AKTIVITAS BIOLARVASIDA FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK …eprints.ums.ac.id/22773/22/Naskah_Publikasi.pdf1 AKTIVITAS BIOLARVASIDA FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL 96% BUAH Piper retrofraktum

AKTIVITAS BIOLARVASIDA FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL 96% BUAH Piper retrofractum Vahl. TERHADAP LARVA NYAMUK Anopheles aconitus

DAN Aedes aegypti SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPISNYA

NASKAH PUBLIKASI

Oleh :

ISMAYADI K 1000900140

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2013

1

AKTIVITAS BIOLARVASIDA FRAKSI SEMIPOLAR EKSTRAK ETANOL 96% BUAH Piper retrofraktum Vahl. TERHADAP LARVA NYAMUK Anopheles aconitus DAN Aedes

aegypti SERTA PROFIL KROMATOGRAFI LAPIS TIPISNYA

BIOLARVICIDE ACTIVITY OF 96% ETHANOL-EXTRACTED OF SEMI-POLAR FRACTION OF Piper retrofraktum Vahl FRUIT AGAINTS Anopheles aconitus AND Aedes

Aegypti LARVAS AND THIN LAYER CHROMATOGRAPHY PROFILE

Haryoto, Ismayadi, Rima Munawaroh Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta

ABSTRAK

Aktivitas biolarvasida terhadap larva nyamuk Aedes aegypti dan Anopheles aconitus serta

profil KLT (kromatografi lapis tipis) dari fraksi semipolar ekstrak etanol 96% buah Piper retrofractum Vahl. telah dilakukan. Uji biolarvasida dilakukan terhadap larva instar III dengan variasi konsentrasi. Aedes aegypti yaitu 10, 30, 50 dan 80 ppm sedangkan Anopheles aconitus 10, 20, 30 dan 40 ppm selama 24 jam. Persentase kematian pada larva Aedes aegypti secara berturut-turut sebesar 2, 35, 58, dan 79% dengan LC50 =44,484 ppm sedangkan Anopheles aconitus 27, 100, 100 dan 100% dengan LC50=11,39 ppm. Hasil KLT menggunakan pereaksi semprot dragendorff menunjukkan adanya alkaloid dengan Rf=0,26 dan berfluorosensi kuning jingga pada UV366.

Kata kunci ; Piper retrofractum, Biolarvasida, Aedes aegypti, Anopheles aconitus

ABSTRACT

Biolarvacide activity against Aedes aegypti and Anopheles aconitus mosquitoes and TLC

profile of semi-polar fraction of 96% ethanol-extracted of Piper retrofractum Vahl. fruit had been completed. Biolarvacide tests are conducted on instar III larva with varying concentration. Aedes aegypti 10, 30, 50 and 80 ppm and Anopheles aconitus 10, 20, 30 and 40 ppm for 24 hours. Percentage of death for Aedes aegypti larva were 2, 35, 58 and 79% with LC50 = 44.484 ppm, respectively, whereas Anopheles aconitus 27, 100, 100 and 100% with LC50=11.39 ppm. Results of TLC using a Dragendorff spray reactor indicated presence of alkaloid with Rf = 0.26 and has yellow orange fluorescence at UV366.

Key words: Piper retrofractum, Biolarvacide, Aedes aegypti, Anopheles aconitus

PENDAHULUAN

Malaria dan demam berdarah merupakan penyakit tropis dan menimbulkan epidemi yang

luas dan cepat (Lailatul et al., 2010). Nyamuk adalah ancaman utama bagi 2 milyar penduduk

yang tinggal di daerah tropis (Aarthi et al., 2010). Di Indonesia demam berdarah telah menjadi

masalah kesehatan selama 41 tahun terakhir. Pada tahun 2009 provinsi DKI Jakarta merupakan

2

provinsi dengan kasus DBD tertinggi yaitu 313 kasus per 100.000 penduduk. Kasus malaria dari

tahun 2006 sampai 2009 dilaporkan terjadi kasus KLB (kejadian luar biasa) di pulau Jawa,

Sumatera dan Sulawesi dengan total jumlah penderita adalah 1.989 orang dan yang meninggal

sebanyak 11 orang. Selama ini pengendalian nyamuk Anopheles dan aedes Aegypti masih

menggunakan insektisida kimia yang tidak ramah lingkungan dan beresiko terhadap resistensi

nyamuk terhadap insektisida (Istimuyasaroh, 2009), oleh karena itu, diperlukan adanya

biolarvasida atau bioinsektisida yang mudah terurai di alam sehingga tidak mencemari

lingkungan dan relatif aman bagi manusia (Moehammadi, 2005).

