusercontent.com/translate_c?depth=1&ei=3oXIUIG9KI-GrAef24HABw&hl=id&langpair=en%7Cid&rurl=translate.google.co.id&twu=1&u=http://bio.sophiapublisher.com/policy&usg=ALkJrhjslOjDckO7M6AkNaHCui8klQF-kQ

mailto:[email protected]




Kata kunci

Culex quinquefasciatus, Anopheles stephensi, analisis IR, aktivitas larvisida, Carica papaya, Non-target, aktivitas Pupicidal, Repellent, toksisitas asap; aktivitas Adulticidal

Pengantar Nyamuk adalah salah satu vektor yang paling signifikan dari parasit dan patogen yang terus memiliki dampak yang menghancurkan pada manusia ( Maheswaran et al., 2008). Pengendalian vektor nyamuk spesies sangat penting karena mereka menularkan malaria, filariasis, dan penyakit arboviral banyak, dan mereka merupakan gangguan yang menggigit tertahankan ( Youdeowei dan Layanan , 1983, Chatterjee dan Chandra , 2000; De dan Chandra , 1994, Collins dan Paskewitz , 1995 ). Nyamuk juga menyebabkan respon alergi yang mencakup kulit lokal dan reaksi sistemik seperti angioedema pada manusia ( Peng et al., 1999). Insektisida sintetis membuat sejumlah masalah ekologi, seperti pengembangan strain resisten serangga, biomagnifikasi dll produk alami umumnya disukai karena kurang bersifat berbahaya untuk organisme non-target dan karena biodegradabilitas bawaan mereka ( Prabakar dan Jebanesan , 2004) . Baru-baru ini, lingkungan insektisida alami yang ramah dan biodegradable asal tanaman telah menerima perhatian sebagai langkah alternatif hijau untuk mengontrol arthropoda penting kesehatan masyarakat ( Dewick , 2009, Rawani et al, 2009, 2010,. Haldar . et al, 2011 , Banerjee et al, 2012).. Tanaman dapat menjadi sumber alternatif agen pengendali larva nyamuk karena mereka merupakan sumber yang kaya bahan kimia bioaktif. Tidak hanya dapat ekstrak tanaman

obat efektif tetapi juga mereka sangat mungkin mengurangi risiko efek ekologi yang merugikan dan pengeluaran terhadap pengendalian nyamuk.

Carica papaya, spesies tunggal di Carica genus dari Caricaceae keluarga tanaman dibudidayakan secara luas. Pepaya (atau pepaya atau pepaya) adalah pohon buah tropis. Pepaya adalah tanaman seperti pohon besar, dengan satu batang tumbuh dari 5 sampai 10 meter (16 sampai 33 kaki) tinggi, dengan daun spiral diatur terbatas pada bagian atas bagasi. Batang lebih rendah mencolok terluka di mana daun dan buah yang ditanggung. Daun besar, 50 ~ 70 cm (20 ~ 28 inch) diameter, sangat palmately lobed dengan 7 lobus. Pohon biasanya tidak bercabang, kecuali lopped. Bunganya mirip dalam bentuk dengan bunga dari Plumeria, tetapi jauh lebih kecil dan seperti lilin. Mereka muncul di axils daun, jatuh tempo ke dalam 15 besar ~ 45 cm (5,9 inci ~ 18) panjang, 10 ~ 30 cm (3,9 ~ 12 inch) diameter buah. Pepaya digunakan sebagai makanan, alat bantu memasak, dan dalam pengobatan tradisional. Hal ini digunakan sebagai obat terhadap berbagai penyakit ( Mello et al, 2008;. Munoz . et al, 2000). Batang dan kulit dapat digunakan dalam produksi tali. Buah dan biji ekstrak telah diucapkan kegiatan bakterisidal ( Emeruwa , 1982). Daun telah poulticed menjadi sakit saraf, pertumbuhan elephantoid dan telah merokok untuk bantuan asma di kalangan masyarakat suku tropis. Efek hipoglikemik ekstrak etanol mentah, buah matang telah dilaporkan oleh Olagunju et al (1995).

Penelitian ini dilakukan untuk menetapkan, larvisida pupicidal, adulticidal, memukul mundur dan kegiatan toksisitas asap ekstrak biji Carica papaya terhadap Culex quinquefasciatus dan Anopheles stephensi. Konsentrasi mematikan pada 24 jam juga diperiksa pada organisme non-target seperti

Diplonychus annulatum dan Chironomus circumdatus untuk menganalisis pengaruh ekstrak nabati pada kesehatan organisme akuatik yang hidup di habitat yang sama nyamuk.

1 Results Hasil dari penelitian ini menunjukkan bahwa tingkat kematian larva instar ke-3 dari Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi pada konsentrasi 0,5% secara signifikan lebih tinggi (p <0,05) dibandingkan dengan angka kematian sebesar 0,1%, 0,2%, 0,3% dan 0,4% dari konsentrasi ekstrak tumbuhan mentah pada 24, 48 dan 72 jam dari eksposur ( Tabel 1 ). Pengaruh ekstrak pelarut pada ketiga instar larva dari kedua spesies nyamuk yang disajikan dalam ( Tabel 2 dan Tabel 3 ). Kematian tertinggi diamati pada ekstrak petroleum eter pelarut pada 100 ppm pada 24 jam, dan hasil analisis regresi menunjukkan bahwa angka kematian (Y) berkorelasi positif dengan jangka waktu pemaparan (X) memiliki koefisien regresi dekat dengan salah satu di masing-masing kasus. Hasil analisis log probit (tingkat kepercayaan 95%) mengungkapkan bahwa LC 50 nilai secara bertahap menurun dengan periode pemaparan ( Tabel 4 dan Tabel 5 ). Kegiatan pupicidal dari dua spesies nyamuk disajikan dalam Tabel 6 . Kematian tertinggi tercatat pada 150 ppm dosis pupa dari Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi memiliki LC 50 nilai 86.53 ppm dan 72,16 ppm setelah 24 jam. Tabel 7 menunjukkan aktivitas penolak ekstrak petroleum eter terhadap kedua spesies nyamuk. Hasil kegiatan adulticidal mengungkapkan kematian tertinggi pada 150 ppm dosis dari kedua spesies nyamuk dengan LC 50 nilai 21,48 ppm dan 64,21 ppm setelah 72 jam ( Tabel 8 ). Toksisitas asap efek pada orang dewasa Cx. quinquefasciatus dan An. stephensi nyamuk tercatat dalam urutan sebagai berikut: obat nyamuk komersial> obat

nyamuk yang mengandung petroleum eter bubuk ekstrak> obat nyamuk tanpa bahan tanaman ( Tabel 9 ). Setelah pengobatan dengan asap pada 200 nyamuk dewasa Cx. quinquefasciatus, 40 nyamuk meninggal ketika 190 nyamuk termuat dalam lantai setelah 5 jam. Dalam kasus An. stephensi dewasa nyamuk nyamuk 48 meninggal dan 186 nyamuk yang diletakkan di lantai setelah 5 jam. Tabel 10 menyajikan angka kematian dari kedua spesies nyamuk diuji oleh senyawa bioaktif terisolasi. Angka kematian tertinggi (pada konsentrasi 75 ppm) tercatat dalam senyawa yang memiliki R f = 0,853. IR analisis senyawa dan kelompok masing-masing fungsional ditunjukkan pada Gambar 1 . Dari spektroskopi IR kami mengamati CH 2

peregangan, C = O peregangan, OH dan C = O peregangan getaran kelompok amida.

Jurnal Biji Pepaya

Documents