7/23/2019 Efektivitas Antimikroba http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 1/35 EFEKTIVITAS ANTIMIKROBA
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 1/35
EFEKTIVITASANTIMIKROBA
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 2/35
Antimikroba
Zat antimikroba adalah zat yang dapatmengganggu pertumbuhanmikroorganisme.
Zat antimikroba antibakterial danantiam!r"
Zat antibakterial adalah #at yangmenggang! pert!mb!han danmetaboli$me melal!i penghambatanpert!mb!han bakteri"
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 3/35
• Senya%a antimikroba ada yang terma$!k
kelompok antibiotika& de$in'ektan& dananti$eptik"
• Antibiotika adalah $enya%a kimia yangdihasilkan oleh mikroorganisme ata!
diha$ilkan $e(ara $intetik yang dapatmembunuh atau menghambatperkembangan bakteri danorganisme lain"
• Antibiotik ada yang ber$pektr!m sempit
dan ada !ga yang ber$pektr!m luas"
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 4/35
Efektivitas Antimikroba
Mengukur diameter zona hambat sekitar cakram kertas yang merupakan hasil difusi obat/bahan antimikroba
ke dalam medium.
U n t u k m e n g e t a h u i d a y a h a m b a t z a t a n t i m i k r o b a a t a u u n t u k m e n e n t u k a n s e n s i t i v i t a s a n t i b i o t i k u n t u k
b a k t e r i .
Metode difusi cakram (uji Kirby-Bauer).
Daya hambat suatu zat – zat antimikroba untukmembunuh atau menghambat pertumbuhanmikroorganisme
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 5/35
• Sen$iti)ita$ $!at! bakteri terhadap
antibiotik ditent!kan oleh diameter #onahambat yang terbent!k* Semakin besardiameternya maka semakin terhambatpertumbuhannya.
• Daerah jernih yang tampak di $ekeliling
kerta$ (akram men!n!kkan tidak adanyapertumbuhan mikroba" +am!r yang$en$iti' terhadap bahan antimikroba akanditandai dengan adanya daerah hambatan
di$ekitar (akram& $edangkan am!r yangre$i$ten terlihat tetap t!mb!h pada tepikerta$ (akram"
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 6/35
• +ika pert!mb!han
mikroba tidak dihambatoleh antibiotik
re$i$ten•pert!mb!han mikroba
dihambat antibiotik
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 7/35
Re$i$ten$i,
keadaanpenurunan atau
kehilangansensitivitas
terhadap obat"
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 8/35
Faktor yang mempengaruhimetode Kirby-auer!•Kon$entra$i mikroba !i
•Kon$entra$i antibiotikyang terdapat dalam(akram
• +eni$ antibiotik"
•p- medi!m"
•Ke(epatan di'!$i antibiotik
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 9/35
Berda$ark
anmekani$me kera
Menghambatsintesis
dinding sel
Merusakmembran sel
mikroba
Menghambatsintesis
protein selmikroba
Merusak
asam nukleat
Mengganggumetabolismesel mikroba
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 10/35
Antimikroba "arus #empunyaiKriteria $deal%• Ekonomi$
• Tidak menyebabkan timb!lnya re$i$ten
• .apat mengambat ata! memb!n!h
pert!mb!han mikroba• Tidak menimb!lkan alergi ata! e'ek$amping
• Tidak melenyapkan /ora normal
• .apat diberikan $e(ara oral tanpadiinakti'kan oleh a$am lamb!ng& ata!bi$a diberikan $e(ara $!ntikan"
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 11/35
Faktor 0ang Mempengar!hi E1$ien$i.an E'ekti)ita$ Antimikroba2
• Kon$entra$i2 tergant!ng padabahan akti' dari $!at! #at
ter$eb!t dan mikroorgani$meyang di!i"
• 3akt! terpapar2 tidak bolehmengakibatkan kehilangan$i'at antimikrobanya"
• +eni$ mikroba
• Kondi$i lingk!ngan2
temperat!r& p- dan eni$
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 12/35
&engujian 'at Antibiotik DenganDifusi (akram)metode Kirby auer*• Siapkan medi!m (air 4!nt!kpembiakan5
• Inok!la$ikan $ebanyak 6 o$e bakteri
!i kedalam 67 m8 medi!m (air"• Ink!ba$ikan $elama 69:9; am pada
ink!bator
• <airkan medi!m agar dengan
memana$kannya
• T!angkan Agar N!tri$i pada (a%anpetri& homogenkan $e(ara merata
dengan (ara mem!tar (a%an di ata$me a $earah ar!m am dan
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 13/35
• <el!pkan cotton bud 4cotton swab5
dalam biakan bakteri kem!diantekan kapa$ ke $i$i tab!ng agar airtiri$" =la$kan pada $el!r!h
perm!kaan (a%an M!eller:-intonAgar $e(ara merata& biarkan $elama> menit"
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 14/35
• +ntuk antibiotika dalamkapsul,kaplet larutkan dalamauades steril rendam /akram
kertas dalam larutan antibiotikselama 0 menit dengan pinsetletakkan di atas lempeng agar
yang telah diinokulasi bakteritekan /akramnya supaya benar 1benar menempel pada agar.