Salah satu sumber daya alam Indonesia yang berpotensi menjadi biolarvasida adalah buah

cabe Jawa (Piper retrofractum Vahl.). Beberapa penelitian yang menunjukkan bahwa tanaman

famili Piperaceae mempunyai aktivitas larvasida, diantaranya tanaman Piper nigrum terhadap

larva nyamuk Aedes aegypti, senyawa yang mempunyai aktivitas adalah piperin dengan LC50

1,53 ppm, piperonalin A (1,46 ppm), ekstrak etanol (0, 98 ppm) (Simas et al., 2007), ekstrak

etanol Piper longum dengan LC50 2,23 ppm, Piper ribesoides (8,13 ppm) dan Piper

sarmentosum (4,06 ppm) (Chaitong, 2006). Ekstrak etanol biji P. guinensa dan ekstrak etanol

buah P. angulata mempunyai aktivitas terhadap larva nyamuk Anopheles gembiae yang

merupakan satu keluarga dengan Anopheles aconitus dengan LC50 masing-masing 0,028 ppm

dan 2,50 ppm (Aina et al., 2009).

Tanaman Piper retrofractum Vahl. merupakan tanaman yang banyak tersebar di Indonesia.

Kandungan tanaman ini adalah piperin, piperidin, retrofraktamida A, guaninsin, piperlonguminin

dan pelitorin (Miyakado et al., 1989). Dilihat dari senyawa-senyawa yang terkandung di

dalamnya, tanaman ini berpotensi sebagai biolarvasida. Oleh sebab itu penelitian terhadap

tanaman Piper retrofraktum Vahl. perlu dilakukan. Tujuan dilakukan penelitian adalah

memperoleh larvasida yang ramah lingkungan dan tidak berbahaya bagi manusia.

METODE PENELITIAN Alat

bejana kaca, pengaduk kayu, vacuum rotary evaporator, penangas air, cawan perselen,

beaker glass (pyrex), batang pengaduk, container uji larvasida, pipet tetes, flakon, labu takar 10

ml, gelas ukur 5,10 dan 100 ml, tusuk gigi, pipa kapiler, bejana kromatografi, lampu UV254 dan

UV366 serta seperangkat alat semprot.

3

Bahan

Simplisia kering buah Piper retrofraktum Vahl., etanol 96% teknis, larva nyamuk Anopheles

aconitus dan Aedes aegypti yang diperoleh dari B2P2VRP Salatiga, CMC Na 1%, aquadest, fase

diam silica GF254, fase gerak (n-heksan:etil asetat) dan pereaksi semprot Dragendorf

Tempat Penelitian

Pembuatan ekstrak etanol 96% fraksi semi polar buah Piper retrofraktum Vahl. dilakukan di

Fakultas Farmasi, Univesitas Muhammadiyah surakrta. Uji biolarvasida dilakukan di Balai Besar

Penelitian dan Pengembangan Vektor Reservoir Penyakit (B2P2VRP) Salatiga, Jawa Tengah.

Jalannya Penelitian

1. Persiapan simplisia

Sebanyak 1,8 kg buah Piper retrofractum dibersihkan dan dikeringkan dalam oven 50oC

selama 5 hari kemudian diserbukkan menggunakan blender (Chansang et al, 2005)

2. Ekstraksi

Serbuk kering buah Piper retrofractum ditimbang sebanyak 1 kg, kemudian ditempatkan

dalam bejana gelas untuk maserasi. Serbuk direndam dalam etanol 96% sebanyak 7500 mL

selama 3 hari sambil sering digojog, kemudian hasil maserasi disaring dengan kain flannel bersih

sehingga didapatkan filtrat etanol dan ampas. Ampas diremaserasi 2 kali. Filtrat etanol yang

didapat dipekatkan dengan menggunakan evaporator sehingga diperoleh ekstrak kental buah

Piper retrofractum. Sebesar 19,54%.

3.Fraksinasi

Sebelum melakukan fraksinasi dilakukan optimasi fase gerak menggunakan metode KLT.

Ekstrak kering yang didapat, dilarutkan dalam etanol. Ekstrak kering yang digunakan untuk

proses KCV sebanyak 25 g dan diimpregnasi dengan silika impreg G60 (30-70 mesh) sebanyak

dua kali lipat berat sampel yaitu 50 g. Kemudian ekstrak yang telah diimpreg dimasukkan dalam

kolom kromatografi cair, dan dielusi dengan tingkat kepolaran yang meningkat yaitu n-heksan :

etil asetat (9:1), n-heksan : etil asetat (8:2), n-heksan:etil asetat (7:3), n heksan:etil asetat (5:5)

masing-masing 3 kali penuangan sebanyak 75 ml dimulai dari pelarut nonpolar ke polar dan

etanol ditambahkan terakhir. Masing-masing fraksi ditampung di dalam botol dan didapatkan 15

fraksi yang kemudian ditotolkan pada lempeng KLT silika GF254 untuk dilakukan penggabungan

hasil fraksi.

4

4. Uji Larvasida

a. Pembuatan larutan stok

Orientasi dilakukan terhadap beberapa pelarut (air, CMC Na dan DMSO dengan konsentrasi

fraksi semi polar 100, 200, 300, 500 dan 1000 ppm). Pada kosentrasi tersebut ternyata pelarut air

dan DMSO membuat larutan menjadi keruh dan kemungkinan larva tdak bisa terdeteksi dengan

baik, berbeda dengan CMC Na 1% , dengan konsentrasi 1000 ppm keadaan larutan masih jernih

dan bisa dipakai untuk mendeteksi larvasida yang mati ataupun masih hidup

b. Uji pendahuluan

Seri konsentrasi sampel dibuat dengan melarutkan fraksi semi polar buah cabe Jawa.

menggunakan pelarut CMC Na 1%. Seri konsentrasi yang dibuat yaitu 10, 80, 150, 300 dan 500

ppm. Sebagai kontrol digunakan CMC Na yaitu pelarut terpilih sebanyak 2 mL kemudian

ditambahkan air sampai volume 100 mL. Masing-masing larutan tersebut dimasukkan ke dalam

kontainer berbeda dan diberikan 25 ekor larva nyamuk instar III untuk tiap kontainer. Hal ini

dilakukan sebanyak 3 kali replikasi untuk masing-masing larva uji dan diamati secara berkala

selama 24 jam perlakuan (Lailatul et al, 2010).

Berdasarkan hasil pengamatan kematian larva Anopheles aconitus pada pengamatan 24 jam

dengan konsentrasi 50, 100, 500, dan 1000 ppm menunjukkan larva mati 100%. Karena pada

konsentrasi terendah yaitu 50 ppm dapat menimbulkan 100% kematian maka dibuat seri

konsentrasi di bawah 50 ppm yaitu 10, 20, 30 dan 40 ppm. Sedangkan pada larva Aedes aegypti

mati 100% pada konsentrasi 100 ppm, maka dibuat seri konsentrasi di bawah 100% yaitu 10, 30,

50 dan 80 ppm.

Pengamatan terhadap kematian larva dilakukan dengan menggoyang kontainer dan

menyentuh larva dengan jarum, apabila larva tidak bergerak maka larva tersebut dikatakan mati

(Lokesh et al, 2010). Hasil pengamatan kemudian diolah menggunakan analisis probit untuk

memperoleh nilai LC50 (Suirta et al, 2007).

5. Kromatografi Lapis Tipis

Dilakukan penelusuran fase gerak yang sesuai dengan perbandingan etil asetat:n-heksan. Uji

dengan KLT dilakukan dengan menotolkan sampel dengan konsentrasi 1%, dibuat dengan

melarutkan fraksi semipolar ekstrak etanol 96% buah cabe Jawa sebanyak 10 mg dalam 1 mL

aceton. Pengembangan dilakukan dalam bejana yang telah dijenuhkan dengan bantuan kertas

5

saring. Jarak pengembangan 5 cm dengan fase gerak yaitu n-heksan:etil acetat (4:1). Hasil

pengembangan dideteksi dengan sinar UV 254 dan 366 nm serta pereaksi semprot.

Analisis Data

Analisis data menggunakan analisis probit dengan metode Miller dan Tinter dimana

persentase larva mati dirubah menjadi probit dengan menggunakan tabel transformasi probit.