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 15/35
• Beri tanda bagian l!ar da$ar (a%an petri $e$!aidengan ma(am antibiotik& ink!ba$ikan $elama 9; am& 99 ? @<"
• Amati pert!mb!han koloni pada lempeng agar&!k!r diameter #ona penghambatan !nt!k tiapma(am antibiotik& dan bandingkan dengan tabel"
2 b l & t S iti it
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 16/35
2abel &enentuan SensitivitasAntibiotik )Diameter 'ona "ambatDalam #m*
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 17/35
Resistenrre
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 18/35
(ara menginterpretasikan %+kur diameter zona hambat )zona
jernih*#isal didapatkan zona hambat suatubakteri berdiameter 03 mm untukeryhtromycin. #aka interpretasinya
adalah bakteri tersebut peka terhadapantibiotik eryhtromycin.Resistent % yaitu bakteri sudah kebalterhadap antibiotik tertentu.
Intermediate % medium
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 19/35
Efektifitas Antimikroba
• engertian !at antimikroba"!at #ntimikroba ialah zat yang dapat digunakan secaraterapeutik untuk mengobati penyakit yang disebabkan olehmikroba dengan cara membunuh/menghambat agen penyakit.$
• Menurut Rosliana Ma%addah&'( dalam skripsinya) Mikrobiologi Pangan 1:Fardiaz *
"#ntimikroba merupakan senya%a biologis atau kimia yang bersifat menghambat pertumbuhan bakteri atau kapang)bakteristatik atau fungistatik* atau membunuh bakteri atau
kapang )bakterisidal atau fungisidal*.$
• Senyawa antimikroba memiliki aktiita! "eng#ambatanter#ada" mikroba yang berbeda-beda. Senyawa antimikrobaini bia!a terkandung "ada ba#an "engawet.
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 20/35
• +fektifitas antimikroba adalah kemampuanzat antimikroba untuk
menghambat/membunuh bakteri padasuatu sediaan.
• ,lasifikasi !at #ntimikroba-
. !at antimikroba alami. !at antimikroba sintetis
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 21/35
Mekanisme Kerja Zat Antmikroba• Menurut ,atzung0 121 dan
3a%etz dkk.0 445 ada beberapacara yakni-
* Mengganggu "embentukandinding !el$ dengan adanyaakumulasi komponen lipofilat
yang terdapat pada dinding atau
membran sel akanmenyebabkan perubahankomposisi penyusun dindingsel.
* Peng#ambatan %ung!imembran "la!ma. (eberapaantimikroba merusakpermeabilitas membran0akibatnya ter6adinya kebocoranmateri intraseluler0 sepertisenya%a phenol yang dapat
mengakibatkan lisis sel dandenaturasi rotein serta
• 8* Peng#ambatan !inte!a "rotein$a!am nukleat dan aktiita!enzim. +fek senya%a antimikroba
dapat menghambat ker6a enzim 6ika senya%a antimikrobamempunyai spesifitas yang samadengan ikatan kompleks yangmenyusun struktur enzim.enghambatan ini dapat
mengakibatkan terganggunyametabolisme sel0 seperti sintesaprotein dan asam nukleat
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 22/35
Faktor yang mempengaruhi efektifitas kerja zat
antimikroba:
• menurut elczar dan 9han )122*: ;ardiaz0dkk.0 122 -
. konsentrasi
. lama %aktu pemberian
8. <uhu
=. p>
?. 6enis mikroba dan adanya kimia lain yang bersifat melindungi mikroba.