Kemudian dibuat kurva log konsentrasi versus probit larva yang mati. Selanjutnya dengan

mentransformasikan persentase kematian larva sebesar 50% menjadi nilai probit dan

mendistribusikannya ke dalam garis regresi kurva, maka LC50 sampel dapat ditentukan.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Fraksinasi Ekstrak Etanol 96% Buah Piper retrofractum

Metode yang digunakan dalam fraksinasi adalah KCV dimana menggunakan fase gerak

dengan kepolaran bertingkat yaitu n-heksan:etil asetat (9:1), n-heksan:etil asetat (8:2), n-

heksan:etil asetat (7:3) dan n-heksan:etil asetat (5:5) masing-masing dielusi 3 kali sebanyak 75

mL dimulai dari pelarut nonpolar ke polar. Etanol dimasukkan terakhir dengan 2 kali elusi

sebanyak 75 mL.

Gambar 1. Kromatogram fraksinasi ekstrak etanol 96% buah P. retrofractum dengan fase gerak n-

heksan:etil asetat (4:1), fase diam GF254, jarak pengembangan 5 cm, pendeteksi UV366.

Berdasarkan gambar 1 dapat dilihat bahwa sampel atau ekstrak memiliki 3 komponen yang

diduga salah satu komponen tersebut adalah senyawa piperin yang merupakan senyawa mayor

atau marker dalam ekstrak keluarga piperaceae dalam hal ini berpotensi sebagai larvasida. Rf

masing-masing komponenen sampel secara berturut-turut yaitu komponen 1 (Rf=0,1), komponen

1

2

3

  1

  1

6

2 (Rf=0,3) dan komponen 3 (Rf =0,7). Adosraku et al. (2013), senyawa piperin memiliki

(Rf=0,285) dengan fase gerak n-heksan:etil asetat (3:1). Sehingga pada bercak no 2 dengan

(Rf=0,3) kemungkinan besar adalah piperin. Seharusnya analisis KLT dilengkapi dengan

kromatografi kualitatif fraksi dengan standar piperin. Karena belum diperoleh piperin standar,

sehingga analisis KLT tidak dilakukan.

Adapun struktur piperin sebagai senyawa marker dalam keluarga piperaceae adalah:

Gambar 2. Struktur molekul piperin

Fraksinasi menggunakan kromatografi fase normal dimana fase diam lebih polar

dibandingkan fase gerak. Bercak yang berada paling atas merupakan senyawa nonpolar karena

terbawa fase gerak yang di tengah adalah semipolar dan yang paling bawah adalah senyawa

polar karena tertahan di fase diam yang bersifat polar. Tabel 1. Penggabungan fraksi-fraksi hasil fraksinasi dengan KCV

Fraksi yang digabung Keterangan

1-4 6-11 12-15

Senyawa nonpolar Senyawa semipolar

Senyawa polar

Kelemahan penelitian dengan metode fraksinasi adalah kemungkinan terjadi kesalahan dalam

penggabungan komponen (penggabungan senyawa polar, semipolar dan nonpolar) sehingga akan

mempengaruhi hasil rendemen dan hasil uji (apakah aktivititas larvasida karena senyawa

semipolar sendiri atau ada senyawa lain yang ikut tercampur di dalamnya).

Uji Aktivitas Larvasida Buah Cabe Jawa

Uji larvasida fraksi semipolar ekstrak etanol 96% buah cabe jawa (P retrofractum)

dilakukan pada larva nyamuk Aedes aegypti dan Anopheles aconitus. Larva yang digunakan

adalah instar III. Instar III digunakan karena memiliki alat-alat tubuh yang sudah lengkap,

sedangkan instar IV tidak digunakan karena dinding tubuh sudah keras sehingga kurang efektif

jika diberi larvasida.

7

Sebagai kontrol negatif yaitu CMC Na yang membuktikan bahwa tidak ada efek toksik pada

larva. Digunakan CMC Na karena dengan pelarut lain terjadi kekeruhan yang mengakibatkan

larva tidak teramati. Sedangkan pada orientasi pelarut dengan CMC Na cairan kelihatan jernih

dan larva bisa diamati.

Tabel 2. Pengaruh perlakuan fraksi semipolar ekstrak etanol 96% buah cabe jawa (P retrofractum) terhadap kematian larva Aedes aegypti pada berbagai kelompok perlakuan n=4 setelah pengamatan 24 jam.

Konsentrasi ppm

% kematian I II III IV X±SD

10 30 50 80

kontrol negatif

4 52 64 80 0

4 32 32 72 0

0 32 64 80 0

0 24 72 84 0

2±2,31 35±11,95 58±17,74 79±5,03

0±0

Pada kontrol negatif tidak terdapat larva yang mati. Sedangkan pada kelompok perlakuan

dengan fraksi semipolar ekstrak etanol 96% buah cabe Jawa dengan berbagai konsentrasi dari

kecil ke besar yaitu 10, 30, 50 dan 80 ppm dengan persentase kematian larva berturut-turut

adalah 2, 35, 58 dan 79%. Pada tabel 2, nilai SD pada konsentrasi 30 dan 50 ppm besar (lebih

dari 10) yang berarti simpangan baku atau variasi sebaran data besar, hal ini kemungkinan

disebabkan oleh kesalahan oleh praktikan seperi ketidakseragaman pemilihan larva nyamuk

instar III dan tidak teliti dalam melihat kematian larva. Tabel 3. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol 96% fraksi semipolar buah cabe Jawa (P. retrofractum)

terhadap kematian larva Anopheles aconitus pada berbagai kelompok perlakuan n=4 setelah pengamatan 24 jam.

Konsentrasi (ppm) % kematian

I II III IV X±SD

10 20 30 40

kontrol negatif

20 100 100 100 0

12 100 100 100 0

24 100 100 100

0

28 100 100 100 0

27±6,83 100±0 100±0 100±0 0±0

Pemberian ekstrak etanol 96% fraksi semipolar buah cabe Jawa pada konsentrasi 10, 20,

30 dan 40 ppm bisa menyebabkan persentase kematian secara berturut-turut yaitu 27, 100, 100

dan 100%. Percobaan ini menunjukkan bahwa persentase kematian 100% larva Anopheles

aconitus hanya memerlukan konsentrasi 20 ppm pada pengamatan 24 jam (Tabel 3)

8

Hasil pengujian ekstrak etanol 96% fraksi semipolar buah cabe Jawa dengan berbagai

tingkat konsetrasi pada sampel dilakukan berdasarkan standar WHO dengan tujuan mencari LC50

dengan metode analisis probit Miller dan Tinter yaitu log konsentrasi vs probit menunjukkan

bahwa pada larva nyamuk Aedes aegypti menghasilkan LC50 sebesar 46,484 ppm sedangkan

pada larva nyamuk Anopheles aconitus LC50 sebesar 11,39 ppm.

Gambar 2. Grafik perbandingan LC50 ekstrak etanol 96% buah Piper retrofractum dengan LC50 fraksi polar, semipolar dan nonpolar terhadap larva nyamuk Aedes aegypti dan Anopheles aconitus pada pengamatan 24

jam.

Pada pemberian dengan ekstrak etanol 96% buah Piper retrofractum masing-masing

terhadap larva nyamuk Anopheles aconitus dan Aedes aegypti menghasilkan LC50 sebesar 4,69

dan 26 ppm, fraksi nonpolar (10,09 dan 22,68 ppm), fraksi semipolar (11,39 dan 44,84 ppm) dan

fraksi polar (13,72 dan 80,43 ppm). Hasil ini menunjukkan potensi larvasida yang paling besar

terhadap larva nyamuk Anopheles aconitus dan Aedes aegypti adalah ekstraknya. Hal ini

kemungkinan disebabkan karena adanya kandungan senyawa aktif dalam ekstrak buah cabe Jawa

lebih banyak dan lengkap dibanding fraksi-fraksinya, adanya reaksi sinergisme antar senyawa

yang terkandung dalam ekstrak cabe Jawa yang berkhasiat sebagai larvasida antara lain yaitu

piperin, retrofraktamid A (Changsang et al., 2005) dan piperanolin (Chaitong et al., 2006).