@. <ifat bahan yang akan diberi antimikroba0 6enis mikroba0 dan kondisi lingkungan
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 23/35
Kriteria Ideal Zat Antimikroba• Dalam ;ardiaz0dkk. 122: ;razier dan Aesthoff0 122 -
. tidak bersifat racun bagi bahan pangan0
. ekonomis08. tidak menyebabkan
=. perubahan flavor/citarasa dan aroma pangan
?. tidak mengalami penurunan
@. aktivitas karena adanya komponen pangan5. tidak menyebabkan timbulnya galur resisten dan
sebaiknya membunuh daripada hanya menghambat
2. pertumbuhan mikroba
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 24/35
Uji Aktiitas Zat Antimikroba• Pengujian aktiita! antimikroba merupakan tahap untuk mengetahui
kemampuan suatu senya%a antimikroba dalam menghambatpertumbuhan bakteri perusak dan patogen pangan.
• Metode yang digunakan dalam menganalisis aktivitas antimikrobadipengaruhi oleh -
. media analisis
. senya%a antimikroba
8. rosedur analisis.
• "Metode untuk menganalisis aktivitas antimikroba dapat dibedakanmen6adi dua0 yaitu in itro dan a"lika!i "ada "roduk "angan& (Branen
dan Davidson0 118*.
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 25/35
Metode in vitro
• Untuk menun6ukkan adanya potensiantimikroba pada bahan.Metode In
vitro
Metode
turbidimetri Metode di%u!i
agar 'ilutionmet#od!
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 26/35
Metode !engen"eran #$ilution Methods%
• "Metode pengenceran memiliki keunggulan0 yaitu dapat diketahui ter6adinya kontaminasidan dapat dilakukan untuk bahan yang %arnanya keruh$ )(arry12@ diacu dalam
(ranen dan Davidson0 118*
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 27/35
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 28/35
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 29/35
Metode $ifusi Agar• Kelebi#an dari metode difusi
agar yaitu sederhana untukdilakukan dan dapatdigunakan untuk melihatsensitivitas berbagai 6enismikroba terhadap antimikrobapada konsentrasi tertentu.
• Kekurangan dari metodedifusi agar adalah senya%aantimikroba yang akan diu6iharus bersifat hidrofilik agardapat berdifusi dengan baik kedalam agar.
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 30/35
• Mekani!me Kerja:
<enya%a #ntimikroba
Melalui ,ertas 9akram / Membuat <umur )metode
<umur* Media #gar
Menghambat ertumbuhan Mikroba
Difusi
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 31/35
Metode &umur. Membuat sumur berdiameter @ mm pada media agar yang
telah dituang ke dalam ca%an petri yang kemudian diisi
dengan senya%a antimikroba. Masukkan ke dalam re%rigerator !elama jam
8. 'nkubasi <elama = 3am pada suhu 85o9 untuk memberikesempatan senya%a berpenetrasi sebelum dilakukan
=. Bakukan pengamatan dan pengukuran zona atau diameter
penghambatan pertumbuhan mikroba )mm* yang ditandaidengan adanya areal bening yang menun6ukkan tidak adanyapertumbuhan mikroba u6i.
?. engukuran diameter penghambatan tidak termasuk diametersumur.
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 32/35
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 33/35
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 34/35
• Menurut iddock )114* diacu dalam (ranen0Davidson0 dan <ofos )44?*-
. aktivitas antimikroba yang menghasilkandiameter penghambatan 84&8? mm dinyatakanaktivitas antimikrobanya digolongkan tinggi.
. 3ika diameter penghambatan antara 4&84mm0 maka aktivitas antimikrobanya
digolongkan sedang8. 6ika diameter penghambatan ?&4 mm0 maka
=. aktivitas antimikrobanya digolongkan rendah
?. serta 6ika diameter penghambatan ?&4 mmaktivitas antimikrobanya digolongkan tidakefektif )resisten*.
7/23/2019 Efektivitas Antimikroba
http://slidepdf.com/reader/full/efektivitas-antimikroba 35/35
Metode 'urbidimetri• Metode turbidimetri
• ,elebihan -
cepat tidak destruktif0 dantidak mahal. <edangkan
• ,ekurangannya -sensitifitasnya rendah.
• Metode yang selama ini paling banyak dilakukan dalampenelitian adalah metode in
itro$ yaitu dengan metodedi%u!i agar (!umur) danmetode "engeneran.