Ekstrak etanol buah Piper retrofractum, fraksi nonpolar, semipolar dan polar lebih berpotensi

terhadap larva nyamuk Anopheles aconitus daripada Aedes aegypti instar III dilihat dari LC50

terhadap larva nyamuk Aedes aegypti lebih tinggi dibandingkan Anopheles aconitus. Zat toksik

yang berperan dalam mematikan larva adalah alkaloid. Alkaloid yang masuk ke dalam tubuh

larva melalui absorbsi dan mendegradasi sel kulit, selain itu alkaloid juga mengganggu kerja

sistem saraf larva (Nopianti, 2008). Dilihat dari morfologi, nyamuk Anopheles aconitus dan

Aedes aegypti memiliki beberapa perbedaan pada tahap menjadi larva yaitu Anopheles aconitus

tidak mempunyai siphon (alat pernafasan di dalam air) sehingga Anopheles aconitus banyak

4.69 10.09 11.39 13.7226 22.68

44.48

80.43

ekstrak nonpolar semipolar polar

A. aegypti A. aconitus

9

hidup dipermukaan air untuk bernafas sedangkan Aedes aegypti memiliki alat pernafasan

tersebut. Ukuran larva nyamuk Aedes aegypti lebih besar daripada Anopheles aconitus (Ginanjar,

2008). Ukuran tubuh kecil berarti luas permukaan tubuh besar, memungkinkan Anopheles

aconitus menyerap alkaloid lebih banyak daripada Aedes aegypti, terpaparnya larva nyamuk oleh

senyawa alkaloid membuat tubuh larva menjadi lemah dan akan jatuh ke dalam air, masuknya

Anopheles aconitus ke dalam air membuatnya tidak bisa bernafas karena tidak mempunyai

siphon sehingga mempercepat kematiannya. Aedes aegypti mempunyai struktur tubuh yang lebih

besar (luas permukaan tubuh lebih kecil), alkaloid yang diabsorbsi kecil dan memiliki siphon

(membantu pernafasan dalam air) sehingga Aedes aegypti lebih resisten daripada Anopheles

aconitus terhadap fraksi semipolar buah cabe Jawa.

Gambar 3. Grafik nilai perbandingan LC50 ekstrak etanol 96% fraksi semipolar buah cabe Jawa dengan tanaman famalili piperaceae yang lain terhadap larva nyamuk Aedes aegypti .

Pada pemberian ekstrak etanol 96% fraksi semipolar buah Piper retrofractum, LC50

terhadap larva nyamuk Aedes aegypti yaitu 44,48 ppm. Pada penelitian yang dilakukan Chaitong

et al. (2006) menggunakan ekstrak etanol dari 3 keluarga piperaceae yaitu P. longum, P.

robesoides dan P. sarmentosum dengan LC50 masing-masing (2,23, 8 dan 4,06 ppm). Simas et al.

(2007) juga melakukan penelitian menggunakan ekstrak etanol buah P. nigrum dengan LC50

0,98 ppm. Dari hasil tersebut dapat diketahui bahwa yang paling berpotensi sebagai larvasida

terhadap larva nyamuk Aedes aegypti secara berturut-turut adalah P. nigrum, P. longum, P.

sarmentosum, P. robesoides dan terakhir adalah P. retrofractum (fraksi semipolar). Dari

perbandingan ini dapat diketahui bahwa dengan menggunakan fraksi semipolar malah

menurunkan aktivitas larvasida dari buah Piper retrofractum.

2.23 8 4.06 0.98

44.48

P.longum P. robesoides P. sarmentosum P. nigrum P. retrofractum

Aedes aegypti

Analisi

Vahl. d

K

adalah

Fase d

perband

alkaloid

Gamheksan

Tabel 4gerak n-

Be

Dragen

dengan

Beberap

piperici

Mo

alkaloid

tersebut

is kandung

dengan KLT

Kandungan k

alkaloid. A

diam yang

dingan n-h

d adalah rea

mbar 4. Gambn:etil asetat (

4. Hasil anal-heksan:etil a

Rf 0,26

erdasarkan g

dorf bercak

sinar tamp

pa alkaloid

ida (Chaiton

ortalitas larv

d yang terk

t merupaka

an alkaloid

T

kimia yang

Analisis kan

digunakan

eksan:etil

agen sempro

bar KLT eks(4:1), fase dia

lisis senyawa asetat (4:1), fa

6

gambar dap

k menghas

pak. Hasil t

yang telah

ng et al., 20

va uji diseb

kandung pad

an senyawa

d fraksi sem

terdapat pa

ndungan kim

adalah sil

asetat (4:1

ot Dragendo

strak etanol 9am silika GF2

alkaloid frakase diam silik

cm

pat dilihat b

ilkan fluor

tersebut me

dilaporkan

006), piperin

babkan ada

da ekstrak e

a kimia pe

Pendeteks

Rf=0

mipolar ek

ada fraksi se

mia tersebut

lika Gel G

). Penamp

orf.

96% fraksi se254 , pereaksi spendeteksi U

ksi semipolarka GF254 , perm, pendeteksi

UV3kuning j

bahwa berca

rosensi war

enunjukkan

n dari tanam

n dan pipern

anya kandun

etanol 96%

ertahanan t

si UV366

0,26

kstrak etano

emipolar ek

t dilakukan

GF254. Fase

akan berca

emipolar buasemprot Drag

UV366

r ekstrak etanreaksi semproi UV366.

66 ingga

ak tersebut

rna kuning

positif alk

man P. retro

noalin (Ago

ngan senyaw

% fraksi sem

tumbuhan y

ol 96% bua

kstrak etano

n dengan kr

e gerak ya

ak digunak

ah cabe Jawagendorf, jara

nol 96% buahot Dragendor

setelah dis

pada UV3

kaloid (Wag

ofractum ad

oes, 2010).

wa kimia tu

mipolar buah

yang terma

ah Piper ret

ol 96% buah

romatografi

ang diguna

kan untuk

a dengan fase ak pengemban

h cabe Jawa drf, jarak peng

Dragendocoklat

semprot den

366 dan ora

gner dan Bl

dalah retrofr

umbuhan y

h cabe Jaw

asuk dalam

10

trofractum

h cabe Jawa

i lapis tipis

kan adalah

mendeteksi

gerak n-ngan 5 cm,

dengan fase gembangan 5

orf

ngan reagen

anye coklat

ladt, 1996)

raktamid A

yang berupa

wa. Senyawa

m metabolit

0

a

.

h

i

5

n

t

.

,

a

a

t

11

sekunder atau aleokimia yang dihasilkan pada jaringan tumbuhan dan dapat bersifat toksik

(Yeni, 2008).

Apabila larva memakan makanan yang mengandung senyawa aleokimia toksik, maka larva

tersebut tidak mencapai berat kritis menjadi pupa, hal ini disebabkan larva menurunkan laju

metabolisme dan sekresi enzim pencernaan, sehingga energi untuk pertumbuhan berkurang

(Nursal, 2005).

Hasil di atas dapat dijadikan acuan bahwa fraksi semipolar ekstrak etanol 96% buah cabe

Jawa dapat dimanfaatkan sebagai biolarvasida terutama pada nyamuk Aedes aegypti dan

Anopheles aconitus. Manfaat lain dari hasil ini adalah menemukan obat pembasmi serangga atau

nyamuk alamiah (biosinsektisida) yang ramah lingkungan, selain itu mengurangi dampak negatif

yang ditimbulkan insektisida sintetis.

KESIMPULAN DAN SARAN

Berdasarkan hasil penelitian, dapat disimpulkan bahwa fraksi semipolar buah cabe Jawa

(Piper retrofractum) mempunyai aktivitas larvasida terhadap larva nyamuk Aedes aegypti dan

Anopheles aconitus dengan LC50 masing-masing adalah 44,484 dan 11,39 ppm dengan senyawa

kandungan senyawa utama dari golongan alkaloid pada Rf 0,26 dan warna kuning jingga pada

UV366 yang menunjukkan adanya piperin.

Saran pada penelitian ini adalah perlu dilakukan penelitian lanjutan aktivitas larvasida fraksi

semipolar ekstrak etanol 96% terhadap larva jenis lain.

DAFTAR PUSTAKA

Aarthi, N., Murugan, K., 2010, Larvicidal and repellent activity of Vetiveria zizanioides L, Ocimum basilicum Linn and the microbial pesticide spinosad against malarial vector, Anopheles stephensi Liston (Insecta: Diptera: Culicidae), Journal of Biopesticides, 3, 199-204.

Agoes, Azwar. 2010. Tanaman Obat Indonesia. Buku I. Salemba Medika, 28, Jakarta.

Alfiah, Siti., A Maharani I. P., dan Boewono. D. T., 2010, Uji Efikasi Larvasida Berbahan Aktif Pyriproxyfen Sebagai Insect Growth Regulator (IGR) Terhadap Larva Anopheles aconitus di Laboratorium. Journal Vektor Dan Reservoir Penyakit (VEKTORA), II, I.

Chansang, Uruyakorn., Zahiri, N. S. J., Bansiddhi, T., Boonruad, P., Thongsrirak, J., Benjapong,

N., and Mir S. M., 2005, Mosquito Larvicidal Activity of Aqueous Extracts of Long

12

Pepper (Piper retrofractum Vahl) from Thailand, Journal of Vector Ecology 30 (2), 195-200.

Chaitong, Udom, Choochote, W., Kamsuk, K., Jitpakdi, A., Pongsri T., Chaiyasit, Daruna, D.

C., Teutum, B. and Pitasawat, B., 2006, Larvasidal Effect of Pepper Plants on Aedes aegypti (L.) (Diphtera:Culicidae), Journal of Vector Ecologi 31 (1), 138-144.

Depkes RI, 1980, Materia Medika Indonesia Jilid IV, Jakarta, Departemen Kesehatan Republik

Indonesia.

Djakaria, S., 2000, Parasitologi Kedokteran, Pendahuluan dalam Gandahusada, S., Ilahude, H.D., Pribadi, W, Parasitologi Kedokteran, 3, 217, Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta

Hadidjaja, Pinardi dan Sri S. Margono, 2011, Dasar Parasitologi Klinik, Badan Penerbit

Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, 5, Jakarta.

Hoedojo, R., 1988, Vector Penyakit Protozoa dalam Parasitologi Kedokteran, FKUI, Jakarta. Isnawati A, Endreswari S, Pudjiastuti, Murhandini, 2002, Efek mutagen ekstrak etanol buah

cabe jawa (Piper retrofractum Vahl.). Jurnal Bahan Alam Indonesia, 1(2), 63-67. Lokesh, R., Barnabas, E. L., Saurav, K., Sundar, K., 2010, Larvicidal Activity of Trigonella

foenum and Nerium oleander Leaves Against Mosquito Larvae Found in Vellore City, India, Current Research Journal of Biological Sciences, 2(3), 154-160.

Moehammadi, N., 2005, Potensi Biolarvasida Ekstrak Herba Ageratum conyzoides Linn. dan

Daun Saccopetalum horsfieldii Benn. Terhadap Larva Nyamuk Aedes aegypti L., Journal Berk. Penel. Hayati, 10, 1-4.

Nopianti, S., D. Astuti, S., Darnoto, 2008, Efektivitas Ekstrak Buah Belimbing Wuluh (Averrhoa bilibi L.) terhadap Kematian Larva Nyamuk Anopheles aconitus instar III. Jurnal Kesehatan 1(2), 103-104

Nursal, S., 2005. Kandungan Senyawa Kimia Ekstrak Daun Lengkuas (Lactuca indica Linn),

Toksisitas dan Pengaruh Subletalnya terhadap Mortalitas Larva Nyamuk Aedes aegypti L., Laporan Penelitian pada Universitas Sumatera Utara Medan.

Okinyo, Denis, 2002, Bio prospecting for phytochemicals for Anopheles gambiae larvae control, Msc thesis, Kenyatta University, Nairobi, Kenya.

Riduwan, 2004, Statistika untuk Lembaga & Instansi pemerintah/Swasta, Alfabeta, Bandung. Simas, Kato, N. Elisangela, Kuster C. L, M. R, Lage, M. C. S. and Filho, A. M. O., 2007,

Potensial use of Piper nigrum Ethanol Extrac Against Pyrethroid-Resistant Aedest aegypti larvae, Revista da Sociedade Brasiliera de Medicina Tropica, 40(4), 405-407.

13

Suirta, I. W. N. M., Puspawati dan Gumiati, N. K., 2007, Isolasi dan Identifikasi Senyawa Aktif Larvasida dari Biji Mimba (Azadirachta indika A. Juss) Terhadap Larva Nyamuk Demam Berdarah ( Aedes Aegypti).

Wasito, Hendri, 2011, Obat Tradisional Kekayaan Indonesia, Graha Ilmu, 66-68, . Yogyakarta.

Widoyono, 2012, Penyakit Tropis, Erlangga, 60, Jakarta. Yang, Cheol, Y.S. G., Lee, H. K., Lee, M. K., Kim, Sang, H. L., Hoi, S. L., 2002, A Piperidine

Amide Extracted from Piper Longum L. Fruit Shows Activity against Aedes Aegypti Mosquito Larvae, Journal of Agricultural and Food Chemistry, 3765-3766.